Orientador: Marta H. Krieger-Azzolini

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Este trabalho teve o propósito de padronizar um modelo para estudo de intervenção hormonal, usando o teleósteo Piaractus mesopotamicus. O efeito da insulina in vivo sobre o metabolismo de carboidratos e lipídios, foi investigado em Piaractus mesopotamicus juvenis, com cânula crônica...

Resumo: Este trabalho teve o propósito de padronizar um modelo para estudo de intervenção hormonal, usando o teleósteo Piaractus mesopotamicus. O efeito da insulina in vivo sobre o metabolismo de carboidratos e lipídios, foi investigado em Piaractus mesopotamicus juvenis, com cânula crônica implantada na aorta dorsal e mantidos em caixa de experimentação especial. O estudo foi conduzido emtrês etapas: 1-
verificou-se a viabilidade do implante da cânula crônica aortica nessa espécie, da sua manutenção em caixa de experimentação especial, do período de tempo necessário para a recuperação do estresse cirurgico e para o inicio da intervenção hormonal, através da monitoração dos níveis de glicose, ácidos graxos livres e cortisol plasmáticos; 2- determinou-se a menor dose capaz de promover hipoglicemia, os tempos de efeito máximo e de recuperação frente a várias doses de insulina suma regular-BIOBRÁS (O.25U/Kg; 1.0U/Kg; 2.5U/Kg e 5.0U/Kg) ; 3- verificou-se o efeito da menor dose hipoglicemiante sobre as reservas de gIicogênio hepático. muscular esquelético branco e vermelho, muscular cardíaco. cerebral e a concentração de ácidos graxos livres plasmáticos. Os resultados demonstraram que a espécie estudada tolerou os procedimentos
de implante de cânula e adaptou-se às condições experimentais. Houve aumento dos níveis de glicose, cortisol e ácidos graxos livres plasmáticos em resposta aos procedimentos de captura, manuseio, anestesia e cirurgia, sendo necessárias quarenta e oito horas para a estabilização dos indicadores mensurados e para o início da intervenção hormonal. A menor dose hipoglicemiante foi 1.0U/Kg de peso corporal, com efeito máximona terceira hora e retomo aos níveis iniciais na vigésima quarta hora após a administração hormonal, considerando a hipoglicemia invariavelmente presente nos animais controle no curso das seis horas iniciais. Devido a este fato. investigou-se a influência da coleta seriada e/ou adminstração de solução salina como agentes promotores da resposta hipoglicêmica dos animais controle. Os resultados indicaram que a hipoglicemia não foi promovida pelos procedimentos testados. enquanto o cortisol e os ácidos graxos livres plasmáticos sofreram alterações, verificando-se uma relação inversa entre ambos seis e doze horas após a primeira amostragem. A menor dose efetiva (l.OU/Kg peso corporal) produziu declinio imediato e pronunciado dos ácidos graxos livres plasmáticos, em contraste com a hipoglicemia mais lenta e duradoura. As reservas teciduais de glicogênio não foram alteradas, possivelmente por influência da queda da temperatura. Os resultados do presente trabalho indicam que o modelo padronizado permitiu a amostragem de sangue seriada, a administração hormonal (após adequado período de recuperação pós-cirúrgico) e minimizou os efeitos do estresse causado pelo manuseio. Em Piaractus mesopotamicus juvenis, a insulina exerceu um efeito anti-lipolftico e lipogênico. que parece ser mais rápido do que a ação hipoglicemiante, indicando função importante na regulação do
metabolismo lipidico

Abstract: The main aim of this work was to standardize a model for studing the hormone intervention, using the teleost Piaractus mesopotamicus. It was investigated the effect of insulin in vivo on the carbohydrate and lipid metabolism of young Piaractus mesopotamicus, using a cronic cannulain serted...

Abstract: The main aim of this work was to standardize a model for studing the hormone intervention, using the teleost Piaractus mesopotamicus. It was investigated the effect of insulin in vivo on the carbohydrate and lipid metabolism of young Piaractus mesopotamicus, using a cronic cannulain serted into the dorsal aorta and kept in special experimentation boxes. The research was carried out in three stages: 1- It was verified the viability of implanting the aortic cronic cannula into Piaractus mesopotamicus and keeping it in a special experimentation box ;the period of time necessary for overcoming surgical stress, and the beginning of the hormone intervention by the monitoration of glucose. free fat and plasma cortisol levels; 2-It was also determined the lowest dose which is able to cause hypoglycemia, the maximum effect and recovering time towards several regular suine insulin doses-BIOBRAS (O.25U/Kg;1.0U/Kg; 2.5UIKge 5.0U/Kg); 3- It has been verified the effect of the lowest hypoglicemic dose upon the liver, white and red squeletic muscles, brain, myocardium glycogen contents and the concentration of plasmatic free fat. The results have shown that the studied species had tolerated the cannula implantation procedures and got used to the experimental conditions. There was an increase of glucose, cortisol and plasmatic free fat levels in response to the capture, handling, anesthesia and surgery procedures, being necessary 48 hours for the stabilization of the measured indicators and for beginning the hormones intervention.The lowest hypoglicemic dose was 1.0U/Kg of body weight, with maximmum effect in the third hour and the return to the beginning levels in the 24th hour after the hormone ministration, considering hypoglycemia invariably present in the control animals during the first 6 hours. Doe to this fact, it was investigated the influence of the repetead blood sampling and/or administration of saline solution as promoting agents ofthe response of the control animals. The results indicated that hypoglycemia was not promoted by the tested procedure, whereas cortisol and plasmatic free fat underwent alterations, showing an inverse relationship between cortisol and plasmatc free fat six and twelve hours after the first sampling. The lowest effective dose (l.OU/Kg body weigbt) caused immediate and pronounced decrease of the plasmatic free fat, contrasted to the slower and more lasting hypoglycemia. The glycogen tissue reservations did not altero possibly because of the influence of the temperature decrease. The results of the work have shown that the standardized model allowed the serial blood sampling and hormone administration (after adequate postsurgery recovery period), minimizing the effects of stress caused by handling. In young Piaractus mesopotamicus , insulin caused an antilipolitic and/or antilipogenic effect which seemed to be faster than the hypoglicemic action, indicating an important whole on the regulation of lipid metabolism