Resumo: Este trabalho teve por objetivo demonstrar a aplicação das técnicas de citogenética molecular(FISH,CGHe SKY)na resoluçãode casosde anomaliasestruturaise mixoploidias que não puderam ser solucionadospelas técnicas de citogenéticaclássica, e ainda de casos com suspeita de anomalias estruturais que não haviam sido comprovadas pelas mesmas técnicas. Para isso, foram estudados 23 pacientes pertencentes a 21 famílias, que foram divididosem quatro grupos de acordocom a técnica de citogenéticamoleculara ser utilizada para cada caso.A utilização das técnicas de citogenéticamolecular (FISH,CGH e/ou SKY) permitiu uma caracterização rápida e precisa ou, ao menos, uma interpretação mais aprofimdada das aberrações cromossômicas estruturais em 10 dos 11 pacientes em que a citogenética clássica não havia sido suficiente para a correta definição dos segmentos cromossômicos envolvidos, devido à falta de um padrão de bandas coerentes e reconhecíveis. Além disso, permitiu a detecção de deleções sub-microscópias em dois dos nove pacientes com quadro clínico sugestivo da síndrome de Wolf-Hirschhom-SWH (deleção do braço curto do cromossomo 4) e afastou a hipótese de uma deleção envolvendo o gene PAX6 em uma família cujo caso-índice apresenta aniridia e translocação equilibrada As técnicas de citogenética molecular demonstraram ser poderosas ferramentas a serem incorporadas à rotina laboratorial, uma vez que permitiram uma visualização mais detalhada de toda a arquitetura genômica, resultando na identificação da origem de fromentos de origem desconhecida, da I estrutura de rearranjos cromossômicos complexos, e de pequenas alterações não reconhecíveis pela citogenética clássica Ver menos

Abstract: Unbalanced chromosome rearrangements comprise about 3% of alI chromosome aberrations in newborns. Dependingon the chromosome(s)involved in the rearrangement, they may lead to growth disturbance,mental and motor retardation, congenital anomalies, sterilityand(or) disordersof gonadalfunction.Diagnosisis madedifficult due to the fact that classical cytogenetic studies do not allow detection of abnormaIitieswith a DNA length of less than 5-10Mb. In addition, chromosome rearrangements with uncommon banding patterns, such as marker chromosomesor complex translocationsinvolving many different breakpoints, are a difficult task to c1assicalcytogenetic analysis. Molecular cytogenetic techniques (jIuorescencein situ hybridisation- FISH, comparativegenomic hybridisation- CGHand pectralkaryotyping-SKY)becamepowerfultools to fast and accurate diagnosisof numeric and structuraIchromosomeabnormalities.TIúswork was carried out to demonstrate the usefulness of molecular cytogenetics to deaI with cases which could not be solved by c1assicaltechniques. Twenty three individuaIs belonging to 21 families were analyzed in order to get an accurate diagnosis ofnumeric and structural chromosome rearrangements (11 cases); investigate the existence of a 4p deletion in individuaIs with the Wolf-Hirschhom syndrome (WHS) phenotype and normal karyotype; and to analyze in detail a family in which the index case has both aniridia and a baIanced translocation inherited from the father and the mother, respectively. Molecular techniques were of great help to a precise identification or at least a better comprehension of numeric and structural chromosome rearrangements. In addition, in two ofthe nine patientswithWHSphenotypea 4p16.3deletioncouldbe detected;in the other cases, an anaIysisof another criticalregion in the short arm of chromosome4 wouldhave to be performed. Concemingthe family with both aniridia and baIancedtranslocation,a PAX6 gene deletion was not detectedwith the availableprobes, thus indicatinga greater possibility of an intragenic mutation. This work was able to demonstrate the great applicability of molecular cytogenetic studies in the investigation of chromosome abnormaIities,specially whenprecededby a thoroughclinicalevaluationand a classicalkaryotypeof good quality Ver menos