Orientador : Maria Lucia Furlan Wada

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Alinhagem celular Vero estabelecida a partir de célulãs renais de macaco verde da Africa (CercoDithecus aethioDs), apresenta crescimento caracterlstico em cultura sendo considerada normal. Essas células possuem morfologia alongada crescendo em monocamadas quando em cultivo. Mantidas em...

Resumo: Alinhagem celular Vero estabelecida a partir de célulãs renais de macaco verde da Africa (CercoDithecus aethioDs), apresenta crescimento caracterlstico em cultura sendo considerada normal. Essas células possuem morfologia alongada crescendo em monocamadas quando em cultivo. Mantidas em cultura as células Vero passaram a apresentar alterações morfológicas, comportamenta e de crescimento em relação ao padrão normal inicial. A população Vero alterada apresentou células com morfologia mais arredondada que crescem em múltiplas camadas formando grumos celulares. Os grumos celulares apresentaram em sua superflcie células achatadas ecélulas globosas e material extracelular no seu interior. As células da população alterada aderiram mais rapidamente ao substrato em meio contendo soro fetal bovino, além disso, podiam se dividir em suspensão em meio semi-sólido de ágar com menor concentração de nutrientes. As células da população alterada apresentaram número modal de cromossomos igual a 56 enquanto a população inicial apresentou 54 cromossomos, sendo que os cromossomos extras presentes na população alterada referem-se a um homólogo do par 8 e um do par 27. O indice de células polipl6ides na população alterada foi de 19% enquanto na população inicial este indice era de 5%. Quando submetidas a reações citoqulmicas com Xilidine Ponceau - pH 2,5 e a rea_ão de P.A.S. a camada celular da população normal apresentou padrão de coloração homogêneo enquanto que a população alterada apresentou regiões mais intensamente coradas. As células alteradas apresentaram citoplasma e núcleo fracamente corados e nucléolos proeminentes pela coloração com Xilidine Ponceau e citoplasma com aspecto granular intensamente corado indicando regiões de maior concentração de glicoprotelnas pela reação de P.A.S.. Em análise eletroforética em gel de polia crilamida com SDS observou-se a presença de uma protelna de 3_kDa bastante evidenciada na popula_ão alterada e ausente na PC'_F,'lação inicial. Assim, as análises efetuadas demonstraram qu(:"", t. populaçao alterada é realmente transformada, podendo ser usada como um modelo para estudo de células tumorais

Abstract: The Vero cell linage eatabliahed from kidney cella of the Africa green monkey (Cerco_ithecua aethio_a) normally haa a characteriatic growth pathern. The cella are elonged and grow in monolayera. Maintained in culture. the Vero cella began to alter their morphology, behavior and growth in...

Abstract: The Vero cell linage eatabliahed from kidney cella of the Africa green monkey (Cerco_ithecua aethio_a) normally haa a characteriatic growth pathern. The cella are elonged and grow in monolayera. Maintained in culture. the Vero cella began to alter their morphology, behavior and growth in relation to their inicial characteriatica. Theae altered Vero population made up rounded. cella which grew into layered cellular aggregation. The aggregations consist of rounded cells and extracellular matrix covered by a flattened cellular layer. Theae altered cells. Grow in medium with bovine fetal serum. adhered quick and divided in soft agar medium that contained lesa concentrated nutrienta than normal cella require. A modal number of chromoaomea equal to 56 waa determined for the altered cella while the inicial population had 54 chromoaomea. The additional chromoaomea were an homologue to the 8 pair and another to the 27 pairo The polyploidy index in altered cella was 19%. while it waa only 5% in the inicial population. Xylidine Ponce_u:at pH 2,5 and the P.A.S. reaction attained uniformly the normal cella while altered onec ahowed intencely atained regiona. The nuclei and cytoplaam waa slightly attained while the nucleoli waa deeply attained with ylidine Ponceau in altered cells. They had granular cytoplasm after P.A.S. reaction, indicating glycoprotein rich region. Electrophoretic analysis in polyacrilamide gel with SDS revealed a36 kDa protein that was proeminent in the altered populationa and lacking in the inicial group. Thus, the analysis demonstrated that the altered cells constitute a tranaformed population and it can be used as a model for tumor cell atudiea