Orientador: Sara Teresinha Olalla Saad

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Resumo: Os eventos de migração e adesão das células progenitoras hematopoéticas são cruciais para a sua manutenção nos nichos da medula óssea e são regulados por diversos fatores, dentre eles as RhoGTPases. ARHGAP21 é uma proteína RhoGAP (RhoGTPase activating protein, que regulam negativamente as...

Resumo: Os eventos de migração e adesão das células progenitoras hematopoéticas são cruciais para a sua manutenção nos nichos da medula óssea e são regulados por diversos fatores, dentre eles as RhoGTPases. ARHGAP21 é uma proteína RhoGAP (RhoGTPase activating protein, que regulam negativamente as RhoGTPases), e atua na migração e adesão celulares. O papel da Arhgap21 na hematopoese ainda é desconhecido. O objetivo geral do presente estudo foi estudar a função da Arhgap21 na migração e adesão das células progenitoras hematopoéticas. Neste trabalho, mostramos que ainda não foi possível a obtenção do camundongo nocaute para Arhgap21, pois parece que morrem antes do nascimento. O estudo foi realizado com os camundongos Arhgap21+/-, cuja expressão gênica e protéica de Arhgap21 está reduzida. As células progenitoras hematopoéticas Arhgap21+/- apresentaram menor quimiotaxia induzida por CXCL-12 e redução da adesão à fibronectina, o que provavelmente levou a um homing ineficiente para a medula óssea e para o baço. Observou-se também que o microambiente da medula óssea e do baço com redução de Arhgap21 leva à ineficiência do homing das células progenitoras hematopoéticas normais. Não foi observada alteração na expressão gênica e na freqüência de células expressando CXCR-4, bem como não houve diferença na secreção de CXCL-12. As células da medula óssea Arhgap21+/- apresentaram maior expressão de Cdc42 e parecem possuir maior atividade desta RhoGTPase. Pela primeira vez se descreve o papel da Arhgap21 na hematopoese normal e ela parece ser um importante regulador da migração, adesão e homing das células progenitoras hematopoéticas, provavelmente pela regulação negativa de Cdc42, através da sua função GAP

Abstract: Migration and adhesion of hematopoietic progenitor cells are crucial events for their maintenance on bone marrow niches. The role and mechanisms underlying hematopoietic progenitors migration and adhesion has been extensively studied and RhoGTPases have been implicated in these events....

Abstract: Migration and adhesion of hematopoietic progenitor cells are crucial events for their maintenance on bone marrow niches. The role and mechanisms underlying hematopoietic progenitors migration and adhesion has been extensively studied and RhoGTPases have been implicated in these events. Regulators and effectors of RhoGTPases functions also have been studied in biology of hematopoietic progenitor cells. ARHGAP21 is a RhoGAP member, which function as negative regulators of RhoGTPases, and plays role in cell migration and adhesion. The aim of this study was to investigate the role of Arhgap21 in migration and adhesion of hematopoietic progenitor cells. It was not possible to generate a knockout mouse until now, because they die before birth, as results indicate. Heterozygous mice (Arhgap21+/-)v have reduction in Arhgap21 gene and protein expression and we used it as model. Hematopoietic Progenitor cells from Arhgap21+/- mice showed reduction in CXCL-12- induced chemotaxis as well as in fibronectin adhesion, which probably leaded to inefficient homing to wild-type bone marrow and spleen observed. In addition, homing of wild-type hematopoietic progenitor cells to Arhgap21+/- bone marrow and spleen was also reduced. It was not observed differences in CXCR-4 gene expression and frequency of progenitor hematopoietic cells expressing this receptor as well as in CXCL-12 secretion in Arhgap21+/- bone marrow or serum. It is the first time that the role of Arhgap21 in hematopoiesis is described and it seems to be an important regulator of hematopoietic progenitor cell migration, adhesion and homing, probably due to Cdc42 negative regulation by its RhoGAP function