Orientador: Fabíola Taufic Monica Iglesias

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Resumo: É bem estabelecido que a acetilcolina (ACh) produz relaxamento da musculatura lisa vascular através da liberação endotelial do óxido nítrico (NO) e, portanto, é uma das ferramentas farmacológicas mais utilizadas para avaliar a integridade do endotélio. Experimentos preliminares feito pelo...

Resumo: É bem estabelecido que a acetilcolina (ACh) produz relaxamento da musculatura lisa vascular através da liberação endotelial do óxido nítrico (NO) e, portanto, é uma das ferramentas farmacológicas mais utilizadas para avaliar a integridade do endotélio. Experimentos preliminares feito pelo nosso grupo mostraram que a ACh não relaxou a aorta e nem artéria pulmonar de sagui (Callithrix jacchus), além de induzir contração neste último leito em vaso com endotélio íntegro. Assim, o presente estudo teve como objetivo caracterizar de maneira mais detalhada a resposta colinérgica em artéria pulmonar de sagui. Em artéria pulmonar, O ADP (0.01-100 µM) produziu relaxamento dependente da concentração, que foi reduzido a aproximadamente 42% na presença do L-NAME (100 ?M) ou da indometacina (inibidor não seletivo da cicloxigenase, 10 ?M). A ACh (0.00001-1 mM) induziu contração dependente da concentração com valores de potência (pEC50) e resposta maxima (Emax) de 5.83 ± 0.08 and 90 ± 5%, respectivamente. A Emax da ACh aumentou aproximadamente 28% e 22% na presença de L-NAME e após a remoção do endotélio, respectivamente. Os antagonistas muscarínicos mais seletivos para os subtipos M2 e M3, metoctramina e 4-DAMP, e a indometacina reduziram significativamente a contração induzida pela ACh. A estimulação elétrica (4-16 Hz, 80 V, 10 segundos de estimulação) induziu contração dependente da frequência que foi significativamente reduzida na presença de 4-DAMP (0.1 µM), metoctramina (0.1 µM) e fentolamina (10 ?M) e aumentada pela fisostigmina (10 µM). Na presença de hexametônio (1 ?M), fentolamina (10 µM) ou tetrodotoxina (1 ?M) a contração mediada pela ACh não foi alterada. A análise de imunofluorescência revelou a presença da colina acetiltransferase (ChAt) na tunica media. Estes dados mostram a presença de uma inervação colinérgica excitatória em artéria pulmonar de Callithrix jacchus

Abstract: It is well established that acetylcholine (ACh) produces relaxation of vascular smooth muscle by endothelial release of nitric oxide (NO) and thus is one of the most widely used pharmacological tools to assess the integrity of the endothelium. Preliminary experiments done by our group...

Abstract: It is well established that acetylcholine (ACh) produces relaxation of vascular smooth muscle by endothelial release of nitric oxide (NO) and thus is one of the most widely used pharmacological tools to assess the integrity of the endothelium. Preliminary experiments done by our group showed that ACh did not relax the aorta and pulmonary artery of marmoset (Callithrix jacchus), and induces contraction in the latter bed in vessel with intact endothelium. Thus, the present study aimed to characterize in more detail the cholinergic response in pulmonary artery marmoset. In pulmonary artery ADP (0.01-100 µM) produced concentration-dependent relaxation which was reduced to approximately 42% in the presence of L-NAME (100 µM) and indomethacin (nonselective cyclooxygenase inhibitor, 10 µM). ACh (0.00001-1mM) produced concentration-dependent contractions with potency values (pEC50) and maximum response (Emax) of 5.83 ± 0:08 and 90 ± 5%, respectively. The Emax of ACh increased by approximately 28% and 22% in the presence of L-NAME and after removal of the endothelium, respectively. The muscarinic antagonists more selective for subtypes M2 and M3, methoctramine and 4-DAMP, and indomethacin significantly reduced ACh-induced contraction. Electrical field stimulation (EFS 4-16 Hz, 80 V, 10 seconds of stimulation) induced frequency-dependent contraction, which was significantly reduced in the presence of 4-DAMP (0.1 µM), methoctramine (0.1 µM) and phentolamine (10 µM) and augmented by physostigmine (10 µM). In the presence of hexamethonium (1 µM), phentolamine (10 µM) or tetrodotoxin (1 µM) contraction mediated by ACh was not altered. The immunofluorescence analysis revealed the expression of choline acetyltransferase (Chat) in Tunica Media. These data show the presence of an excitatory cholinergic innervation in the pulmonary artery Callithrix jacchus