Orientador: Edgard Graner

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba

Resumo: A enzima ácido graxo sintase (FASN), cuja expressão e atividade estão elevadas em várias neoplasias malignas humanas, é responsável pela síntese endógena de ácidos graxos saturados de cadeia longa e, consequentemente, pela a produção de fosfolipídios das membranas celulares. A inibição de...

Resumo: A enzima ácido graxo sintase (FASN), cuja expressão e atividade estão elevadas em várias neoplasias malignas humanas, é responsável pela síntese endógena de ácidos graxos saturados de cadeia longa e, consequentemente, pela a produção de fosfolipídios das membranas celulares. A inibição de FASN com orlistat (Xenical), uma droga anti-obesidade, é descrita como tendo propriedades anti-neoplásicas nos cânceres de próstata, mama, bem como no melanoma. Este composto parece desempenhar também um papel anti-angiogênico, uma vez que foi descrito como inibidor da proliferação de células endoteliais e da neovascularização em ensaio ex vivo. Em trabalho recente, realizado por nosso grupo de pesquisa, foi demonstrado que o tratamento de camundongos portadores de melanomas intraperitoneais com orlistat reduziu em cerca de 50% o número de metástases para linfonodos mediastínicos. Em outro estudo, também realizado por nosso grupo, foi observado que a inibição da atividade de FASN pode ter um papel sobre a angiogênese induzida por melanomas experimentais, pois a densidade de vasos sanguíneos ao redor destes tumores foi significantemente reduzida pelo tratamento com orlistat. Considerando as evidências sugerindo um papel biológico relevante de FASN na disseminação metastática de melanomas, o presente trabalho de pesquisa teve como objetivo principal investigar as consequências da inibição da atividade de FASN em cultura de células endoteliais de vasos sanguíneos, através da análise do ciclo celular e das taxas de apoptose. A expressão dos diversos fatores da família VEGF foi avaliada por RT-PCR quantitativo em células de melanoma e carcinoma espinocelular bucal. Os resultados obtidos mostram que orlistat e cerulenina inibem a viabilidade, induzem a apoptose e reduzem in vitro a formação de vasos sanguíneos pelas células endoteliais RAEC. No entanto, o mesmo tratamento não reduz a viabilidade e nem reduzem a formação de vasos sanguíneos in vitro pelas células endoteliais HUVEC. A inibição de FASN nas células neoplásicas SK-MEL-25 e SCC-9 aumenta a expressão de RNAs mensageiros para VEGFA e que o meio condicionado por estas células com orlistat reduz a formação in vitro de vasos sanguíneos e a proliferação das células HUVEC. Nossos resultados sugerem que FASN parece ser importante para a sobrevivência das células RAEC e que a inibição de FASN modula a expressão das isoformas de VEGFA

Abstract: Fatty acid synthase (FASN) is the anabolic enzyme with high expression and activity in several human malignancies, which is responsible for the endogenous synthesis of saturated fatty acids and consequently of the phospholipids present in cell membranes. Inhibition of FASN with orlistat...

Abstract: Fatty acid synthase (FASN) is the anabolic enzyme with high expression and activity in several human malignancies, which is responsible for the endogenous synthesis of saturated fatty acids and consequently of the phospholipids present in cell membranes. Inhibition of FASN with orlistat (Xenical), an anti-obesity drug, is described as having anti-neoplastic properties in breast and prostate cancers as well as in melanoma. An anti-angiogenic role, has been attributed to this drug, since it inhibits the proliferation of endothelial cells and the neovascularization in ex vivo both assays. In recent studies performed by our group, it was demonstrated that the treatment of mice bearing intraperitoneal melanoma with orlistat reduced by 50% the number of metastases to mediastinal lymph nodes. In another study, also conducted by our group, we observed that the inhibition of FASN reduces the angiogenesis induced by experimental melanomas, since the density of blood vessels around tumors was significantly decreased by the treatment with orlistat. In the present work investigated the consequences of the treatment with FASN inhibitors the proliferation and apoptosis cultured endothelial cells. The expression of the VEGF family of growth factors were assessed by quantitative RT-PCR in both melanoma and squamous cell carcinoma cells. The results show that orlistat and cerulenin inhibit the viability and induce apoptosis and reduce the formation of blood vessels by RAEC cells in vitro. However, the same treatment does not reduce the viability and not reduce the formation of blood vessels by HUVEC cells in vitro. The inhibition of FASN in neoplastic cells SK-MEL-25 and SCC-9 increases the expression of mRNAs for VEGF and the conditioned medium by these cells with orlistat reduces the formation of blood vessels in vitro and proliferation of HUVEC cells. Together, the experiments show that FASN seems to be important for the survival of RAEC cells and FASN inhibition modulates the expression of VEGF isoforms