Orientador: Ricardo de Lima Zollner

Tese (doutorado) - Universidde Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas

Resumo: A excreção urinária de componentes da membrana basal, especificamente colágeno IV e laminina, foi determinada através de "immunoblotting", e estudada em ratos Wistar machos, diabéticos-induzido por drogas (aloxana e estreptozotocina) EV, e comparada a controles, em função do tempo de doença....

Resumo: A excreção urinária de componentes da membrana basal, especificamente colágeno IV e laminina, foi determinada através de "immunoblotting", e estudada em ratos Wistar machos, diabéticos-induzido por drogas (aloxana e estreptozotocina) EV, e comparada a controles, em função do tempo de doença. Estudamos, também, as funções renais: glomerular e tubular, avaliando, respectivamente, clearance de creatinina e de lítio. Além disso, aspectos morfológicos renais foram analisados utilizando-se técnicas de PAS e de imuno-histoquímica, para colágeno IV e laminina, com o objetivo de verificar possíveis alterações da membrana basal. Assim, pudemos observar excreções de frações urinárias de colágeno IV (88 e 75 kDa) e laminina (108 e 88 kDa), em ambos os modelos de DM, em todos os tempos estudados. Entretanto, a fração de 57 kDa da laminina, nos animais diabéticos-induzido por estreptozotocina, somente foi expressa a partir da 5a semana de doença, enquanto nos diabéticos- induzido por aloxana sua excreção foi verificada precocemente (2º dia). As alterações da função renal foram semelhantes nos dois modelos, porém de maneira mais intensa no modelo aloxânico. Dentre elas destacaram-se: diminuição progressiva da taxa de filtração glomerular, aumento da fração de excreção de sódio; e, diminuição da reabsorção proximal deste ion, não compensada por aumento da reabsorção distai. Os achados morfológicos evidenciaram espessamento da membrana basal do capilar glomerular e aumento da matriz mesangial, iniciando-se precocemente no diabetes melliíus aloxânico. De acordo com os dados observados neste estudo, concluímos que no DM induzido por aloxana e estreptozotocina, frações urinárias de colágeno IV e laminina podem ser utilizadas como marcadores precoces de nefropatia diabética. Outrossim, o DM induzido por aloxana promove alterações funcionais renais mais intensas, principalmente tubulares, quando comparado ao modelo induzido por estreptozotocina; em adição, as alterações morfológicas observadas pela técnica de imuno-histoquímica puderam ser correlacionadas às alterações bioquímico-funcionais-renais

Abstract: The urine excretion of basement membrane components, specifically collagen IV and laminin, was determinated by immunoblotting and analyzed in male diabetic Wistar rats diabetic-induced (alloxan and streptozotocin) and compared to controls, considering the disease period. We also studied...

Abstract: The urine excretion of basement membrane components, specifically collagen IV and laminin, was determinated by immunoblotting and analyzed in male diabetic Wistar rats diabetic-induced (alloxan and streptozotocin) and compared to controls, considering the disease period. We also studied the renal functions: glomerular and tubular, evaluating creatinine and lithium clearance, respectively Moreover morphological renal aspects were analyzed by using PAS and immunohistochemical staining, for collagen IV and laminin, with the purpose of examining possible alterations at the basement membrane. In this way, we could observe urine fractions excretions of collagen IV (88, 75 kDa) and laminin (108, 88 kDa), in both DM models, in all periods of study. However the laminin fraction of 57 kDa, in the streptozotocin-induced diabetic animals, was expressed only from the 5th week of the disease, while in the alloxan-induced diabetic animals their excretion was verified earlier (on the 2nd. day). The renal function alterations were similar in the two models, but with more intensity in the alloxan model. Among them we can underline following; progressive decrease of the glomerular filtration rate, increase of the fractional sodium excretion and decrease of the proximal reabsorption of this ion, not compensated by distal reabsorption increase. The morphological findings showed a thickness of the capilar glomerular basement membrane and an increase of the mesangial matrix, beginning earlier at the alloxanic diabetes mellUus. In accordance with the data observed in this study, we conclude that at the alloxan and streptozotocin induced DM, urine fractions of collagen IV and laminin can be used as early markers of diabetic nephropathy. Besides this, the alloxan-induced DM produces functional renal alterations with more intensity, mainly tubular, when compared to the streptozotocin-induced model; in addition, the morphological alterations observed by the immunohistochemical technic could be related to the renal biochemical- functional alterations