Resumo: O sistema de grupo sangüíneo Dombrock é constituído por um par de antígenos antitéticos, Doa e Dob, e três antígenos de alta freqüência populacional, Gregory (Gya), Holley (Hy) e Joseph (Joa). O gene DO, que codifica os antígenos do sistema Dombrock, foi recentemente clonado e suas bases moleculares foram elucidadas. Os antígenos Doa e Dob. são controlados pelos alelos DOA e DOB que estão associados à troca de três nucíeotídeos no exon 2 do gene DO: 378C/T, 624T/C e 793A/G, respectivamente. O fenótipo Jo(a-) está associado com a substituição 350C/T que caracteriza o alelo JO. O fenótipo Hy-negativo está associado à presença de um dos alelos: HY1 ou HY2. O alelo HY2 é caracterizado pela substituição 323G/T. Uma substituição adicional 898C/G, no exon 3, caracteriza o gene HY/1. Recentemente dois novos alelos foram descritos: DOB- SH (378C, 624C, 793G) e DOA-HA (378T, 624T, 793A). Considerando que: as bases moleculares dos antígenos Dombrock foram elucidadas; que novos alelos têm sido descritos; a miscigenação da população brasileira e que até o momento nenhum estudo foi realizado sobre a freqüência dos genes Dombrock na nossa população, estudamos 450 amostras de DNA, através das técnicas de PCR-RFLP e Microarrays® - HEA Beadchip para determinar a freqüência dos aletos DO {DOA, DOB, HY1, HY2, JO). Dois novos alelos foram identificados baseados em novas combinações de SNPs: alelo DOB- WL (793G, 898G, 323C) e alelo DOA-SH (378C, 624C, 793A). Nossos dados demonstram uma grande complexidade e heterogeneidade dos alelos Dombrock na população brasileira e confirmam a necessidade do estudo molecular em diferentes populações Ver menos

Abstract: Background: The molecular basis of the Doa and Dob polymorphism, are associated with three single-nucleotide polymorphisms (SNPs) on exon 2 of DO gene: 378C>T, 624T>C and 793A>G, DOA and DOB alleles, respectively. The SNPs 350OT (JO allele) and 323G>T (HY allele) are associated with: Jo(a-) and Hy-negative phenotype. Recently, two new DO alleles were identified using the microarray technology, DOB-SH (378C, 624C, 793G) and DOA-HA (378T, 624T, 793A). Although the molecular background of Dombrock system is well defined, no studies were carried out in the Brazilian population. Methods: We employed PCR-RFLP based assays and a microarray assay to determine the frequency of the DO alleles {DOA, DOB, HY1, HY2 and JO) in Brazilians. We tested DNA of 288 Brazilians people by PCR-RFLP to determine the 793A>G (DOA/DOB),
323G>T {HY), 350OT (JO) and 8980G {HY1IHY2) SNPs. We also tested DNA from 162 blood donors by the HEA Beadchip¿ (BioArray Solutions, USA) to determine the 3780T, 624T>C, 793A>G (DOAIDOB), 350OT (JO allele) and 323G>T (HY) SNPs. Results: Two novel alleles combinations were found in our samples: the 793G SNP (DOB allele) associated with 898G and 323G (DOB-WL) and the SNPs 378C, 624C, 793A and 323G (DOA-SH). We also found the DOB-SH and DOA-HA alleles recently reported. Conclusion: Our data demonstrate high heterogeneity of DO alleles in the Brazilian population and highlight the importance of testing a cohort of different populations to determine the DO allele combinations and establish reliable genotyping to predict the Doa/Dob antigen status Ver menos