Orientador: Maria Edwiges Hoffmann

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: Este trabalho tem como objetivo o estudo do mecanismo de ação citotóxica da THQ em células da linhagem V79. A THQ sofre autooxidação espontânea em condições fisiológicas com produção do ânion superóxido, peróxido de hidrogênio, radical hidroxila, radical semiquinona e ácido rodizônico....

Resumo: Este trabalho tem como objetivo o estudo do mecanismo de ação citotóxica da THQ em células da linhagem V79. A THQ sofre autooxidação espontânea em condições fisiológicas com produção do ânion superóxido, peróxido de hidrogênio, radical hidroxila, radical semiquinona e ácido rodizônico. Estudamos a ação da THQ sobre o DNA celular, enfocando seu efeito sobre a replicação semiconservativa. Verificamos que as espécies geradas durante a autooxidação da THQ estão envolvidas no evento da inibição da sintese de DNA promovido por essa quinona. Entre estas, o 'H IND. 2¿ 'O IND. 2' tem papel central, através de um mecanismo independente de ferro. Evidenciamos também o envolvimento de radicais hidroxila nesse evento, assim como no mecanismo de inibição da replicação do DNA de células expostas ao 'H IND. 2¿ 'O IND. 2' Aqui, distintamente da THQ, o ferro participa do. evento da inibição da replicação, evidenciando a ocorrência da Reação de Fenton como mecanismo de produção dos radicais hidroxila. No caso da THQ estes radicais parecem estar sendo formados via Reação de Fenton Orgânica. A cinética de recuperação da inibição da replicação causada pela THQ indica a presença de lesões no DNA. Detectamos a produção de quebras simples nas fitas do DNA de células expostas à THQ , através da técnica de sedimentação em gradiente de sacarose alcalino. Estas quebras são independentes da presença de 'H IND. 2¿ 'O IND. 2' e Fe, sugerindo que os eventos de inibição da replicação e de produção de quebras do DNA não são mediados por um mecanismo único

Abstract: This work investigates the THQ citotoxicity mechanisms on V79 cell line. THQ undergoes spontaneous autoxidation under physiological conditions generating superoxide anion radical, hydrogen peroxide, hydroxyl radical and rodizonic acid. THQ has an genotoxic action, inhibiting the DNA...

Abstract: This work investigates the THQ citotoxicity mechanisms on V79 cell line. THQ undergoes spontaneous autoxidation under physiological conditions generating superoxide anion radical, hydrogen peroxide, hydroxyl radical and rodizonic acid. THQ has an genotoxic action, inhibiting the DNA semiconservative replication process and inducting the production of DNA single strand breaks. The intermediates of THQ autoxidation are involved on the DNA synthesis inhibition mechanism. Among these, hydrogen peroxide plays a central role, through an iron independent pathway. Hydroxyl radical was evidenciated as the final oxidant of DNA synthesis inhibition mechanism in cells exposed to THQ and H202. In the latter, iron is participating in the mechanism, indicating a Fenton type reaction for the hydroxyl radicaIs generation.For THQ, these radicaIs seems to be generated through an Organic Fenton Reaction. The recovery kinetics pattern of DNA synthesis inhibition induced by THQ indicates the presence of DNA lesions. The DNA single strand breaks, detected by DNA sedimentation in alkaline sucrose gradient, are not H202 and Fe dependent. These results suggest that the two events studied, DNA synthesis inhibition and DNA single strand breaks, are not mediated by a single mechanism