Resumo: A Leucemia aguda se caracteriza pela proliferação clonal da célula tronco hematopoética substituindo o tecido normal da medula óssea. A recente classificação da OMS incorpora características cito genéticas e imunofenotípicas que apresentam impacto prognóstico. Nós examinamos a distribuição e impacto na sobrevida de vários antígenos de linhagem e maturação usados na rotina de imunofenotipagem dos pacientes com leucemia aguda ao diagnóstico.Os casos foram diagnosticados pelo hemograma, citologia da medula óssea, citoquímica, citogenética e imunofenotipagem através de um painel de triagem de 3 cores (CD45, CD3, CD7, CDI9, CD13, CD33 e HLA-DR) e painéis secundários para LLA de linhagem B (CDI0, CD20, k e À de citoplasma e superfície) e LMA (CD2, CDI4, CDI5, CD34, CD56 e MPO). A expressão dos antígenos foi medida pela intensidade média de fluorescência (CMF) por citometria de fluxo usando o programa Paint-a-gate. Nós analisamos 5 pacientes com LLA de linhagem T. Mediana de idade: 29 anos (14-51).80% dos casos foram diagnosticadosapenas com o painel de triagem.O CD13 foi o marcador de linhagem cruzada mais expresso (80%). Analisamos 31 pacientes com LLA de linhagem B. Mediana de idade: 27 anos (7-67). O painel de triagem definiu a linhagem de 61% dos casos e com o secundário diagnosticamos todos os outros. Os antígenos de linhagem cruzada mais expressos foram os CD13 (35%) e CD33 (38%). Na análise multivariada de Cox a idade e o CMF do CD45 foram fatores preditivos de pior sobrevida.Analisamos 35 pacientes com LMA.Mediana de idade: 51 anos (11-79). O painel de triagem definiu todos os casos. Os subtipos FAB predominantes foram M2 e M4. Nós detectamos 2 sub populações de blastos com fenótipos diferentes em 5 casos e 3 em 1 caso. O marcador de imaturidade CD7 foi expresso em 20% dos casos, os marcadores de linhagem cruzada, CD2 e CD19 em 11% e observamos assincronismode maturação em 20% com CD34/CD15 e 22% com CD34/CD56positivos.Na análise multivariadade Cox o CMF do CD45 e MPO, a idade, cariótipo e número de leucócitos foram fatores preditivos de pior sobrevida. Pela medida da intensidade média de fluorescência dos antígenos nós pudemos detectar parâmetros prognósticos bem como sub populações de blastos fenotipicamente diferentes, que não tiveram influência na sobrevida, mas podem dificultar o estudo de doença residual mínima por citometria de fluxo, visto que a quimioterapiapode selecionar uma das populações Ver menos

Abstract: Acute leukemia is characterized by a c1onal proliferation of haematopoietic stem cell substituting the normal bone marrow. The recent WHO c1assification for acute leukemia separates entities by recurrent cytogenetic abnormalities and immunophenotypic features presenting prognostic impact. We have examined the distribution and impact on survival of the expression of severallineage and maturation linked antigens used in routine immunophenotyping of patients with de novo acute leukemía. Cases were diagnosed by peripheral blood counts,bone marrow cytology, cytochemistry, cytogenetics and immunophenotyping using a first screening panel with 3 colors (CD45, CD3, CD7, CDI9, CD13, CD33 e HLA-DR) and secondary panel for precursor B ALL (CDI0, CD20, k e À) and AML (CD2, CDI4, CD15, CD34, CD56 e MPO). Antigen expression was measured by mean fluorescence intensity (MFI) by flow cytometry using the Paint-a-gate software. We analysed 5 cases of T-ALL. Median age: 29 years (14-51). In 80% of the cases were defined by primary panel. CD13 was the most expressed cross-lineage marker (80%). We analysed 31 cases ofB-ALL. Median age: 27 years (7-67). In 61% of the cases were defined by screening panel and the remaining, by secondary panel defined others. CD13 (35%) and CD33 (38%) were the cross-lineage markers most expressed. In Cox multivariate analysis, MFI of CD45 and age were significant for worse prognosis. We analysed 35 cases of AML. Median age: 51 years (11-79). The screening panel defined all cases. Predomínant FAB types were M2 and M4. In 5 cases we could detect 2 phenotypically different blast subpopulations and in 1 case we detected 3 subpopulations. The immaturity marker CD7 was expressed in 20% ofthe cases, the cross-lineage CD2 and CD19 were expressed in 11% of the cases and we could observe asynchronous in 20% with co-expression of CD34/CD15 and 22% with co-expression of CD34/CD56. In Cox multivariate analysis, MFI of CD45 and MPO, age, WBC and karyotype were significant for worse survival. By measuring the fluorescence intensity of the antigens, we could detect prognostic parameters as well as phenotypically different blast subsets. These did not influence survival, but may represent a pitfall in studies of mínimal residual diseaseby flow cytometry, as chemotherapy may select one of these subsets Ver menos