Estudo imunoistoquimico da incorporação de enxerto alogeno com proteina morfogenetica do osso-2 na mandibula de rato
Rogerio da Silva Jorge
TESE
Português
(Broch.)
T/UNICAMP J768e
Piracicaba, SP : [s.n.], 2004.
116p. : il.
Orientador: João Gualberto de Cerqueira Luz
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Resumo: Defeitos ósseos extensos em região maxilo-facial podem ser corrigidos com enxerto autógeno, no entanto as desvantagens desta modalidade terapêutica têm levado à pesquisa por novos materiais para substituir os enxertos autógenos. O objetivo deste estudo foi avaliar a incorporação de enxerto...
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Resumo: Defeitos ósseos extensos em região maxilo-facial podem ser corrigidos com enxerto autógeno, no entanto as desvantagens desta modalidade terapêutica têm levado à pesquisa por novos materiais para substituir os enxertos autógenos. O objetivo deste estudo foi avaliar a incorporação de enxerto alógeno autoclavado associado à proteína morfogenética do osso-2 recombinante humana (BMP-2rh). Foram utilizados 75 ratos Wistar distribuídos em três grupos de 25 animais cada, sendo submetidos a enxerto ósseo em defeito mandibular de tamanho não reparável espontaneamente. No grupo controle foi utilizado enxerto autógeno fresco de osso ilíaco e nos dois grupos experimentais, enxerto alógeno autoclavado ou enxerto alógeno autoclavado associado a BMP-2rh e colágeno tipo IV. Os animais foram sacrificados após um, sete, 14, 21 e 28 dias, sendo a mandíbula radiografada e cortes histológicos obtidos para coloração em hematoxilina e eosina e reação imunoistoquímica com anticorpos para Indian hedgehog (Ihh), Sonic hedgehog (Shh) e osteopontina (OPN). A imagem radiográfica foi submetida a exame de densitometria óptica e os valores testados estatisticamente. No grupo com enxerto autoclavado a neoformação óssea foi limitada aos cotos mandibulares e a reabsorção do enxerto ocorreu de forma mais lenta, restando grande parte do enxerto no tempo final, não sendo observada a união do enxerto com a mandíbula. No enxerto com BMP-2rh a neoformação óssea foi intensa, com preenchimento do espaço medular por neoformação óssea e união com a mandíbula. A incorporação ocorreu de forma mais rápida e houve reparação do defeito mandibular. A distribuição de Ihh e Shh foi similar, sendo positiva em células semelhantes a condrócitos, células semelhantes a fibroblastos e osteoblastos próximos a áreas de neoformação óssea e em células aparentemente associadas ao tecido muscular vizinho ao enxerto. A OPN mostrou áreas positivas associadas a osteócitos, osteoblastos, matriz extracelular na neoformação óssea e remodelação em todos os grupos. Os dados obtidos pela densitometria óptica mostraram resultados estatisticamente significativos no grupo tratado com BMP-2rh. O experimento mostrou a capacidade de indução óssea da BMP-2rh em ratos, associada ao osso alógeno autoclavado. As proteínas Shh e Ihh foram expressas durante a incorporação do enxerto, participando da rede de sinalização encontrada durante a reparação do defeito mandibular do rato
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Abstract: Large bone defects can be managed by autogenous graft; however limitations in this source have induced research for new materials to replace autogenous graft. The incorporation of autoclaved alogenous bone graft associated to recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) was the...
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Abstract: Large bone defects can be managed by autogenous graft; however limitations in this source have induced research for new materials to replace autogenous graft. The incorporation of autoclaved alogenous bone graft associated to recombinant human bone morphogenetic protein 2 (rhBMP-2) was the objective of this study. The study animals were 75 Wistar rats distributted into 3 groups with 25 animals. The rats were submited to a mandibular critical size defect to be treated with autogenous graft from iliac in control group while experimental groups used autoclaved alogenous bone, with or without rhBMP-2. The animals were sacrificed after 1, 7, 14, 21 and 28 days, the mandible radoigraphed, decalcified, stainned for heamatoxilin and eosin and immunohistochemistry for Indian hedgehog (Ihh) and Sonic hedgehog (Shh) and osteopontin (OPN). Radiographic image was submited to optical densitometric avaliation. After 28 days microscopic examination showed almost fully incorporated graft in control group, but in alogenous group without rhBMP-2 there was little incorporation and bone neoformation without bony union between mandible and graft. The use of rhBMP-2 caused an intense osteoinduction bonding mandible and graft after 7 days. After 28 days the incorporation process was similar to that seen in control group. Expression of Shh and Ihh was in the same pattern, with positive chondrocytes-like cells, fibroblast-like cells and osteoblasts near bone neoformation. OPN marker showed positive areas associated to osteocytes, osteoblasts, reversal lines and osteoid matrix. Optical densitometry showed statistically significative results inside rhBMP-2 treated group. This study showed that rhBMP-2 associated to autoclaved alogenous graft is osteoinductive. The Shh and Ihh proteins were expressed during graft incorporation, maybe playing an important role in the bone reparation signalling pathway
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Luz, João Gualberto de Cerqueira
Orientador
Barbeiro, Roberto Henrique
Avaliador
Nunes, Fabio Daumas
Avaliador
Vargas, Pablo Agustin, 1973-
Avaliador
Caria, Paulo Henrique Ferreira, 1972-
Avaliador
Estudo imunoistoquimico da incorporação de enxerto alogeno com proteina morfogenetica do osso-2 na mandibula de rato
Rogerio da Silva Jorge
Estudo imunoistoquimico da incorporação de enxerto alogeno com proteina morfogenetica do osso-2 na mandibula de rato
Rogerio da Silva Jorge
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