Orientador: Avelino Rodrigues de Oliveira

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Isolados de PVY, LMV, BCMV e BYMV foram multiplicados por inoculação mecânica nas folhas de plantas de fumo, quenopódio e feijoeiro, respectivamente, induzindo infecção do tipo sistêmico. Estes isolados foram parcialmente purificados à partir dos caules e folhas, destas plantas infectadas,...

Resumo: Isolados de PVY, LMV, BCMV e BYMV foram multiplicados por inoculação mecânica nas folhas de plantas de fumo, quenopódio e feijoeiro, respectivamente, induzindo infecção do tipo sistêmico. Estes isolados foram parcialmente purificados à partir dos caules e folhas, destas plantas infectadas, homogeneizados em presença de solução tampão de fosfato 0,1 m de pH 7,0, contendo sulfito de sódio a 0,5%. 0 extrato filtrado foi clarificado por adição de éter etílico e tetracloreto de carbono, e os vírus foram concentrados por ultracentrifugação. As micrografias eletrônicas das preparações parcialmente purificadas de PVY, LMV , BCMV e BYMV mostraram um grande número de partículas alongadas e flexíveis, de variados tamanhos e frequentemente agregadas entre si. Estas preparações foram injetadas em coelhos, tanto por via intravenosa, como por via intramuscular, utilizando-se diferentes esquemas de imunização, para produção de anti-soros. Estes anti-soros foram titulados, através de testes de dupla-difusão em ágar, e testes de precipitina em tubos, em combinações homólogas e heterólogas com as preparações de PVY, LMV , BCMV e BYMV. Em comparação com os testes de dijpla-difusao em ágar, os testes de precipitina em tubos demonstraram ser muito mais sensíveis na detecção de anti-corpos em baixa concentração. As relações sorológicas entre o PVY, LMV, BCMV e BYMV foram detectadas pela comparação dos títulos homólogos e heterólogos dos anti-soros, ensaiados em testes de precipitina em tubos, e, pelos resultados obtidos, pode-se afirmar que : - o PVY tem relações sorológicas com o LMV e o BYMV. - o LMV tem relações sorológicas com o PVY e o BYMV, - o BCMV tem relações sorológicas próximas com o BYMV. - o BYMV tem relações sorológicas próximas com o BCMV. - o BYMV tem relações sorológicas com o LMV e o PVY. Os valores dos títulos dos anti-soros para PVY, LMV e BCMV, quando ensaiados, em combinações homólogas e heterólogas, contra preparações com PVY, LMV e BCMV não foram significativos de forma a se poder afirmar que o PVY, bem como o LMV, tenham relações sorológicas com o BCMV. Os resultados obtidos vem suplementar o esquema de classificaçao dos virus de planta, cujas particulas tem forma alongada, proposto por BRANDES & BERCKS (1965), que estabelece como critérios de similaridade, a morfologia da partícula de vírus e suas relações sorológicas

Abstract: PVY, LMV, BCMV and BYMV isolates were transmitted by manual inoculation of sap, infecting systemically Nicotiana tabacum L. var. Turkish , Chenopodiun quinoa L. and Phaseolus vulgaris L. plants respectively. These isolates were partially purified from homogenates of infected stems and...

Abstract: PVY, LMV, BCMV and BYMV isolates were transmitted by manual inoculation of sap, infecting systemically Nicotiana tabacum L. var. Turkish , Chenopodiun quinoa L. and Phaseolus vulgaris L. plants respectively. These isolates were partially purified from homogenates of infected stems and leaves in 0,1 M phosphate buffer (pH 7,0) containing 0,5% sodium sulfite. The filtered homogenate was clarified by adding ether and carbon tetrachloride and the viruses were concentrated and partially purified by ultracentrifligation. Electron-micrographs showed virus preparations to contain filamentous particles, many of which were aggregated of fragmented. Antisera to PVY, LMV, BCMV and BYMV were prepared in rabbits injected with purified virus intravenously or intramuscularly, following several immunization schedules. These antisera were titred in agar double-diffusion and precipitin tests with the respective homologous and heterologous virus preparations. In comparative trials, precipitin tests were much more sensitive than double-diffusion tests for detecting low antibody concentrations. Serological relationships between PVY, LMV, BCMV and BYMV were established by comparison of homologous and heterologous antisera litres in precipitin tests, and from the results we can assume that : - PVY is related to LMV and BYMV, - LMV is related to PVY and BYMV, - BCMV is closely related to BYMV, - BYMV is closely related to BCMV, - BYMV is related to LMV and PVY, On the basis of the serological results, no valid statements on serological relationships between PVY-BCMV and LMV-BCMV are possible. The results supplement classification of elongated plant viruses on a morphological and serological basis and suggested by BRANDES & BERCKS (1965)