Orientadora : Maria Luiza Silveira Mello

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Com o objetivo de se efetuar um estudo citoquímico e citofisio1ógico dos dois tipos de heterocromatina descritos por Pavan, em 1946, para Drosophi1a nebulosa (regiões heterocromáticas centroméricasprincipa1mente dos cromosso-mos II e X), os cromossomos mitóticos de gânglios cerebrais e os...

Resumo: Com o objetivo de se efetuar um estudo citoquímico e citofisio1ógico dos dois tipos de heterocromatina descritos por Pavan, em 1946, para Drosophi1a nebulosa (regiões heterocromáticas centroméricasprincipa1mente dos cromosso-mos II e X), os cromossomos mitóticos de gânglios cerebrais e os politênicos de glândulas salivares de larvas de 3º estádio desse díptero, foram submetidos a métodos para a obtenção de bandas C e G e à ação do composto Hoechst 33258 em cultura. Em cromossomos po1itênicos, foram comparados, ainda, os padrões de basofilia e perfis espectrais de Feulgen do cromocentro (hete-rocromatlna centromérica do cromossomo II, especialmente) com relação aos da eucromatina. Os resultados relativos a bandas C, G e após tratamento com o composto Hoechst em cultura não salientaram diferenças de resposta entre a heterocromatina centro-mérica dos cromossomos mitóticos X e II. Da mesma forma se comportou o cromossomo III. As regiões heterocromáticas centroméricas dos autossomos e cromossomo X responderam positivamente a esses métodos, sempre diferindo do comportamento das regiões eucromáticas. Os dados sugerem que o teor de bases AT do DNA não deva ser drasticamente superior ao de CG, nem que ocorram diferentes proteínas, cuja ação pudesse afetar os padrões de bandeado ou alongamento pela atuação do composto Hoechst, na heterocromatina desses cromossomos. O cromossomo Y mitótico salientou diferença em composição dos demais cromossomos, com uma riqueza em AT em ambos os braços, em áreas ligeiramente afastadas do centrô-mero e telômeros, e proteínas supostamente diferentes, quando se comparam os dois braços entre si. As respostas relativamente homogêneas aos mé-todos de bandas C e G e ao tratamento com o composto Hoe-chst em cultura das áreas heterocromáticas de D. nebulosacomparadas às de outras Drosophila parecem estar de acordo com a posição das mesmas na árvore filogenética respectiva, se se considerar padrões mais complexos, encontrados Drosophila filogenêticamente superiores, como caráter nas mais evoluído. Os dados dedesnaturação-renaturaçãoindicaram semelhanças entre a heterocromatina do cromocentro com rel_ ção à eucromatina, em cromossomos politênicos, possivelmen-te devido a alterações qualitativas e quantitativas em ti-pos de DNA e/ou proteínas cromossômicas, quando se passa da condição de cromossomos mitóticos (diplóides) para a de cro mossomos politênicos. Semelhanças entre essas regiões foram também determinadas em termos de caracterIsticas de basofilia e espectros de absorção de Feulgen. Sugere-se semelhança em nú-mero e proximidade de fosfatos livres do DNA e um teor em sequências de DNA repetitivo não sensivelmente diferente, quando se comparam tais regiões entre si

Abstract: The two types of heterochromatin described. For Drosophi1a nebulosa by pavan, in 1946 (heterochromatin of the centromeric regions of the X, Y and III chromosomes that of the 11 chrornosome) were estudied cytochemically and cytophysio1ogically. Mitotic chrorno50mes of neura1 gang1ia and...

Abstract: The two types of heterochromatin described. For Drosophi1a nebulosa by pavan, in 1946 (heterochromatin of the centromeric regions of the X, Y and III chromosomes that of the 11 chrornosome) were estudied cytochemically and cytophysio1ogically. Mitotic chrorno50mes of neura1 gang1ia and po1ytene chromosomes of sa1ivary glands of third instar larvae were subjected to C- and G- banding procedures and incubated in a medium containing the 33258 Hoechst compound. Patterns of basophilia and Feu1gen spectral absorption curves were al 50 determined for the polytene chrornosomes, the chromocenter region (mostly, heterochrornatin of the 11 chromosome) being compared w1th the euchrornatin. The resu1ts did not enhance differences bet-ween the centromeric heterochromatin of the mitotic chromo-somes X and 11. The centrorneric heterochromatin of the auto-somes and X chromosome respondedpositive1y to C- and G- bandind methods and moderately decondensed after being treated with Hoechst compound, always differing in relation to euchromatic regions. . It is suggested that the AT content should not be strong1y higher than the CG one in these heterochro-matic regions. Differences in proteins,which could possib1y .affect the banding patterns or the decondensation due to the 33258 Hoechst compound, a1so do not appear to exist. When the Y chromosome was compared with the other chromosomes in neura1 ganglia, differences in composi-tion were found. Both arms of the Y chromosome display AT- rich areas slightly shifted from the centromere and telome-res. Different proteins are supposed to be associated to chromatin, when the two chromosome arms are compared to each other. If the complex responses to c- and G- banding and to decondensation with the Hoechst compound, found in phylogenetically high Drosophila species could be considered an evolved character, the relatively homogeneous pattern de- picted by the heterochromatlc areas of the nebulosa would be in agreement with its position in the phylogenetic tree pro-posed for these flies. The denaturation-renaturation data indicate asimilarity between heterochromatin of the chromocenter and the euchromatin, of the polytene chromosomes, possibly due to qualitative and quantitative changes in DNA types and/or chromosome proteins which are supposed to occur when diploid chromosomes turn into polytene chromosomes. These chromosome-regions do not also differ in characteristics of basophilia and Feulgen absorption spectrum. The number and proximity of the DNA free phosphate groups and the quantity of repetitive DNA sequences are sug-gested not to De markedly different, when these regions are compared to each other