Orientador: Quivo S. Tahin

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: A glutamina [L-glutamato: amônia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.], enzima regulatória do metabolismo do glutamato e da amônia, é amplamente encontrada em vegetais, animais e microorganismos. Todavia não pudemos identificar a presença da GS em coração de rato ou em fígado e coração de vários...

Resumo: A glutamina [L-glutamato: amônia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.], enzima regulatória do metabolismo do glutamato e da amônia, é amplamente encontrada em vegetais, animais e microorganismos. Todavia não pudemos identificar a presença da GS em coração de rato ou em fígado e coração de vários anfíbios. Estudo foram efetuados sobre alguns fatores que afetam a atividade da GS como trasnsferase na formação do gama-glutamilhidroxamato, a partir da reação catalisada pela GS entre a glutamina e hidroxilamina na presença de 'MN POT. 2+¿ e arsenato. Foi demonstrado para essa reação enzimática que o ADP não é requerido quando se ensaiou a atividade da GS de fígado, rim e baço de rato; fígado e coração de pomba e fígado de cobre, ao contrário do estabelecido por vários autores que utilizam o ADP para determinar essa atividade da GS de microorganismos. Nossos dados sugerem que, as GS dos órgãos animais estudados as melhores condições para a determinação da atividade enzimática são as seguintes: glutamina 75 mM, hidroxilamina 40 mM, arsenato 50 mM, 'MN POT. 2+¿ 50 mM, Tris-acetato 0,1 M pH 7,5. A hidroxilamina em concentração acima de 40 mM e 'MN POT. 2+¿ em concentração acima de 50 mM inibem a enzima, enquanto que concentrações de Asi acima de 40 mM (até 100 mM foram estudadas) mantém o mesmo efeito sobre a reação enzimática... Observação: O resumo, na íntegra, poderá ser visualizado no texto completo da tese digital

Abstract: The glutamine sinthetase [L-glutamate: ammonia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.] (GS), regulatory enzyme of glutamate and ammonia metabolism, is extensively found in plants, animals and microorganism. However we could not found GS in rat heart or in liver and heart of several amphibians. We...

Abstract: The glutamine sinthetase [L-glutamate: ammonia ligase (ADP) E.C.6.3.1.2.] (GS), regulatory enzyme of glutamate and ammonia metabolism, is extensively found in plants, animals and microorganism. However we could not found GS in rat heart or in liver and heart of several amphibians. We studied some factors that affect the formation of gama-glutamylhidroxamate from the transfer reaction between glutamine and hydroxamine catalysed by GS, in the presence of 'MN POT. 2+¿ and arsenate. Several authors use ADP in this enzyme reaction of microorganism GS, but we demonstrated that ADP is not required for the activity of GS from liver, kidney and spleen of rat; liver and heart of dove and liver of snake. Our data suggest the best reagent concentration for obtaing the highest GS activity, in our experimental conditions, are the following: glutamine 75 mM, hydroxamine 40 mM, sodium arsenate 50 mM, 'MN¿¿cl IND. 2¿ 50 mM, Tris-acetate 0,1 M, pH 7,5. Larger concentrations of hydroxamine than 40 mM and 'MN POT. 2+¿ than 50 mM cause an inhibition on enzyme activity, but larger concentrations of arsenate than 50 mM do not. We determined the values of apparent 'K IND. M¿ and 'V IND. MAX¿ for glutamine of GS from the studied animals organs in the presence of 'MN IND. +2¿ at concentrations of 5, 20, 50 or 80 mM... Note: The complete abstract is available with the full electronic digital thesis or dissertations