Ação cardiovascular da peçonha de Bothrops jararacussu e Bothropstoxina em ratos anestesiados
Adriana Smaal
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP Sm11a
[Cardiovascular action of Bothrops jararacussu snake venom and Bothropstoxin in anesthetized rats ]
Campinas, SP : [s.n.], 2010.
173 p. : il.
Orientador: Stephen Hyslop
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Resumo: O envenenamento por serpentes do gênero Bothrops resulta em alterações sistêmicas que incluem coagulopatia, hemorragia sistêmica, choque hipovolêmico e insuficiência renal aguda. Neste estudo investigamos a ação de da peçonha de B. jararacussu e suas frações cromatográficas sobre alguns...
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Resumo: O envenenamento por serpentes do gênero Bothrops resulta em alterações sistêmicas que incluem coagulopatia, hemorragia sistêmica, choque hipovolêmico e insuficiência renal aguda. Neste estudo investigamos a ação de da peçonha de B. jararacussu e suas frações cromatográficas sobre alguns parâmetros cardiovasculares (pressão arterial, freqüências cardíaca e respiratória, e eletrocardiograma) em ratos anestesiados com uretana. Ratos Wistar (300-400 g) foram canulados na arteria carótida esquerda para monitoramento contínuo da pressão arterial sistêmica e na veia femoral para administração das peçonhas e frações cromatográficas. A freqüência cardíaca e o ECG foram monitorados por um eletrocardiógrafo. No final do experimento, coração, rins, fígado e pulmão foram processados para avaliação histológica. Os ratos foram monitorados durante 120 min. Para análise histológica, foram coletados amostras de coração, pulmão, rim e fígado. A peçonha (0.25, 0.5 and 0.75 mg/kg, i.v.) casou queda acentuada da pressão arterial nos até os 5 minutos após administração das peçonhas, tendo recuperação para valores de níveis basais nas doses menores, e a dose maior não houve recuperação. As doses menores não causaram alterações nas freqüências cardíacas e respiratórias, porem a dose maior causou queda irreversivel destes parâmetros. Alterações transitórias vistas no ECG foram extra sístole, taquicardia ventricular e alteração na amplitude do complexo QRS. Ratos injetados com a menor dose sobreviveram durante os 120 minutos monitorados no experimento, já os injetados com a maior dose morreram com aproximadamente 15 minutos após a administração da peçonha. A gel filtração resultou em 5 picos (PI-PV), sendo que a administração dos 2 primeiros picos mostraram alterações semelhantes a peçonha bruta. O fracionamento do pico I por troca iônica, não resultou em alterações cardiovasculares,pois provavelmente eles agem em sinergismo. Similarmente, a Bothropstoxina isolada do pico III não causou alterações. Analise histológica mostraram alterações em órgãos, principalmente em pulmões. Adicionalmente,foi visualizado mionecrose, edema e infiltrado inflamatório no coração, perda da arquitetura tecidual no fígado, e microaneurismas capilares, presença de proteína na luz tubular, e infiltrado inflamatório nos rins. Os picos I, II e III mostraram alterações similares a peçonha bruta. Estes resultados mostram que as peçonhas botrópicas produzem alterações cardiovasculares importantes, alem de alterações morfológicas em diversos órgãos. A predominância de hemorragia e presença de atividade hemorrágica nos picos I, II e III indicam a presença de diversas proteínas hemorrágicas nesta peçonha.
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Abstract: Envenoming by Bothrops snakes results in systemic alterations that include coagulopathy, internal hemorrhage, hypovolemic shock and acute renal failure. In this work, we investigated the action of Bothrops jararacussu snake venom and its chromatographic fractions on arterial blood...
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Abstract: Envenoming by Bothrops snakes results in systemic alterations that include coagulopathy, internal hemorrhage, hypovolemic shock and acute renal failure. In this work, we investigated the action of Bothrops jararacussu snake venom and its chromatographic fractions on arterial blood pressure, heart and respiratory rates, and electrocardiogram in urethane-anesthetized male Wistar rats. The rats were cannulated for blood pressure measurements (carotid artery) and the injection of venom or fraction (femoral vein). The heart rate and electrocardiogram (ECG) were measured with an ECG recorder. At the end of the experiments, samples of heart, liver, lung and kidney were processed for histological analysis. Venom (0.25, 0.5 and 0.75 mg/kg, i.v.) caused immediate hypotension that lasted for 5 min followed by a gradual recovery to pre-venom levels with the two lowest doses, whereas there was no recovery with the highest dose. The two lowest doses did not significantly affect the heart rate or respiratory rate, but these parameters were depressed with the highest dose. Transient changes in the ECG seen during the first 5 min included ventricular extrasystoles, ventricular tachycardia and alterations in the QRS complex amplitude. Rats injected with the two lowest doses survived for 120 min post-venom, whereas with the highest dose the survival time was 15 min at the most. Gel filtration (Sephacryl 75) of venom resulted in five peaks (PI - PIV), the first two of which produced cardiovascular alterations similar to those of the venom. Fractionation of PI resulted in two major peaks, neither of which produced significant cardiovascular alterations, perhaps because they normally act in synergy. Similarly, a PLA2 (bothropstoxin) isolated from peak PIII did not alter the parameters investigated. Histological analysis revealed hemorrhage in the organs examined, particularly the lungs. In addition, there were focal lesions in hepatic and renal tissue, as well as renal epithelial desquamation, glomerular microaneurysms, an increase in the capsular space and the presence of protein-like material in the lumen of proximal and distal tubules. Peaks PI, PII and PIII produced histological alterations similar to those of the venom. These results show that B. jararacussu venom causes important cardiovascular changes in anesthetized rats, in addition to morphological alterations in a variety of organs. The predominance of hemorrhage and the presence of hemorrhagic activity in peaks PI - PIII indicate the presence of a variety of hemorrhagic proteins in this venom.
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