Estudo prospectivo da resposta imunologica de crianças brasileiras altamente expostas ao Streptococcus mutans : influencia da especificidade da resposta imune na infeção
Ruchele Dias Nogueira
TESE
Português
(Broch.)
T/UNICAMP N689e
[Prospective study of immune response in Brazilian children heavily exposed to Streptococcus mutans: influence of specific immune response in infection]
Piracicaba, SP : [s.n.], 2006.
156p. : il.
Orientador: Renata de Oliveira Mattos-Graner
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Resumo: Streptococcus mutans (SM) são os principais patógenos da cárie dental. Neste estudo exploramos a influência do sistema imune de mucosa na infecção inicial pelo SM em crianças altamente expostas a este microrganismo. Cento e dezenove crianças, com idade inicial entre 5 a 13 meses de idade...
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Resumo: Streptococcus mutans (SM) são os principais patógenos da cárie dental. Neste estudo exploramos a influência do sistema imune de mucosa na infecção inicial pelo SM em crianças altamente expostas a este microrganismo. Cento e dezenove crianças, com idade inicial entre 5 a 13 meses de idade foram analisadas no início do estudo (T0) e após 6 (T6), 12 (T12) e 18 (T18) meses, amostras bucais foram coletadas para determinação dos níveis de infecção por SM, através do cultivo em mitis salivarius ágar com bacitracina. Os níveis de IgA, IgA1 e IgM foram também determinados em amostras de saliva, através de ensaios de ELISA. Um subgrupo de 21 crianças infectadas por SM (entre T0 e T6) foram pareadas a outras 21 crianças da amostra sem níveis detectáveis de SM. As reações entre anticorpos IgA da saliva com antígenos (Ags) de SM foram comparadas entre estes subgrupos, através de ensaios de western blot. A intensidade das bandas reativas foi determinada através da densitometria e expressas como unidades arbitrárias (ua). A reatividade de IgA salivar com peptídeos derivados da seqüência da GbpB, preditos como regiões ligantes à MHC de classe II, foram também avaliados através de multiplex com o Luminex. Os níveis salivares de IgA aumentaram com a idade (de 82,4 a 823,4µg/ml), enquanto que os níveis de IgM mantiveram-se baixos durante todo o estudo (média:4,2-2,8 µg/ml). Os níveis de infecção por SM foram maiores em T6 (média:45 ufc/área) e uma forte resposta de IgA aos Ags de SM pôde ser detectada logo aos 6 meses de idade. A resposta de IgA anti-GbpB foi observada em 38% das 21 crianças infectadas por SM, enquanto que 73% dos pares não infectados apresentavam estes anticorpos (Qui-quadrado, p<0.03). Um pico de resposta de IgA a GbpB ocorreu durante a fase de maior desafio de infecção (T6). Não houve diferenças significativas nos padrões de reatividade de IgA aos diversos peptídeos de GbpB testados, entre os grupos de crianças infectadas e não infectadas por SM. Os resultados indicam que uma resposta complexa de IgA a SM pode ocorrer a partir dos 6 meses e que a especificidade de resposta a Ags envolvidos na virulência podem influenciar na susceptibilidade à infecção por SM. Nenhum dos peptídeos da GbpB correspondeu às intensidades de resposta à GbpB nativa observadas entre os pares de crianças estudados
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Abstract: Mutans streptococci (MS) are the main pathogens of dental caries. In this study we explored the influence of the muccosal immune system in the initial colonization by MS in children highly exposed to this microorganism. A total of 119 children, who were of 5 to 13 months of age, were...
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Abstract: Mutans streptococci (MS) are the main pathogens of dental caries. In this study we explored the influence of the muccosal immune system in the initial colonization by MS in children highly exposed to this microorganism. A total of 119 children, who were of 5 to 13 months of age, were enrolled in this prospective study. MS levels of infection were determined in cultures on mitis salivarius agar with bacitracin at baseline (T0), 6 (T6), 12 (T12) and 18 months (T18)-of follow-up. Saliva samples were also collected at all phases of the study for determination of the levels of antibodies IgA, IgA1 and IgM in ELISA assays. A subset of 21 MS-infected early between T0 and T6 were matched to other 21children, but who were not MS-infected. Patterns of IgA antibody reactivity to MS Ags were compared between these 21 pairs through assays of western blot. Intensities of IgAreactive bands were determined densitometrically and were expressed as arbitrary unit (au). Reactivities of salivary IgA antibodies to peptides derived from the GbpB sequence, which were predicted as having affinity to MHC of class II molecules were evaluated in multiplex with the help of the Luminex technology. Levels of antibody IgA in saliva increased with age (82.4-823.35 µg/ml), while levels of IgM remained at low levels (mean:4.2-2.78 µg/ml). The highest levels of MS infection in the infected group were observed at T6 (mean:45 cfu/plate). Robust responses to SM antigens were detected in children as early as 6 months of age. Only 38% of early-infected children carried IgA-reative GbpB while this antigen was recognized by the majority (73%) of children that were not infected by these microorganisms (chi-square, p<0.03). A peak of IgA response to GbpB occurred during the phase of highest SM infectious challenge (by T6). All the GbpB-derived peptides have shown reactivity with salivary IgA, independently of the status of MS infection. The results indicated that complex salivary IgA responses to MS Ags can occur by 6 months of age and that the patterns of salivary IgA specificities might influence in the susceptibility of initial infections to MS. Neither of the peptides tested corresponded to differences in response to the native protein observed between the pairs of children studied.
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Mattos-Graner, Renata de Oliveira, 1971-
Orientador
Carneiro, Celia Regina Whitaker
Avaliador
Mayer, Marcia Pinto Alves
Avaliador
Gonçalves, Reginaldo Bruno, 1966-
Avaliador
Höfling, Jose Francisco, 1947-
Avaliador
Estudo prospectivo da resposta imunologica de crianças brasileiras altamente expostas ao Streptococcus mutans : influencia da especificidade da resposta imune na infeção
Ruchele Dias Nogueira
Estudo prospectivo da resposta imunologica de crianças brasileiras altamente expostas ao Streptococcus mutans : influencia da especificidade da resposta imune na infeção
Ruchele Dias Nogueira
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