Orientador: Renato Bonatelli Junior

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Este trabalho teve por objetivo o isolamento e análise genética de mutantes com produção alterada de amiloglicosidase (AG) na linhagem HAP de Aspergillus niger. Foram estudados mutantes auxotróficos e morfológicos quanto à produção da enzima, observando-se que a maioria não apresentava...

Resumo: Este trabalho teve por objetivo o isolamento e análise genética de mutantes com produção alterada de amiloglicosidase (AG) na linhagem HAP de Aspergillus niger. Foram estudados mutantes auxotróficos e morfológicos quanto à produção da enzima, observando-se que a maioria não apresentava alteração na produção de AG com relação à linhagem original HAP, com exceção das linhagens pdxlolvl e purl que apresentaram produção significativamente menor. Teste para avaliação da atividade enzimática na presença de inibidor específico para AG e dextrina limite como substrato mostrou que as medidas realizadas durante o trabalho referem-se principalmente à AG. A utilização da luz ultravioleta como mutagênico para obtenção de mutantes com produção diminuída de AG foi satisfatória, tendo sido obtida uma freqüência total de mutantes de 3;0%. Pela metodolog1a de pré-seleção empregada não foi conseguido nenhum mutante de produção aumentada. Testes de interação alélica mostraram que todas as mutações induzidas eram recessivas. No teste de complementação pelo menos dois genes que afetam a produção de AG parecem ter sido revelados, o lap61 e lap73 e/ou lap38. Análise mitótica dos segregantes mostrou ligação entre os genes nic_ fwn e olv e também evidenciou ligação entre o gene pab e o lap61

Abstract: The claims of this work were iso1ation and genetical analysis of altered amylog1ucosldase production mutants using the HAP strain or Aspergillus niger. Enzyme production was studied in auxotrophs and morphologica1 mutants and most or them do not show AG production alterations, except...

Abstract: The claims of this work were iso1ation and genetical analysis of altered amylog1ucosldase production mutants using the HAP strain or Aspergillus niger. Enzyme production was studied in auxotrophs and morphologica1 mutants and most or them do not show AG production alterations, except pdxlolvl and purl strains showed significant decreased production comparing with the original strain HAP. Teste to evaluate enzimatic activity in presence of AG especific Inibitor and using limit dextrin as substrate showed that the activlty measured during this work was mainly the AG activity. The use of ultraviolet light as mutagenic to obtain decreased AG production mutants was satisfactory, and the total frequency or mutants was 3,0%. Pre-selection methodology was not efficient to obtain increasead AG production mutants. Alelic interaction tests showed that a11 the induced mutations were recessives. Complementation test showed at least two genes envolved in AG production, lap61 and lap73 and/or lap38. Mitotic analysis demonstrated linkage between the genes nic, f'wn and olv_ and between pab and lap61