Orientador : Octavio Henrique de Oliveira Pavan

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Dois baculovírus diferentes, o vírus de Granulose de Diatraea saccharalis (VGDs) e o Vírus de Poliedrose Nuclear de Anticarsia gemmatalis (VPNAg), foram inoculados em lagartas de D.saccharalis. Os efeitos da infecção dos dois vírus foram estudadas inoculando-os de maneira isolada, simultânea...

Resumo: Dois baculovírus diferentes, o vírus de Granulose de Diatraea saccharalis (VGDs) e o Vírus de Poliedrose Nuclear de Anticarsia gemmatalis (VPNAg), foram inoculados em lagartas de D.saccharalis. Os efeitos da infecção dos dois vírus foram estudadas inoculando-os de maneira isolada, simultânea e alternada. A dose utilizada para ocasionar uma mortalidade semelhante foi 100 vezes maior para o VPNAg cujo hospedeiro original pertence a outra família de Lepidoptera. A alta produção de poliedros e grânulos dos dois vírus,
Obtida tanto quando ambos foram inoculados simultaneamente como quando um deles é pré-inoculado, demonstra a inexistência de qualquer tipo de interferência na multiplicação ou desenvolvimento dos vírus no mesmo hospedeiro. O estudo comparativo da infecção desses dois vírus nos tecidos gorduroso e intestinal, através da utilização de microscopia de contraste de fase, mostrou que ambos são capazes de se multiplicar e formar uma grande quantidade de cristais virais em células diferentes do tecido gorduroso, o que indica que a infecção por um vírus modifica a célula de maneira a deixa-la incapaz de permitir uma segunda infecção. No tecido intestinal, no entanto, somente foram encontrados poliedros. A presença do VPNAg em mais de um tecido, e a alta quantidade de cristais formados, muitas vezes maior que a do VGDs, demonstra a sua capacidade de propagar a infecção dentro do inseto uma vez iniciada. Assim sendo, a baixa virulência do VPNAg (verificada pelo alto valor de DL50), parece dever-se à existência de somente alguns variantes genéticos com capacidade para a invasão na população originalmente utilizada. O VGDs e o VPNAg apresentam diferentes períodos de incubação e o período mais curto conferiu uma vantagem, no desenvolvimento, ao VPNAg quando inoculado em indivíduos mais velhos. O tipo de interação obtido, analisando-se os valores de mortalidade larval quando os dois vírus foram inoculados simultaneamente, foi do tipo aditivo, não sendo encontrado efeito sinergístico ou antagônico o que sugere a ação independente de cada vírus. A multiplicação viral no organismo da lagarta parece ser suficientemente veloz de tal forma a evitar que uma segunda inoculação, aplicada 24 horas após a primeira aumente de maneira significativa a mortalidade larval. Assim sendo a quantidade de vírus formados mascararia o efeito da segunda dose viraI. O desenvolvimento dos dois vírus em células do mesmo tecido, que poderia gerar o surgimento de recombinantes genéticos, não foi investigado mais detalhadamente, porém, não se observou o aparecimento de cristais, morfológica ou numericamente diferentes dos utilizados originalmente que pudesse indicar tal acontecimento

Abstract: Two baculoviruses, the Diatraea saccharalis Granulosis Virus (DsGV) and the Anticarsia gemmatalis Nucleopolyhedrosis Virus (AgNPV), were studied infecting the sugarcane borer (SCB), D. saccharalis. The effects of the infecting of these two viruses were analysed by their inoculation...

Abstract: Two baculoviruses, the Diatraea saccharalis Granulosis Virus (DsGV) and the Anticarsia gemmatalis Nucleopolyhedrosis Virus (AgNPV), were studied infecting the sugarcane borer (SCB), D. saccharalis. The effects of the infecting of these two viruses were analysed by their inoculation simultaneously, sequencially and individually. Being a original virus of the SCB, the DsGV was inoculated in a dose 100 fold smaller than the AgNPV whose original host belongs to a different family of Lepidoptera. Regardless of the inoculation timing being simultaneous or sequencial in one order or the other, a high inclusion body production was observed for both viruses. This type of result discards the possibility of interference between the two pathogens. A comparative study of the infection process of both viruses in the fat body and intestinal tissue, in phase-contrast microscopy, showed their ability to replicate and produce normal inclusion bodies in high amounts in different fat body cells. In the intestinal cells only AgNPV was able to develop and produce polyhedra while no sign of the granules of DsGV were observed. In the fat body, even though neighboring cells were found to bear both types, thus, suggesting some type of inhibitory mechanism. Despite the fact that the AgNPV is developing in an alternate host, thus, having a high LD50 value, once it infects the larvae it is able to develop in a typical infection process. The AgNPV develops in several tissues, producing regular polyhedra in graet amounts, in most cases, more than the capsule production by DsGV. These observations suggest a barrier in host at invasion level being determined by a Iow frequency of genetic variants being able to start infection in the population. The DsGV and AgNPV in the SCB present different infection processes being the AgNPV faster in killing the insect, thus, showing more effectiveness in older larvae. The interaction observed between the two baculoviruses was of the aditive type while no synergism or interference type of effect was observed suggesting independent and non competitive behavior between the two pathogens. As suggested by previous data, the viral replication seems to be fast enough as to eliminate any significant mortality increase by a second inoculation performed after 24 hours following the first inoculum. The simultaneous development of the two different virus in the same individual and same body tissue could result in genetic recombinants. However, further studies should be conducted to confirm these preliminary observations