Orientador: Lília Freira Rodrigues de Souza Li

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas

Resumo: A esclerose hipocampal está associada à epilepsia de lobo temporal medial (ELT) e causa expressão alterada de receptores tais como o Receptor Metabotrópico de Glutamato (mGluR1). Contudo, ainda há controvérsias se sua expressão está aumentada ou diminuída em ELT. O Receptor Sensor de Cálcio...

Resumo: A esclerose hipocampal está associada à epilepsia de lobo temporal medial (ELT) e causa expressão alterada de receptores tais como o Receptor Metabotrópico de Glutamato (mGluR1). Contudo, ainda há controvérsias se sua expressão está aumentada ou diminuída em ELT. O Receptor Sensor de Cálcio (CASR), outro receptor da mesma família do mGluR1, é expresso em hipocampo, mas seu papel no cérebro ainda é desconhecido. VILIP-1 é uma proteína sensora de cálcio neuronal (NCS) expressa predominantemente no cérebro e em humanos e sua expressão foi mapeada por imunoistoquímica na subpopulação de neurônios piramidais em CA1 e CA4 de hipocampo. Sugere-se também que a ativação de mGluR possa regular a expressão de VILIP-1 durante a plasticidade hipocampal. No entanto, não há estudos associando VILIP-1 e esclerose hipocampal. Nós hipotetizamos que além do mGluR1, o CASR e o VILIP-1 estão associados a esclerose hipocampal em ELT. O objetivo deste trabalho foi analisar o padrão de expressão de VILIP-1, CASR e mGluR1, em hipocampo de pacientes com ELT submetidos a amigdalohipocampectomia. Nossos resultados demonstraram a presença de EH nos tecidos hipocampais de pacientes com ELT com redução no número de neurônios em CA1 e presença de intensa gliose. Pela análise da expressão dos transcritos VILIP-1, CASR e mGluR1 em hipocampo total utilizando PCR em tempo real não encontramos diferença na expressão dos RNAs mensageiros dos pacientes quando comparado com os controles. Entretanto, quando comparamos a expressão protéica em hipocampo de pacientes e controles, utilizando o método de imunoistoquímica, encontramos não somente redução significativa no número de neurônios presentes em CA1 de pacientes, mas também redução importante nos neurônios positivamente marcados para VILIP-1, CASR e mGluR1. Estes achados sugerem que não apenas mGluR1, mas também CASR e VILIP-1, estão associados à EH em pacientes com ELT

Abstract: Hippocampal sclerosis (HS) is associated to temporal lobe epilepsy (TLE) and cause altered expression of neurotransmitter receptors such as metabotropic glutamate receptor 1 (mGluR1). However, whether its expression level is increased or decreased in temporal lobe epilepsy is still...

Abstract: Hippocampal sclerosis (HS) is associated to temporal lobe epilepsy (TLE) and cause altered expression of neurotransmitter receptors such as metabotropic glutamate receptor 1 (mGluR1). However, whether its expression level is increased or decreased in temporal lobe epilepsy is still controversial. Calcium-sensing receptor (CASR), another receptor from the same family of mGluR1, is expressed in hippocampus, but its role in brain is unknown. VILIP-1, a neuronal calcium sensing protein (NCS) is expressed predominantly in brain and in humans its expression was identified by immunohistochemistry in subpopulations of pyramidal neurons in CA1 and CA4 in hippocampus. Activation of mGluR1 is suggested that may regulates VILIP-1 expression during hippocampal plasticity. However, there are no studies associating VILIP-1 and hippocampal sclerosis. We hypothesized that not only mGluR1 but also VILIP and CASR is involved in hippocampal sclerosis in TLE patients. The objective of this study was to analyze the pattern of expression of VILIP-1, CASR and mGluR1 in hippocampal tissues from patients with TLE who underwent amygdalohippocampectomy. Our results demonstrated the presence of hippocampal sclerosis in hippocampal tissues in patients with TLE with reduction in the number of neurons in CA1 and gliosis. By the expression analysis of the transcripts of VILIP-1, CASR and mGluR1 in total hippocampus using real time PCR, we did not find differences on mRNAS expression of patients compared with controls. However, when we compared the protein expression from hippocampi from patients with controls, by immunohistochemistry, we not only found an important reduction on neuron cell number in patients, but also an important reduction on positively stained neurons for VILIP-1, CASR and mGluR1, suggesting that not only mGluR1, but also CASR and VILIP1 are associated to HS in patients with TLE