Orientador: Samir Tufic Arbex

Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba

Resumo: No presente trabalho é descrito e caracterizado o efeito de diversos agentes farmacológicos, em especial a Dobutamina e de um agente físico-radiação Laser - nos eventos que se seguem à interação da Vasopressina com os receptores da membrana de bexiga de sapo, e que são relacionados à síntese...

Resumo: No presente trabalho é descrito e caracterizado o efeito de diversos agentes farmacológicos, em especial a Dobutamina e de um agente físico-radiação Laser - nos eventos que se seguem à interação da Vasopressina com os receptores da membrana de bexiga de sapo, e que são relacionados à síntese e inativação do 3'5'AMPc. O fluxo de água entre as duas faces da membrana foi medido gravimetricamente por meio da técnica de BENTLEY (1958) para preparações em formas de lobos e da técnica de PROCÓPIO e LACAZ-VIEIRA (1977), para preparações em forma de lâmina. Na ausência de Vasopressina, a Dobutamina ou aplicação de radiação Laser não provocou alteração da permeabilidade normal do epitélio à água. Em contraste, a ativação dos receptores adrenérgicos por Dobutamina (8x10-4M) provocou bloqueio significativo (da ordem de 31%) da ação hidrosmótica da Vasopressina 10mU/ml de banho). De maneira semelhante, a aplicação do Laser (10J/cm2) na face serosa bloqueou significativamente (da ordem de 34%) a resposta do tecido a uma nova dose de Vasopressina. Esse efeito não foi verificado quando a face mucosa da membrana foi exposta à radiação. Por outro lado, a associação do 3'5'AMPc com a radiação Laser promoveu aumento do fluxo de água, sugerindo que o agente físico pode ter apresentado efeitos antagônicos sobre o transporte de água, com efeito negativo sobre a produção de 3'5'AMPc, pelo complexo adenilciclase e com efeito positivo sobre a ação do nucleotídeo por inibição da enzima fosfodiesterase-nucleotídeo. Foi verificado também que o inibidor da fosfodiesterase, Teofilina, promoveu aumento significativo do fluxo hidrosmótico, por provocar aumento da concentração de 3'5'AMPc. Quando foi associada Dobutamina à Teofilina, observou-se diminuição da atividade hidrosmótica da metil-xantina, sendo essa ação regenerada, quase que na sua totalidade, pela adição ao banho do antagonista alfa-adrenérgico, Fentolamina. Esses resultados sugerem que a Teofilina atua não somente bloqueando a atividade da fosfodiesterase, como também estimulando o complexo adenilciclase-dependente, na conversão do ATP em 3'5'AMPc. Em contraste, quando da associação de Dobutamina, Vasopressina e um agente beta bloqueador, Propranolol, não ocorreu a restauração do efeito do hormônio anti-diurético. Por outro lado, a associação de agentes bloqueadores alía-adrenérgicos, Fentolamina ou Rauwolscina ao meio contendo Dobutamina e Vasopressina, levou à observação do pleno restabelecimento da ação da Vaso pressina, evidenciando a participação de receptor alfa2-adrenérgico no bloqueio da ação hidrosmótica do hormônio, caracterizando esse receptor como sendo um agonista da diurese. Os resultados obtidos quando da associação de Indometacina com a radiação Laser antes e depois do fluxo de água ter sido estimulado pela Vaso- I pressina, apontam para a possibilidade de que o Laser estimularia a produção I de Prostaglandinas neste tipo de epitélio, que por sua vez interferiria sobre a I atividade hidrosmótica da Vasopressina

Abstract: In the present work the effects of several pharmacological agents in special Dobutamine and a physical agent-Laser radiation - on the events that follow the interaction of Vasopressin with membrane receptors related to syn¬thesis and inactivation of cyclic-AMP in the toad bladder, are...

Abstract: In the present work the effects of several pharmacological agents in special Dobutamine and a physical agent-Laser radiation - on the events that follow the interaction of Vasopressin with membrane receptors related to syn¬thesis and inactivation of cyclic-AMP in the toad bladder, are described and characterized. Water flow across the membrane was measured gravimetrically by the technique of BENTLEY(1958) in sac preparations of the membrane, and by the technique of PROCÓPIO &: LACAZ VIEIRA (1977) in sheet preparations of the bladder. Dobutamine or the application of Laser radiation did not al¬ter the normal water permeability of the epithelium in the absence of Vaso¬pressin. In contrast, adrenoceptors activation by Dobutamine (8x10-4M) led to a significant (about 31%) blockage of the hydrosmotic action of Vasopressin. Similarly, low-energy Laser radiation (10/ Jcm2) blocked the tissue response to Vasopressin after the previously treatment of the membrane with the hor¬mone. This inhibitory effect was not observed when the mucosal face of the membrane was exposed to the Laser radiation. On the other hand, association of cyclic-AMP with Laser radiation pro¬moted an increase in the water flow suggesting that the physical agent may present dual effects on the water tran-sport, one being negative on the cyclic¬AMP production by the adenylate-cyclase complex and the other being positi've on the nucleotide action by phosphodiesterase - nucleotide inhibition. It was also seen that Theophylline - the phosphodiesterase inhibitor ¬stimulated water transport by increasing cyclic-AMP concentration in the tis¬sue. The association of Dobutamine with Theophylline led to a decrease in the methyl-xanthine hydrosmotic activity, being this effect restored almost com¬pletely by the presence in the serosal bathing solution of an alpha-adrenergic antagonist, Phentolamine. These results suggest that Theophylline acts not only by blocking phosphodiesterase activity, but also by stimulating adenylate¬cyclase-dependent complex in the conversion mechanism of ATP to cyclic-AMP. In constrast, when Dobutamine, Vasopressin and an beta-adrenergic an¬tagonist, Propranolol were associated, the hydrosmotic response of the tissue to Vasopressin was not restored. On the other hand, the association of alfa¬adrenergic agent Phentolamine or Rauwolscine to the Dobutamine and Vaso¬pressin serosal bathing solution restored the action of Vasopressin, evidencing
alpha2-adrenergic receptor participation on the blockage of the hydrosmotic action of the hormone, further characterizing this receptor as one diuresis ag¬onist. The results obtained by the association of Indomethacin with Laser ra¬diation before and after the stimulation of water flow by Vasopressin point to the possibility that Laser radiation would stimulate Prostaglandins syn¬thesis in this tissue, interfering in this way with the hydrosmotic activity of Vasopressim