Orientador : Benedito Oliveira

Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia

Resumo: A hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus (0ligochaeta - glossoscolecidae) apresenta peso molecular aproximado de 3.106 e é formada por cinco unidades principais de: 70kOa, 50kOa, "kDa, 28kOa e 12kDa. Estudos eletroforéticos em poliacrilamida (PAGE/SDS) evidenciaram ser a unidade...

Resumo: A hemoglobina extracelular de Glossoscolex paulistus (0ligochaeta - glossoscolecidae) apresenta peso molecular aproximado de 3.106 e é formada por cinco unidades principais de: 70kOa, 50kOa, "kDa, 28kOa e 12kDa. Estudos eletroforéticos em poliacrilamida (PAGE/SDS) evidenciaram ser a unidade 70kDa o tetrâmero formado por quatro cadeias polipeptídicas de 16kDa, a unidade 50kDa o trímero formado por três cadeias de 16kDa, as unidades 33 e 28kDa dímeros de cadeia única e a unidade 12kDa o monômero, a menor unidade encontrada nas hemoglobinas de invertebrados. A hemoglobina nativa (pH 7,4) apresenta afinidade pelo oxigênio (P50 = 6.6 torr) maior que a hemoglobina humana e menor do que a mioglobina. A hemoglobina dissociada em pH alcalino apresenta menor afinidade pelo oxigênio sendo necessário quantidade de O2 maiores para saturar 50% dos grupamentos heme. A ligação do oxigênio na hemoglobina dissociada é irreversível sendo necessário o tratamento com ditionito de sódio para que ocorresse a desoxigenação. Através da filtração da hemoglobina dissociada em gel de Sephadex G-200, foi possível isolar o monômero 12kDa. Esse monômero apresenta homologia com a mioglobina e sua afinidade pelo oxigênio é similar a mioglobina. Estudos imunoquímicos indicaram a identidade antigênica parcial entre o monômero 12kDa e o trímero 50kDa, sugerindo que possivelmente as cadeias polipeptídicas que formam o trímero são homólogas às cadeias monoméricas a nível de seqüência primária. Este resultado sugere que as unidades que formam o complexo final partilham de um gene ancestral comum e que por pressão evolutiva se agregaram a fim de optimizar o transporte do oxigênio. Um modelo localizando as unidades dentro do complexo total é sugerido indicando que as unidades funcionais se encontram no centro da molécula e são protegidas da oxidação pelos polipeptídeo estruturais que se encontram por toda a superfície da molécula