Resumo: Moluscos bivalves por serem eficazes organismos filtradores acumulam e concentram substâncias, partículas e até mesmo patógenos em seus tecidos, se os locais onde vivem ou são cultivados receberem cargas de efluentes contaminados. Estes animais atuam como bioindicadores de contaminação fecal e, ao serem ingeridos crus ou mal cozidos, podem transmitir os patógenos acumulados em seus tecidos. Diversos estudos em diferentes países reportaram a presença de protozoários patogênicos como Cryptosporidium e Giardia em moluscos bivalves destinados ao consumo humano, porém, no Brasil estes dados são inexistentes. Diante deste cenário, é interessante e relevante investigar a ocorrência destes protozoários neste tipo de alimento, consumidos em diversas regiões do país. Este estudo teve a finalidade de avaliar a contaminação natural por oocistos e cistos dos protozoários parasitos em moluscos bivalves localizados em um ambiente de estuário do litoral norte do Estado de São Paulo; detectar as formas parasitárias em água de rio e água do mar; verificar se existe correlação entre fatores climáticos, físico-químicos e microbiológicos e a ocorrência natural dos parasitos nestes ambientes aquáticos e verificar se existe correlação entre a qualidade das águas e a contaminação dos moluscos que vivem nesta região. Os exemplares de moluscos foram processados através da homogeneização de tecidos específicos e submetidos a centrífugo-concentração com éter-PBS e as amostras hídricas foram analisadas pela técnica de filtração em membranas. A visualização dos protozoários foi realizada através da reação de imunofluorescência direta e a confirmação da morfologia dos protozoários feita com a utilização de microscopia de contraste de fase e a incorporação de um corante vital (DAPI). Cistos de Giardia foram detectados em 8 das 12 amostras de água do rio e uma amostra continha oocistos de Cryptosporidium. Ambos os patógenos foram detectados na água do mar, onde Cryptosporidium esteve presente em 40,0 % e Giardia em 20,0 % do total amostrado. O pool de homogenados teciduais de brânquias foi positivo para oocistos e cistos em dois períodos, com concentrações de 12/oocistos/animal e 50 cistos/animal. Não houve associação significativa entre os fatores climáticos, físico-químicos e microbiológicos e o número de oocistos detectados na água do rio e na água do mar; para os cistos, foi encontrada uma correlação significativa com coliformes termotolerantes (p = 0,007) na água do mar. Ademais, não foi possível estabelecer correlação entre a qualidade da água e o número de cistos e oocistos detectados nos tecidos das ostras. Esta é a primeira vez que oocistos de Cryptosporidium e cistos de Giardia foram encontrados em ostras de uma região costeira do país e também na América Latina. Estes achados têm importância para a saúde pública, pois refletem a extensão da contaminação dos ambientes e dos alimentos de origem marinha, requerendo a padronização de um controle de qualidade. Palavras-chave: Cryptosporidium spp.; Giardia spp.; moluscos bivalves; Crassostrea rhizophorae; água do mar; água de rio; estuário; esgoto Ver menos

Abstract: Bivalve molluscs are great filter feeders that may accumulate and concentrate substances, particles and even pathogens in their tissues, if the places that they inhabit or are cultivated receive contaminated effluents dispose. These animals, which serve as biological indicators of faecal contamination, may transmit the protozoa accumulated in their tissues, whenever they are ingested in a raw or lightly cooked form. Several studies in different countries reported the presence of parasite protozoa like Cryptosporidium and Giardia in bivalve molluscs destined for human consumption, however, in Brazil, these data are non-existent. For this reason, it is interesting and relevant the investigation of the occurrence of these protozoan in this type of food, consumed in different regions of the country. The aim of this study was to evaluate the natural contamination of oocysts and cysts of parasite protozoan in bivalve molluscs located in an estuarine environment in the Northern coast of São Paulo State; detect this protozoan in river and seawater; verify if there is a correlation between climatic, microbiological, physical and chemical factors with the natural occurrence of parasites in aquatic environments and verify if there is a correlation between water quality and the contamination of bivalve molluscs present at the region. Bivalve molluscs were processed through the homogenization of specific tissues and submitted to centrifugal concentration with ether-PBS, and water samples were analyzed by membrane filtration technique. Protozoa were visualized with direct immunofluorescence antibody test and to confirm the morphology of the parasites, contrast-phase microscopy and the incorporation of a vital dye (DAPI) were used. Giardia cysts were detected in 8 of 12 samples of river water and one sample contained Cryptosporidium oocysts. Both pathogens were detected in marine water where Cryptosporidium were present in 40,0% and Giardia in 20,0% of all samples analyzed. Gill pools homogenates of oysters were positive for oocysts and cysts in two periods with a mean concentration of 12 oocysts/oyster and 50 cysts/oyster. There was no significant association between the climatic, physical, chemical and microbiological factors with the number of oocysts detected in river water and in seawater; for cysts, it was found a high association only with thermotolerant coliforms (p = 0,007) in seawater. Moreover, it was not possible to establish correlation between water quality and the number of oocysts and cysts detected in oysters tissues. This is the first time that Cryptosporidium oocysts and Giardia cysts were found in oysters from the coastal region of Brazil, and it is also the first report in Latin America to date. These findings might be of public health importance, reflecting the extension of the contamination in marine environment and on seafood, requiring a need for quality control standards. Key-words: Cryptosporidium spp.; Giardia spp.; bivalve molluscs; Crassostrea rhizophorae; seawater; river water; estuary; sewage Ver menos