Analise da atividade antimicrobiana de frações purificadas e extratos de invertebrados e microorganismos marinhos sobre Streptococcus mutans e influencia sobre seus principais fatores de virulencia
Bruna de Araujo Lima
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP L628a
[Analysis of antimicrobial activity of purified fractions and extracts of marine invertebrates and microorganisms on Streptococcus mutans and influence on main virulence factors]
Piracicaba, SP : [s.n.], 2009.
74 f. : il.
Orientadores: Regianne Umeko Kamiya, Reginaldo Bruno Gonçalves
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Resumo: Streptococcus mutans é o principal agente etiológico da cárie dental. A
busca por novos agentes antimicrobianos naturais capazes de inibir os principais
mecanismos de virulência de S. mutans, como a síntese e tolerância a ácidos e a
formação de biofilme dental pode representar uma importante... Ver mais Resumo: Streptococcus mutans é o principal agente etiológico da cárie dental. A
busca por novos agentes antimicrobianos naturais capazes de inibir os principais
mecanismos de virulência de S. mutans, como a síntese e tolerância a ácidos e a
formação de biofilme dental pode representar uma importante estratégia de
prevenção e tratamento desta infecção. Estudos recentes confirmaram que
produtos naturais de origem marinha possuem significativa atividade
antimicrobiana contra microrganismos patogênicos. Assim, o objetivo deste estudo
foi analisar a atividade antimicrobiana de extratos ou frações purificadas obtidos a
partir de invertebrados e microrganismos marinhos associados sobre S. mutans e
outros estreptococos orais como S. sobrinus e S. sanguinis, pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Adicionalmente, avaliamos a influência de extratos e/ou frações ativas sobre a formação de biofilme e sobre a expressão dos genes associados aos principais fatores de virulência de S. mutans UA159 e um isolado clínico da espécie. Foram analisados genes associados com a capacidade de formação de biofilme (gtf B/C, gbpB), com a síntese de ácidos (ldh) e com tolerância ao estresse ácido (dnaK, groEL, ATPase). De 768 frações/extratos testados cerca de 10% inibiram de 50% a 100% do crescimento microbiano de estreptococos orais (com CIM e CBM inferiores a 500 ìg/mL). Dentre os extratos e frações utilizadas, foram selecionados um extrato (DR(M3)6) e duas frações purificadas (PcS2d e DR-MSP- 10d-P3) com atividade antimicrobiana e CIM/CBM inferiores a 125 µg/ml sobre S. mutans, para avaliação da atividade sobre fatores de virulência da espécie. Nas concentrações 7ìg/mL, 31ìg/mL e 62ìg/mL, as frações PcS2d, DR-MSP-10d-P3 e o extrato DR(M3)6, respectivamente, inibiram a formação do biofilme sem interferir no crescimento planctônico das duas cepas analisadas, em adição o tratamento com os respectivos antimicrobianos, nestas mesmas concentrações por 30 minutos, resultou principalmente na redução da expressão dos genes gtfB, gbpB, dnaK e ATPase em proporções diferentes para as cepas S. mutans UA 159 e o isolado clinico. Em conclusão, as substâncias avaliadas, principalmente as frações purificadas podem futuramente ser empregadas como potenciais anticariogênicos/cariostáticos, entretanto mais estudos serão necessários para tal aplicabilidade.
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busca por novos agentes antimicrobianos naturais capazes de inibir os principais
mecanismos de virulência de S. mutans, como a síntese e tolerância a ácidos e a
formação de biofilme dental pode representar uma importante... Ver mais Resumo: Streptococcus mutans é o principal agente etiológico da cárie dental. A
busca por novos agentes antimicrobianos naturais capazes de inibir os principais
mecanismos de virulência de S. mutans, como a síntese e tolerância a ácidos e a
formação de biofilme dental pode representar uma importante estratégia de
prevenção e tratamento desta infecção. Estudos recentes confirmaram que
produtos naturais de origem marinha possuem significativa atividade
antimicrobiana contra microrganismos patogênicos. Assim, o objetivo deste estudo
foi analisar a atividade antimicrobiana de extratos ou frações purificadas obtidos a
partir de invertebrados e microrganismos marinhos associados sobre S. mutans e
outros estreptococos orais como S. sobrinus e S. sanguinis, pela determinação da concentração inibitória mínima (CIM) e concentração bactericida mínima (CBM). Adicionalmente, avaliamos a influência de extratos e/ou frações ativas sobre a formação de biofilme e sobre a expressão dos genes associados aos principais fatores de virulência de S. mutans UA159 e um isolado clínico da espécie. Foram analisados genes associados com a capacidade de formação de biofilme (gtf B/C, gbpB), com a síntese de ácidos (ldh) e com tolerância ao estresse ácido (dnaK, groEL, ATPase). De 768 frações/extratos testados cerca de 10% inibiram de 50% a 100% do crescimento microbiano de estreptococos orais (com CIM e CBM inferiores a 500 ìg/mL). Dentre os extratos e frações utilizadas, foram selecionados um extrato (DR(M3)6) e duas frações purificadas (PcS2d e DR-MSP- 10d-P3) com atividade antimicrobiana e CIM/CBM inferiores a 125 µg/ml sobre S. mutans, para avaliação da atividade sobre fatores de virulência da espécie. Nas concentrações 7ìg/mL, 31ìg/mL e 62ìg/mL, as frações PcS2d, DR-MSP-10d-P3 e o extrato DR(M3)6, respectivamente, inibiram a formação do biofilme sem interferir no crescimento planctônico das duas cepas analisadas, em adição o tratamento com os respectivos antimicrobianos, nestas mesmas concentrações por 30 minutos, resultou principalmente na redução da expressão dos genes gtfB, gbpB, dnaK e ATPase em proporções diferentes para as cepas S. mutans UA 159 e o isolado clinico. Em conclusão, as substâncias avaliadas, principalmente as frações purificadas podem futuramente ser empregadas como potenciais anticariogênicos/cariostáticos, entretanto mais estudos serão necessários para tal aplicabilidade.
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Abstract: Streptococcus mutans are the principal etiologic agent of dental caries. The search for new natural antimicrobial agents capable of inhibiting the mechanisms of virulence of S. mutans, as synthesis and tolerance to acid and dental biofilm formation may represent an important strategy for...
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Abstract: Streptococcus mutans are the principal etiologic agent of dental caries. The search for new natural antimicrobial agents capable of inhibiting the mechanisms of virulence of S. mutans, as synthesis and tolerance to acid and dental biofilm formation may represent an important strategy for prevention and treatment of this infection. Recent studies have confirmed that natural products of marine origin have significant antimicrobial activity against pathogenic microorganisms. The aim of this study was to evaluate the antimicrobial activity of extracts or purified fractions obtained from marine invertebrates and microorganisms associated on S. mutans and other oral streptococci such as S. sobrinus and S. sanguinis by determining the minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum bactericidal concentration (MBC). Additionally, we evaluated the influence of extracts and / or active fractions on the formation of biofilm and the expression of genes associated with virulence factors of S. mutans UA159 and a S. mutans clinical isolate. We analyzed genes associated with the capacity of biofilm formation (gtfB/C, gbpB), acids synthesis (ldh) and acid stress tolerance (dnaK, GroEL, ATPase). 768 fractions / extracts was tested and about 10% inhibited by 50% to 100% of the microbial growth of oral streptococci (MIC and MBC with less than 500ìg/mL). Among the extracts and fractions used were selected an extract (DR (M3) 6) and two purified fractions (PcS2d and DR-MSP-10d-P3) with antimicrobial activity and MIC / MBC less than 125ìg/mL on S. mutans, to evaluate the activity of virulence factors. At concentrations 7ìg/mL, 31ìg/mL e 62ìg/mL, the fractions PcS2d, DRMSP- 10d-P3 and extract DR (M3) 6, respectively, inhibited the formation of biofilms without interfering with planktonic growth the two strains examined, in addition to treatment with the antimicrobial agents, these same concentrations for 30 minutes, resulted in reducing the expression of genes gtfB, gbpB, dnaK ATPase in different proportions for the strains S. mutans UA159 and clinical isolate. In conclusion, substances evaluated, especially the purified fractions can further be used as anticariogenic / cariostatic potential; however, more studies are needed for this application.
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Kamiya, Regianne Umeko
Orientador
Gonçalves, Reginaldo Bruno, 1966-
Coorientador
Ito, Cristiane Yumi Koga
Avaliador
Duque, Cristiane
Avaliador
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Bruna de Araujo Lima
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Bruna de Araujo Lima
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