Orientador: Alba Regina Monteiro Souza Brito

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Resumo: As doenças inflamatórias intestinais (DII) compreendem doença de Crohn e reto-colite ulcerativa inespecífica, ambas caracterizadas por processo inflamatório crônico e descontrolado no intestino mediado por células do sistema imune. DII tem sido objeto de extensas pesquisas nos últimos anos;...

Resumo: As doenças inflamatórias intestinais (DII) compreendem doença de Crohn e reto-colite ulcerativa inespecífica, ambas caracterizadas por processo inflamatório crônico e descontrolado no intestino mediado por células do sistema imune. DII tem sido objeto de extensas pesquisas nos últimos anos; indefinição sobre etiologia e ausência de tratamento eficaz os justificam. Nesse cenário, produtos naturais surgem como alternativas terapêuticas, uma vez que moléculas com atividade farmacológica pronunciada, especialmente compostos fenólicos, têm merecido destaque. Neste trabalho foram avaliadas três frações orgânicas (aquosa - Aq, butanólica - BuOH, e acetato de EtOAc) obtidas a partir das cascas de Rhizophora mangle em modelos experimentais de colite induzida por dextrana sal sódico (DSS) em camundongos e ácido 2,4,6-tri-nitro-benzeno-sulfônico (TNBS) em ratos. BuOH (0.5 e 1.5 mg.Kg-1) e EtOAc (1.5 mg.Kg-1) foram efetivas no modelo de colite por DSS, enquanto BuOH 0.5 mg.K-1 e EtOAc 1.5 mg.Kg-1 mostraram-se eficazes na colite aguda por TNBS. No modelo sub-crônico de colite os tratamentos BuOH e EtOAc reduziram novamente os danos causados pelo TNBS, embora BuOH tenha se mostrado mais eficiente. A avaliação de mediadores envolvidos nesses modelos experimentais mostrou que tanto BuOH quanto EtOAc exercem ação sobre a atividade da glutationa peroxidase (GSH-Px) e mieloperoxidase (MPO) bem como sobre os níveis das citocinas pró-inflamatórias fator de necrose tumoral-? (TNF-?), interferon-? (IFN-?), interleucinas 1?, 6 e 12 (IL-1?, IL-6 e IL-12), além de reduzirem a expressão de ciclo-oxigenase-2 (COX-2) no modelo de DSS. No modelo sub-crônico de colite induzida por TNBS, às duas frações atuaram sobre a atividade da GSH-Px e catalase (CAT) e sobre os níveis de glutationa (GSH), TNF-? e IL-12; EtOH também reduziu os níveis de IL-6 e levou ao aumento de citocina anti-inflamatória interleucina-10 (IL-10), BuOH por sua vez mostrou-se eficaz em reduzir o índice de peroxidação lipídica (TBARS) e atividade da MPO, atuando também sobre a expressão de ciclo-oxigenase-1 (COX-1). A análise fitoquímica revelou presença de procianidinas oligoméricas nas duas frações ativas, BuOH e EtOAc, sugerindo que estas substâncias sejam responsáveis pelos efeitos produzidos pelos tratamentos experimentais. As frações BuOH e EtOAc apresentaram efeitos importantes sobre os componentes imune, inflamatório e oxidante em modelos experimentais de colite induzida por TNBS e DSS em doses consideradas baixas para uma mistura de substâncias. As procianidinas de R. mangle surgem então como alternativa terapêutica interessante sobre as DII

Abstract: Inflammatory bowel diseases (IBD) comprises Crohn's disease and ulcerative colitis, both are characterized by an immune-mediated chronic inflammatory process in the gut. IBD have been studied over the past few years; undefined etiology and the absence of effective treatments justify these...

Abstract: Inflammatory bowel diseases (IBD) comprises Crohn's disease and ulcerative colitis, both are characterized by an immune-mediated chronic inflammatory process in the gut. IBD have been studied over the past few years; undefined etiology and the absence of effective treatments justify these studies. In this scenario, natural products arises as therapeutic alternative, once various studies in animal models have shown efficient treatments. Nowadays, molecules with pronounced pharmacological activities, especially phenolic compounds, have been highlighted. In this work three organic fractions (aqueous - Aq, butanolic - BuOH and ethyl acetate - EtOAc) obtained from Rhizophora mangle barks were evaluated in experimental models of dextran sodium sulphate (DSS)-induced colitis in mice and 2,4,6-tri-nitro-benzene sulphonic acid (TNBS)-induced colitis in rats. BuOH (0.5 and 1.5 mg.Kg-1) and EtOAc (1.5 mg.Kg-1) were effective in the DSS-induced model, while BuOH (0.5 mg.Kg-1) and EtOAc (1.5 mg.Kg-1) were also effective in acute TNBS-induced model of colitis, which lead to the evaluation of these last ones in sub-chronic TNBS-induced models of colitis. In this model, both treatments reduced the injury provoked by the instillation of TNBS, although BuOH has shown more efficiency. The evaluation of the mediators involved in these experimental models showed that either BuOH as EtOAc act on the glutathione peroxidase (GSH-Px) and myeloperoxidase activities as well as on pro-inflammatory cytokines tumor necrosis factor- (TNF-?), interferon- (IFN-?) and interleukins -1?, 6 and 12 (IL-1, IL-6 and IL-12) levels, and down-regulation of ciclo-oxygenase-2 (COX-2) expression in the DSS-induced model of colitis. Whereas in the sub-chronic TNBS-induced model of colitis, both fractions showed effects on the GSH-Px and catalase (CAT) activities, and glutathione (GSH), TNF-? and IL-12 levels; EtOAc also reduced IL-6 levels and lead to the enhancement of the levels of an anti-inflammatory cytokine, interlukin-10 (IL-10), on the other hand BuOH showed to be efficient in reducing lipid peroxidation index (TBARS) and MPO activity, acting on the upregulation of cyclo-oxygenase-1 (COX-1). Phytochemistry analysis reveals the presence of oligomeric procyanidins in both fractions, BuOH and EtOAc, suggesting that these substances are responsible for the effects produced by the experimental treatments. BuOH and EtOAc fractions presented important effects on the immune, inflammatory and oxidant components in the experimental models of TNBS and DSS-induced colitis using doses, considered, lower for a mixture of substances. The procyanidins of R. mangle became an interesting alternative therapeutic for IBD