Orientador : Avelino Rodrigues de Oliveira

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Cinco técnicas de purificação do vírus do mosaico dourado do tomateiro (VMDT) foram testadas, visando obter antígenos para o preparo de antissoros específicos. As técnicas empregadas foram xilol, tetracloreto de carbono, eliminação dos cloroplastos e polietilenoglicol. A avaliação da...

Resumo: Cinco técnicas de purificação do vírus do mosaico dourado do tomateiro (VMDT) foram testadas, visando obter antígenos para o preparo de antissoros específicos. As técnicas empregadas foram xilol, tetracloreto de carbono, eliminação dos cloroplastos e polietilenoglicol. A avaliação da eficiência dessas técnicas, através de testes de infectividade das frações finais, observações ao microscópio eletrônico e testes serológicos comos antissoros preparados, mostrou que polietilenoglicol é técnica adequada para os fins propostos. Frações do VMDT purificado segundo a técnica do polietilenglicol mostraram-se ativas biologicamente nos testes de inoculação mecânica em plantas de Nicotiana glutinosa L. e N. tabacum L. e exibiram alta concentração de partículas com diâmetro em torno de 14 nm. Antissoros preparados com essa fração apresentaram, em testes de dupla difusão em agar, linha de precipitação que permite diagnosticar a presença do VMDT em hospedeiras de N. glutinosa e N. tabacum

Abstract: In order to prepare specific antisera to the tomato golden mosaic virus (TGMV), a whytefly-transmitted agent, five purification methods were tried. The techiques used in this work were: xylol, carbon tetrachloride, butanol, chloroplasts elimination, and polyethylene glycol. Bio-assays and...

Abstract: In order to prepare specific antisera to the tomato golden mosaic virus (TGMV), a whytefly-transmitted agent, five purification methods were tried. The techiques used in this work were: xylol, carbon tetrachloride, butanol, chloroplasts elimination, and polyethylene glycol. Bio-assays and serological tests have shown that the polyethylene glycol technique was the best for purification. It was carried out, as follows: infected leaves of Nicotiana glutinosa L. And N. Tabacum L. Were homogenized in 0.02M potassium phosphate buffer at pH 7.0 plus 0.02M Na2SO3; the clarification was carried out with 7% chloroform combined with n-butanol and TGMV precipitated with 10% PEG (Carbowax-6.000)-0.25M NaC1, followed by low-speed centrifugation. TCMV is an immunogenic virus type and double diffusion tests performed with purified preparations against their antisera showed a precipitin line (line b), seen in Fig. 5,6