Orientador : Aldo Focesi Junior

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: O estudo de hemolisados de H.modestus e L.miliaris, duas serpentes aquáticas com diferentes graus de adaptação a esse ambiente mostraram por focalização isoelétrica em gradiente de sacarose (intervalo de pH do anfólito: 7,0 - 9,0), 3 e 5 componentes de hemoglobina. A pureza dos componentes...

Resumo: O estudo de hemolisados de H.modestus e L.miliaris, duas serpentes aquáticas com diferentes graus de adaptação a esse ambiente mostraram por focalização isoelétrica em gradiente de sacarose (intervalo de pH do anfólito: 7,0 - 9,0), 3 e 5 componentes de hemoglobina. A pureza dos componentes foi controlada por técnica de imunodifusão dupla em gel de agarose. As propriedades funcionais foram estudadas com solução de hemoglobina, em ausência e em presença de ligantes fisiológicos e não fisiológicos. Na ausência de moduladores, as hemoglobinas de H.modestus apresentaram maior afinidade pelo oxigênio do que de L.miliaris, tendo valores de ?P IND. 50?, 1,0mm de Hg e 1,41mm de Hg respectivamente, em pH 7,0. Em presença de fosfatos orgânicos tais como ATP, GTP, 2,3DPG e IHP, esses valores tornaram-se maiores: 8,95, 10,0, 4,16 e 25,48mm de Hg em H.modestus e 17,81, 16,98, 9,11 e 25,70mm de Hg em L.miliaris, indicando menor afinidade Hb-?O IND. 2?. O efeito Bohr passou de -0,07 na hemoglobina desionizada de H.modestus a -0,38 e a -0,55 na presença de GTP e ATP respectivamente e na L.miliaris, de -0,30 na hemoglobina desionizada a -0,60 na presença de GTP e a -0,90 na presença de ATP. Entre os ânions polifosfatos, apenas o ATP e o GTP parecem ser fisiologicamente importantes nas serpentes, visto que apenas esses nucleosídeos trifosfatos foram encontrados no sangue das serpentes, em nossas determinações por cromatografia em Dowex 1-?X IND. 8?... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Abstract: The study of the hemolysate of H.modestus and L.miliaris, two water snakes with different degrees of aquatic adaptations, by isoelectric foccusing using a pH gradient between 7,0 and 9,0 showed 3 and 5 haemoglobin components respectively. The homogenity of the components was checked by...

Abstract: The study of the hemolysate of H.modestus and L.miliaris, two water snakes with different degrees of aquatic adaptations, by isoelectric foccusing using a pH gradient between 7,0 and 9,0 showed 3 and 5 haemoglobin components respectively. The homogenity of the components was checked by double immunodifusion in agarose gel. The functional properties were studied with haemoglobin solutions either in the presence or not of physiological and non physiological ligands. Stripped haemoglobin of H.modestus presented higher oxygen affinity than that of L.miliaris, where ?P IND. 50? values found were 1,0mm Hg and 1,41mm Hg respectively, in pH 7,0. In the presence of organic phosphates such as ATP, GTP, 2,3DPG and IHP, these values increased, showing lower oxygen affinity: 8,95mm Hg, 10,0mm Hg, 4,16mm Hg and 25,48mm Hg respectively in H.modestus and 17,81mm Hg, 16,98mm Hg, 9,11mm Hg and 25,70mm Hg in L.miliaris. The Bohr effect increased from -0,07 to -0,38 and -0,55 in the presence of GTP and ATP in H.modestus and from -0,30 in stripped haemoglobin to -0,60 in the presence of GTP and to -0,90 in the presence of ATP in L.miliaris. Among polyphosphate anions studied, ATP and GTP seems to be physiologicaly important, since only these nucleotides were found by Dowex 1-?X IND. 8? chromatography determination... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations