Orientador: Selma Giorgio

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: A autofagia é o principal mecanismo celular de degradação de proteínas e organelas citoplasmáticas. Este processo biológico vem sendo considerado importante no combate aos microrganismos durante processos infecciosos, eliminando-os e ativando respostas imunes inatas e adaptativas. A...

Resumo: A autofagia é o principal mecanismo celular de degradação de proteínas e organelas citoplasmáticas. Este processo biológico vem sendo considerado importante no combate aos microrganismos durante processos infecciosos, eliminando-os e ativando respostas imunes inatas e adaptativas. A leishmaniose é um grupo de doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania, que parasitam macrófagos e células dendríticas e é responsável pelo aparecimento de lesões cutâneas simples, lesões mucosas e leishmaniose visceral. O conhecimento dos fatores do hospedeiro e das espécies de Leishmania que influenciam a patogênese dos vários tipos de leishmaniose é limitado e pouco se sabe sobre o papel da autofagia nesta doença. O objetivo geral deste trabalho foi avaliar o processo autofágico durante a infecção de macrófagos com L. amazonensis. O monitoramento da autofagia por western blotting (detecção de LC3, proteína marcadora de autofagia), por microscopia eletrônica de transmissão, e pela detecção de atividade lisossomal (LysoTracker® Red) indicou que a infecção causada por L. amazonensis induz autofagia tanto em macrófagos de linhagem tumoral quanto em macrófagos primários de camundongos de diferentes linhagens. Nossos dados também indicam que o aumento do índice de infecção está relacionado ao aumento da autofagia nesses macrófagos e que a indução de autofagia por starvation (inanição) aumenta a porcentagem de infecção com L. amazonensis em macrófagos derivados de medula óssea de camundongos BALB/c. Por outro lado, a indução de autofagia não altera o índice de infecção de macrófagos derivados de medula óssea de camundongos C57BL/6, indicando que a linhagem de camundongos de origem dos macrófagos interfere no desfecho da infecção. Juntos, nossos resultados indicam que a autofagia apresenta um papel importante na infecção causada por L. amazonensis e abre novas perspectivas para o estudo desse processo biológico durante a infecção causada por outras espécies de Leishmania

Abstract: Autophagy is the primary mechanism of degradation of cellular proteins and organelles. This biological process has been considered important in fighting microorganisms during the infectious processes, eliminating them and activating innate and adaptive immune responses. Leishmaniasis is a...

Abstract: Autophagy is the primary mechanism of degradation of cellular proteins and organelles. This biological process has been considered important in fighting microorganisms during the infectious processes, eliminating them and activating innate and adaptive immune responses. Leishmaniasis is a group of diseases caused by protozoa of the genus Leishmania, which parasitize macrophages and dendritic cells, and it is responsible for the appearance of simple skin lesions, mucosal and visceral leishmaniasis, The knowledge of host factors and the Leishmania species that influence the pathogenesis of many types of leishmaniasis is limited and little is known about the role of autophagy in this disease. The general aim of this study was to evaluate the autophagic process during infection of macrophages with L. amazonensis. The monitoring of autophagy by western blotting (to detect LC3, a protein marker of autophagy), by Transmission Electron Microscopy, and by lysosomal activity detection (by using Lysotracker® Red) indicated that the infection caused by L. amazonensis induces autophagy in both tumor macrophage lineage and in primary macrophages from mice of different strains. Our data also indicate that the increase in the rate of infection is related to the increase of autophagy in these macrophages and that induction of autophagy by starvation increases the percentage of bone marrow-derived macrophages from BALB / c mice with L. amazonensis after three days of culture. On the other hand, the induction of autophagy does not change the infection rate of bone marrow -derived macrophages from C57BL / 6 mice, indicating that the mice strain interfere in the outcome of infection of macrophages. Together, our results indicate that autophagy has an important role in infection caused by L. amazonensis and creates new perspectives to the study of this biological processes during infection caused by other species of Leishmania