Resumo: Glicose-6-fosfato desidrogenase (G6PD) e 6-fosfogluconato desidrogenase (6PGD) são enzimas relacionadas com os processos de proliferação e detoxificação celular. Neste trabalho a atividade/expressão da G6PD e atividade da 6PGD foram determinadas em duas cepas de Trypanossoma cruzi (Y e Tulahuen 2) que diferem quanto ao índice de proliferação e resistência ao estresse oxidativo. As dosagens da atividade enzimática foram feitas ao longo da curva de crescimento e após incubação das células em presença de peróxido de hidrogênio (H2O2). Nessas condições foram determinados também os níveis de rnRNA e expressão da proteína triparedoxina peroxidase (TcCPx), importante enzima do sistema de defesa antioxidante do parasita. Na cepa Y, menos resistente ao estresse oxidativo, a atividade da 6PGD não sofre grandes variações ao longo da curva de crescimento e, com exceção do primeiro dia de crescimento, supera a da G6PD. Na cepa Tulahuen 2, a atividade da 6PGD fica em tomo de 18 a 33% da G6PD (também com exceção do 1° dia). Ao longo da proliferação da cepa Y observou-se ainda que não existe um padrão comum entre os níveis de rnRNA da G6PD e TcCPx, nem entre a atividade enzimática da primeira e o conteúdo protéico da segunda. Na cepa Tulahuen 2 essas semelhanças existem, principalmente em termos de conteúdo total de rnRNA para as referidas enzimas. A expressão da G6PD nas células Y parece ser mais dependente de glicose do que na outra cepa, especialmente após os tratamentos com H2O2. Na cepa Tulahuen 2 o tratamento com H2O2 ocasiona variações tanto na expressão da G6PD quanto na expressão da T cCPx, desencadeando em ambas uma resposta possivelmente regulada ao nível pós-transcricional. A alta atividade da G6PD na cepa Tulahuen 2, bem como a capacidade da mesma de responder ao estímulo por H2O2 na ausência de glicose e de forma simultânea com a TcCPx, são fatores que devem contribuir tanto para a maior resistência ao estresse oxidativo quanto para o maior nível de proliferação que estas células apresentam em relação às células da cepa Y. Ver menos

Abstract: Glucose-6-phosphate dehydrogenase (G6PD) and 6-phosphogluconate dehydrogenase (6PCJD) are enzyrnes related to cell proliferation and to detoxification processes. In this work, the activity/expression of CJ6PD and 6PCJD activity were determined in two strains of Trypanosoma cruzi (Y and Tulahuen 2) that differ in the proliferation index and resistance to oxidative stress. Enzymatic activity was assayed throughout the growth curve and after incubation with hydrogen peroxide (H2O2). It was also established under the same condition, rnRNA levels and protein expression of tryparedoxin peroxidase (TcCPX), an important enzyrne of the parasite antioxidant defense system. 6PCJD activity in Y strain, less resistance to oxidative stress, remained amost constant throughout the growth curve and except for the first day of growth, was higher than G6PD. In the Tulahuen 2 strain, 6PCJD activity was 18-33% of CJ6PD activity (except for the first day). For Y strain there was neither a common pattern between CJ6PD and TcCPx mRNA levels, nor between J6PD activity and TcCPx protein levels. In the Tulahuen 2 strain these similarities exist, mainly at the rnRNA content of these enzymes. CJ6PD expression in Y strain appears to be more glucose-dependent than the other strain, especially after H2O2 incubation. In Tulahuen 2 strain, H2O2 treatment lead to variations in CJ6PD and TcCPx expression, regulated probably at the post transcriptional level. The high CJ6PD activity in the Tulahuen 2 strain and the ability of these cells to respond to H2O2 in the absence of glucose simultaeously with TcCPx can contribute to the higher resistance to oxidative stress and also to the higher proliferation index observed in these ce1ls when compared to the other strain Ver menos