Estudo comparativo dos efeitos do veneno de crotalus durissus terrificus adulta e juvenil sobre a junção neuromuscular
Ricardo Stellati Pereira
DISSERTAÇÃO
Português
(Broch.)
T/UNICAMP P414e
Campinas, SP : [s.n.], 2004.
110f. : il.
Orientador: Lea Rodrigues Simioni
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos do veneno de Crotalus durissus terrficus adulta e juvenil, do Vale do Paraíba/SP, sobre a junção neuromuscular. Para tanto, avaliou-se a atividade neurotóxica dos venenos de Cdt, através da técnica miográfica, em preparações biventer cervicis...
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Resumo: O objetivo deste estudo foi comparar os efeitos do veneno de Crotalus durissus terrficus adulta e juvenil, do Vale do Paraíba/SP, sobre a junção neuromuscular. Para tanto, avaliou-se a atividade neurotóxica dos venenos de Cdt, através da técnica miográfica, em preparações biventer cervicis de pintainho e realizou-se análise bioquímica comparativa de todos os venenos utilizados. Foram ensaiadas diferentes doses do veneno total de Cdt, no estudo miográfico (0,5, 1,0, 5,0, 10,0 e 20,0 'mu¿g/ml), sendo que a partir da curva dose-efeito obtida, elegeu-se a concentração de 1 'mu¿g/ml para os ensaios posteriores. A 37°C os venenos estudados produziram bloqueio neuromuscular irreversível da resposta contrátil, em tempo inferior a 120 min e afetaram as respostas contraturantes à ACh (55 e 110 'mu¿M)e ao KCI (20 mM). O tempo necessário para a obtenção de 50% de bloqueio neuromuscular, na concentração de 1 'mu¿g/ml, foi significativamente menor (p<0.05) para o 1° e 2° meses de vida das serpentes de Cdt juvenis. Os dados mostraram que há diferença significativa quanto à toxicidade dos venenos estudados in vitro, não havendo uma relação direta entre a atividade bloqueadora neuromuscular e os valores da DL50. Por meio da análise da Cromatografia de exclusão molecular em HPLC e da confirmação pela análise do padrão eletroforético dos venenos de Crotalus juvenis, do 1° ao 7° mês de extração, pode-se afirmar que ocorre variação na composição dos principais componentes do veneno total e dos componentes que compõem a crotoxina (três isoformas de crotapotina e uma de 'PLA IND. 2¿), fato este também verificado na tabela de composição do veneno de Crotalus durissus terrificus, nos diferentes meses de extração. Diante do exposto, pode-se concluir que: 1) Ocorre variação ontogenética no veneno de Crotalus durissus terrificus, proveniente do Vale do Paraíba/SP. 2) A variação na potência dos venenos de Cdt juvenis observada, em comparação com a potência do veneno de Cdt adulta, leva a acreditar que, ao menos nos dois primeiros meses de vida, as serpentes de Cdt produzam isoformas mais tóxicas de crotoxina (alta toxicidade com baixa atividade enzimática), sendo doravante substituída por isoformas menos tóxicas (moderada toxicidade com alta atividade fosfolipase 'A IND. 2')
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Abstract: The objective of this study was to compare the effects of the poison Crotalus durissus terrificus adult and juvenile, from Vale do Paraíba/SP, on the neuromuscular junction. For so much, we decided to evaluate the neurotoxic activity of the poisons of Cdt, through the miographic technique,...
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Abstract: The objective of this study was to compare the effects of the poison Crotalus durissus terrificus adult and juvenile, from Vale do Paraíba/SP, on the neuromuscular junction. For so much, we decided to evaluate the neurotoxic activity of the poisons of Cdt, through the miographic technique, in chick isolated biventer cervicis muscle preparations and accomplish comparative biochemical analysis of all of poisons used. Five concentration (0.5, 1.0, 5.0, 10 and 20 'mu¿g/ml) of Cdt were researched, and starting from the curve dose-effect obtained, the concentration of 1 'mu¿g /ml was chosen for the subsequent rehearsals. At 37°C all of the poisons studied produced irreversible neuromuscular blockade, in least time at 120 minutes and they affected the contractures to exogenous ACh (55 and 110 mM) and KCI (20 mM). The time for obtaining 50% of neuromuscular blockade, at concentration of 1 'mu¿g/ml, was significantly smaller (p<0.05) for the '1 POT. ST¿ and '2 POT. ND¿ months life of the snakes juvenile Cdt, results these in consonance with the literature. Through the analysis of Molecular Exclusion Cromatography in HPLC and of the confirmation for the analysis of the pattern eletrophoretic of the poisons juvenile Crotalus, of the '1 POT. ST¿ to the '7 POT. ND¿ month extraction, we believe that it happens variation in the composition of the main components of the total poison and of the components that compose the crotoxin (three crotapotine isoforms and one of 'PLA IND. 2); fact this also verified in the table of composition of the poison of Crotalus durissus terrificus, in the different extraction months. Before the exposed, it can be ended that: 1) it happens ontogenetic variation in the poison of Crotalus durissus terrificus, from Vale do Paraíba/SP. 2) the variation in the potency of the paisons of juvenile Cdt observed, in comparison with the potency of the poison of Adult snakes, in the group to believe that, at least in the first two life months, snakes of Cdt produce more poisonous isoforms of crotoxin (High toxicity with low enzymatic activity), being substituted from now on by less poisonous isoforms (Moderate toxicity with high activity 'PLA IND. 2')
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