Orientador : Delia Rodriguez-Amaya

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Engenharia de Alimentos

Resumo: Devido ao alto custo de cromatografia líquida de alta eficiência, propõe-se o uso de fase reversa C-18, como adsorvente, em coluna aberta, como alternativa para países do terceiro mundo. Foram comparados, então, métodos utilizando coluna de fase reversa desenvolvida com acetonitrila:...

Resumo: Devido ao alto custo de cromatografia líquida de alta eficiência, propõe-se o uso de fase reversa C-18, como adsorvente, em coluna aberta, como alternativa para países do terceiro mundo. Foram comparados, então, métodos utilizando coluna de fase reversa desenvolvida com acetonitrila: metanol: clorofórmio (Simpson et al., 1987) e também por acetona: água (fase reversa modificado), e coluna de MgO: hiflosupercel (fase normal) desenvolvida por concentrações crescentes de acetona em éter de petróleo (Rodriguez et al., 1976). As porcentagens de recuperação do ß-caroteno nas colunas foram 98, 96 e 98% e do procedimento analítico completo (ß-caroteno adicionado à couve) 92, 89 e 92 %, respectivamente, para os métodos de Rodriguez et al., de Simpson et al. e de fase reversa modificado. Não houve diferença significativa entre o método de fase reversa modificado e o de Rodriguez et al. quanto à quantidade de pró-vitamina A (exclusivamente (ß-caroteno) em verduras folhosas. Já o de Simpson et al. apresentou um teor significativamente menor de ß-caroteno. A coluna de fase normal foi a única capaz de separar todos os carotenóides. Para alimentos que contém outras pró-vitaminas A, além do ß-caroteno, a análise torna-se ainda mais complexa. Para abóbora, os dois tipos de adsorventes podem ser usados para separar a- e ß-caroteno; enquanto que para tomate e mamão vermelho, o uso de fase reversa não é recomendado devido à presença de licopeno que se mistura com (ß-caroteno, embora ocorra a separação de ß-criptoxantina. Mais uma vez, somente a coluna de MgO:hiflosupercel permite a determinação da composição completa de carotenóides. Os efeitos de diversos fatores na composição de carotenóides foram avaliados utilizando o método de Rodriguez et al. em amostras de couve. Os seguintes resultados foram obtidos: i-A cultivar tronchuda apresentou maior concentração de ß-caroteno e valor de vitamina A, e menor de zeaxantina que a manteiga no inverno e verão; 2-Os teores de luteína , violaxantina e total de carotenóides foram significativamente maiores na cultivar tronchuda apenas no verão; 3-ß-Caroteno, valor de vitamina A e zeaxantina apresentaram-se significativamente maiores no inverno nas duas cultivares; 4-Os teores de luteína e total de carotenóides foram também maiores no inverno na couve manteiga; 5-O conteúdo de violaxantina apresentou-se maior no verão na couve tronchuda; 6-Os teores de ß-caroteno, luteína, zeaxantina violaxantina, total de carotenóides e valor de vitamina A de couve manteiga proveniente da horta natural foram significantemente maiores que os da horta convencional, que utilizou herbicida e inseticida. Foi também determinada a composição completa de carotenóides em cinco verduras folhosas nativas brasileiras. A luteína esteve presente em maior quantidade, perfazendo 59, 58, 61, 60 e 54% do total em caruru, mentruz, taioba, serralha e beldroega, respectivamente. Os teores de (ß-caroteno e valores de vitamina A foram 109,85 e 1838,1; 84,65 e 1410,8; 67,32 e 1123,0; 62,86 e 1050,0; 29,79 µg/g e 499,3 RE/100g, respectivamente. As xantofilas a-criptoxantina, violaxantina e zeaxantina também foram quantificadas

Abstract: Considering the high cost of HPLC, the use of preparative C-18 packing material as stationary phase in classical open columns has been proposed as an alternative for the third world. In the present study, three methods were compared, two utilizing C-18 reverse phase columns developed with...

Abstract: Considering the high cost of HPLC, the use of preparative C-18 packing material as stationary phase in classical open columns has been proposed as an alternative for the third world. In the present study, three methods were compared, two utilizing C-18 reverse phase columns developed with CH3CN: MeOH: CHC13 (Simpson et al., 1987) or with decreasing concentrations of water in acetone (modified reverse phase method) and one utilizing the normal phase MgO: hylfoSupercel column, developed with increasing concentration of acetone in petroleum ether (Rodriguez et al., 1976). Percent recoveries of (ß-carotene from the columns were 98, 96 and 98% and of the entire analysis (ß-carotene added to kale) 92, 89 and 92%, respectively, for the Rodriguez et al., Simpson et al. and the modified RP methods. No significant difference was observed in the provitamin A contents (exclusively ß-carotene) of 2 leafy vegetables obtained by the modified reverse phase and normal phase methods. Significantly lower values were obtained by the method of Simpson et al.. Only the normal phase column was capable of separating all constituent carotenoids. The situation became more complicated when samples containing other provitamins were analyzed. For squash the two types of stationary phase could separate a- and ß-carotene. For tomato and red-fleshed papaya, part of lycopene remaind mixed with (ß-carotene, although ß-cryptoxanthin was separated. Once again, only the MgO: HyfloSupercel permitted separation of the different carotenoids. The effects of certain factors on the carotenoid composition were evaluated utilizing the method of Rodriguez et al. and kale as sample. The following results were obtained: 1-The cultivar "tronchuda" presented higher concentration of ß-carotene and vitamin A value and lower zeaxanthin than the cultivar "manteiga" during both the winter and summer seasons; 2-The lutein, violaxanthin and total carotenoid levels were significantly higher in the cultivar "tronchuda" but only in the summer; 3-ß-Carotene, vitamin A value and zeaxanthin were significantly higher during winter in both cultivars; 4-The lutein and total carotenoid levels were also significantly higher in the winter in the kale "manteiga"; 5-Violaxanthin was significantly higher in the cultivar "tronchuda" in the summer; 6-Significant1y higher levels of ß-carotene, lutein, zeaxanthin, violaxanthin, total carotenoid and vitamin A value were observed in the kale "manteiga" cultivated on a "natural" farm as compared to a convencional farm which utilized herbicide and insecticide. The complete carotenoid composition of five native Brazilian leafy vegetables were determined. Lutein was the principal pigment, accounting for 59, 58, 61, 60, and 54% of the total in "caruru", "mentruz", "taioba", "serralha" and "beldroega", respectively. The (ß-carotene contents and vitamin A values were 109,85 and 1838,1; 84,65 and 1410,8; 67,32 and 1123,0; 62,86 and 1050,0; 29,79 µg/g and 499,3 RE/100g, respectively. The xanthophylls a-cryptoxanthin, violaxanthin and zeaxanthin were also quantified