Orientador: Aldo Focesi Junior

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Algumas propriedades estruturais e funcionais da hemoglobina de Leptodactylus Labyrinthicus, anfíbio de habitat semi-aquatico, foram estudadas tanto no hemolisado total com em componentes. A separação do homolisado total foi obtida através de cromatografia em CM-celulose, identidicando-se...

Resumo: Algumas propriedades estruturais e funcionais da hemoglobina de Leptodactylus Labyrinthicus, anfíbio de habitat semi-aquatico, foram estudadas tanto no hemolisado total com em componentes. A separação do homolisado total foi obtida através de cromatografia em CM-celulose, identidicando-se três componentes designados de 'Hb IND 0¿, 'Hb IND 1¿ e 'HB IND 2¿, correspondendo às proporções de 10, 60 e 30% respectivamente, resultados esses concordantes com aqueles posteriormente obtidos em gel de amido. As propriedades de oxigenação foram avaliadas por método espectofotométrico, e a afinifadade da hemoglibina pelo oxigênio, expressa em termos da pressão parcial de oxigênio para meio saturação ('P IND. 50¿). Foi observado que o hemolisado total não apresentou enfeito Bohr, enquanto dos dois componentes estudados somente, aquele correspondente a 30% ('Hb IND. 2¿) apresentou efeito Bohr normal ou alcalino. O efeito causado pelos fosfatos, orgânicos e inorgânicos, foi observado tanto para o hemolisado total como para os componentes 'Hb IND. 1¿ e 'Hb IND. 2¿. Verificou-se que estes efetores provocaram um aumento no efeito Bohr e uma diminuição na afinidade pelo oxigênio, não afetando, entretanto, a interação heme-heme significantemente. Um estudo estrutural foi iniciado, com a obtenção das globinas dos componentes 'Hb IND. 1¿ e 'Hb IND. 2¿e posterior separação e comparação das cadeias 'alfa¿ e 'beta¿ desses componentes através de eletroforese em gel de poliacrilamida. Os resultados indicaram que possivelmente as cadeias 'beta¿são similares

Abstract: Some structural and functional properties of hemoglobin components of Leptodactylus labyrinthicus, a brazilian amphybian which lives in a semi-aquatic habitat, were in the present paper. The total hemolysate was resolved into three components, in CM-celulose chromatography. These...

Abstract: Some structural and functional properties of hemoglobin components of Leptodactylus labyrinthicus, a brazilian amphybian which lives in a semi-aquatic habitat, were in the present paper. The total hemolysate was resolved into three components, in CM-celulose chromatography. These components were indentified as 'Hb IND 0¿, 'Hb IND 1¿ e 'HB IND 2¿, accordingly to the results in starch gel elcctrophoresis. The tree components are present in the proportion of 10, 60 and 30% respectively. The oxygen binding properties were studied using spectrometric methods, and the oxygen of the hemoglobin was expressed as the oxygen partial pressure to obtain 50% of saturation ('P IND. 50¿. The total hmolysate didn¿t present Bohr effect, although 'Hb IND. 2¿ (30% of the total hemolysate) showed a normal Bohr effect. Both major fractions 'Hb IND. 1¿ and 'Hb IND. 2¿ as well as the total hemolysate showed phosphate effect, either by organic or inorganic phosphates. This effect was an increase in Bohr effect with a decrese in oxygen addinity, without notable changes in heme-heme interactions. A structural study was iniciated with the globins of the two major components 'Hb IND. 1¿ e 'Hb IND. 2¿. The 'alfa¿ and 'beta¿ chains of these globins were separated in polyacrylamide gel electrophoresis and compared. The results indicated the possibility od the 'beta¿ chains were similar for both globins