Resumo: Uma das abordagens terapêuticas não específica utilizada no tratamento da Esclerose Múltipla é o Interferon beta (IFNf3).A Esclerose Múltipla (E.M) é uma doença auto-imune que se caracteriza por inflamação e desmielinizaçãode múltiplas áreas da substância branca do SNC, com posterior lesão do oligodendrócito, resultando clinicamente em disfunção neurológica. O modelo experimental que apresenta muitos aspectos clínicos e histológicos para esta doença é a Encefalomielite Experimental Auto-imune (E.A.E), causada por linfócitos T CD4 tipo Thl, podendo ser induzida em murinos pela inoculação de clones auto-reativos aos componentes da mielina como a proteÚla básica de mielina e a proteolipoproteÚla. A obtenção de tolerância aos antígenos próprios, resulta em mecanismos que levam à supressão de clones de linfócitos específicos para os componentes da mielina como a regulação através de citocinas, e deleção e a anergia dos clones auto-reativos. Diante disso, resolvemos acompanhar o efeito da terapia com IFNf3 sobre a participação de algumas moléculas envolvidas com a doença. Com relação a deleção, observamos o aumento da molécula Fas, tanto na superficie como na sua forma solúvel, detectada em linfócitos e no soro dos pacientes com E.M, incubando-os com os devidos anticorpos e analisando em citômetro de fluxo e ELISA, respectivamente. Com relação a anergia, observamos diminuição de CD80 (que ativam linfócitos Thl) e um aumento significativo na expressão CTLA4, quando quantificamos em linfócitos de murinos com E.A.E, incubando as células com os devidos anticorpos. Foi detectado também, um aumento nos níveis de CTLA4 intracelular (marcador responsável pela regulação negativa dos linfócitos) em pacientes com E.M, incubando as células com os devidos anticorpos e analisando em citometria de fluxo. Paralelamente, estudamos o efeito in vitro dos linfócitos de murinos e humanos afetados, incubando-oscom neuroantígenos e analisandoem Cintilador Beta. Concluímos com os dados obtidos nesse estudo que o IFNf3,modifica vários aspectos da resposta imunológica, fazendo com que clones de linfócitos T respondessem bem menos aos neuroantígenos, sugerindo que estes linfócitos podem estar sendo imunorregulados por anergia ou por apoptose, quando comparados ao grupo não tratado e grupo controle Ver menos

Abstract: One of the non-specific therapeutic approach used in the Multiple Sclerosis treatment is the Interferon ~ (IFN~). Multiple Sclerosis (MS) is an auto-immune disease characterized by the inflamation and demyelination of multiple areas of the white matter of Central Nervous System, with oligodendrocyte lesion resulting in a clinically determined neurological dysfunction. The experimental model that shows several clinical and hystological aspects for this disease is the Experimental Auto-immune Encephalomyelitis (EAE) mediated by ThI type CD4 T lymphocytes that can be induced in murines by the inoculation of neuroantigens likeMyelinBasic Protein and Proteolypoprotein. The development of tolerance to the self antigens results in mechanisms which lead to the supression of specific lymphocyte clones for the myelin components. These mechanisms can be cytokine regulation, deletion and anergy of auto-reactive clones. Furthermore, we accompanied the effects of INF~ therapy over some of these molecules involved in MS. Regarding deletion, we observcd increased Fas molecule levels in both surface and soluble forms. We detected the surface form in lymphocytes incubating with their antibodies and finallyana1ysedin tlow cytometry and the soluble form in sera ofMS patients with ELISA. Regarding anergy, we observed a decreasing in CD80 (that activates ThI lymphocytes) levels and a significant1yaugment in the CTLA4 levels when we verified in murine lymphocytes with EAE, incubating the cells with their antibodies. The increasing of CTLA4 intracellular (marker responsible for the downregulation of activated lymphocytes) levels was detected in MS patients, incubated with their antibodies and analysed in tlow cytometry. In the same time, we studied the lymphocytes of murines and humans affected in vitro, incubatingthem with neuroantigens and further analysingin cintilador beta. Therefore, we concluded with the data acquired in this study that the effect of IFN~ modifies severa! aspects of immune response, thus, the T lymphcyte clones responded much less to the neuroantigens, suggesting these lymphocytes could be immunoregulated by anergy or apoptosis when compared to the non treated or control grou Ver menos