Orientador: Wirla Maria da Silva Cunha Tamashiro

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Foi demonstrado anteriormente que macrófagos peritoneais de ratos, elicitados pelo tioglicolato e estimulados "in vitro" com lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli, liberavam no sobrenadante de cultura fator indutor (MNCF) e inibidor (NRIF) da migração de neutrófilos para o foco inflamatório...

Resumo: Foi demonstrado anteriormente que macrófagos peritoneais de ratos, elicitados pelo tioglicolato e estimulados "in vitro" com lipopolissacarídeo (LPS) de E. coli, liberavam no sobrenadante de cultura fator indutor (MNCF) e inibidor (NRIF) da migração de neutrófilos para o foco inflamatório (CUNHA & FERREIRA, 1986; TAVARES et alli, 1989, TAMASHIRO et alli, 1992). O MNCF foi recentemente caracterizado como uma proteína de 54 KDa, cuja atividade se faz através de um sítio ligante à D-galactose (DIAS-BARUFFI et alli, 1993). Ao contrário de outras citocinas, o MNCF induz migração de neutrófilos em ratos pré-tratados com glicocorticóides. Resultados preliminares apontam que o NRIF e o MNCF são na verdade o mesmo fator (TAVARES-MURTA et alli, 1993). No presente trabalho, procuramos investigar a produção de fatores similares ao MNCF /NRIF por macrófagos peritoneais de camundongos, estimulados ¿in vitro" com LPS, através de protocolo semelhante ao descrito por CUNHA & FERREIRA (1986). Os resultados aqui obtidos mostraram que macrófagos de camundongos, sob estímulo com LPS, liberam fatores capazes de induzir a migração de neutrófilos para cavidades peritoneais de camundongos e ratos. Esses fatores também foram ativos em animais tratados com dexametasona, à semelhança do que ocorre com o MNCF. Esses sobrenadantes foram capazes ainda de quando administrados endovenosamente, inibir a migração de neutrófilos induzida por estímulos inflamatórios, similarmente ao NRIF. A atividade indutora de migração de neutrófilos foi abolida desses sobrenadantes pela sua pré-incubação anticorpos anti-TNF. Esses resultados sugeriam que o TNFa detectado nos sobrenadantes de cultura de macrófagos era a com citocina responsável sobrenadante. A administração de TNFa recombinante murino (mrTNFa)reproduziu os resultados encontrados com os sobrenadantes de macrófagos, isto é, foi capaz de induzir, de modo dosedependente, a migração de neutrófilos para as cavidades peritoneais de camundongos pré-tratados com dexametasona. A migração de neutrófilos induzida pelo mrTNFa também foi bloqueada por anticorpo específico. Observou-se ainda que o pré-tratamento dos animais com anticorpo monoclonal anti-TNFa bloqueou a migração de neutrófilos induzida pela administração intraperitoneal de LPS. Esses resultados reforçam a hipótese de que entre as citocinas liberadas por macrófagos,residentes ou ativados,o TNFa é a que induz migração de neutrófilos em camundongos tratados com dexametasona