Aspectos histoquimicos e ultra-estruturais de enxertos autologos de nervos estocados em diferentes soluções conservadoras
Jose Eduardo Scabora
DISSERTAÇÃO
Português
(Broch.)
T/UNICAMP Sca18a
Campinas, SP : [s.n.], 2003.
51f. : il.
Orientadores: Francesco Langone, Marcelo Augusto Marretto Esquisatto
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: Os efeitos de soluções conservadoras de órgãos (SC) sobre a estrutura e a viabilidade de enxertos de nervos periféricos são pouco conhecidos. Neste estudo investigamos a organização histológica e ultra-estrutural de enxertos após sua manutenção em dois tipos de SC e após transplante...
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Resumo: Os efeitos de soluções conservadoras de órgãos (SC) sobre a estrutura e a viabilidade de enxertos de nervos periféricos são pouco conhecidos. Neste estudo investigamos a organização histológica e ultra-estrutural de enxertos após sua manutenção em dois tipos de SC e após transplante autólogo. Ratos Wistar machos foram agrupados para obtenção de nervos ciáticos normais (NN), transplantados a fresco (NF), conservados em solução de Wisconsin/Belzer ou solução de Collins, por 24 ou 72 horas a 4°C (W1,W3;C1,C3), e conservados e transplantados (W1-T,W3-T;C1-T,C3-T). Após os períodos de conservação ou transplante, os espécimes foram processados para análise ao microscópio óptico e eletrônico. A morfologia dos segmentos de nervos conservados apresentou alterações na sua estrutura comparativamente aos segmentos de nervos frescos. Foi observada redução da basofilia tecidual em todos os segmentos conservados quando comparados ao nervo normal. Esta redução foi mais acentuada no grupo C3. Os grupos W1 e W3 apresentaram aspectos semelhantes entre si. Em todos os grupos não foram observadas alterações quanto à distribuição e organização das fibras colágenas. Após 50 dias de transplante a basofilia tecidual e a celularidade foram semelhantes entre os grupos W1-T, W3-T; C1-T, C3-T e NF. Por outro lado, a vascularização nos enxertos dos grupos tratados mostrou-se aparentemente mais densa que os enxertos do grupo NF. Não foram observadas alterações nas células do perineuro, mas em todos os grupos tratados foram detectadas áreas com abundante deposição de fibras colágenas entre as camadas de células perineurais. Este fato foi especialmente mais intenso nos grupos C 1- T e C3- T. A análise ultra-estrutural revelou no grupo C3 uma acentuada desorganização das fibrilas de colágeno do endoneuro quando comparado ao grupo NN. Os grupos C 1 e C3 apresentaram maior freqüência de alterações das lamelas da bainha de mielina, comparativamente aos grupos Wl e W3, e seus axônios exibiam clara desorganização dos neurofilamentos. Não foram detectadas alterações na lâmina basal das fibras mielínicas e dos feixes amielínicos. As células de Schwann mantiveram a integridade de sua estrutura nos grupos Cl e W1. Contudo, no grupo C3 foram observadas numerosas células de Schwann exibindo vacuolização e aumento de volume do citoplasma. Os grupos W1- T e W3- T apresentaram maior densidade de fibras mielínicas e organização tecidual semelhante ao grupo NF. Por sua vez, os grupos C1-T e C3-T apresentaram grande número de mini-fascículos e colágeno endoneural. O perineuro dos diferentes grupos apresentou-se semelhante ao observado nos grupos NN e NF. As análises estrutural e ultra-estrutural mostraram que a preservação das células de Schwann e demais elementos que suportam a regeneração axonal foi superior nos enxertos conservados na solução de Wisconsin/Belzer. Estes resultados embasam estudos em andamento para a formulação de SC que viabilizem a criação de bancos de nervos para transplantes heterólogos
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Abstract: The effects of the organ conservative solutions (CS) on the structure and the viability of peripheral nerve grafts are largely unknown. We investigate the histology and the ultrastructure of peripheral nerve grafts after storage in two types of CS and/or used for autologous...
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Abstract: The effects of the organ conservative solutions (CS) on the structure and the viability of peripheral nerve grafts are largely unknown. We investigate the histology and the ultrastructure of peripheral nerve grafts after storage in two types of CS and/or used for autologous transplantation. A group of male Wistar rats was used to obtain sciatic nerve grafts that had been conserved in Wisconsin/Belzer (W) or Collins (C) solutions, for 24 or 72 hours 4°C (WI, W3; CI, C3). Another group of animals was used to obtain tibial nerve grafts that were immediately transplanted (NF) or conserved in W or C solutions, for 24 or 72 hours 4°C, and then transplanted (WI-T, W3-T, CI-T, C3-T). After the conservation periods (24 or 72 hours) or 50 days after the transplantation the nerve grafts had been processed for light and electronic microscope analysis. The basophilia was decreased in the specimens of the groups conserved in S or C solutions when compared to normal nerves (NN). This reduction was more prominent in the C3 group. The Wl and W3 groups presented similar aspects. No alterations were observed in the distribution and organization of collagen fibers. Fifty 50 days after transplantation a similar basophilia and cellularity were found in WI-T, W3-T, CI-T, C3-T and NF groups. On the other band, the vascularization of the conserved grafts was more conspicuous than in the NF grafts. No alteration was observed in the perineurium but some intense deposition of collagen fibers was similar to that observed in nerve fibrosis has detected in all the groups. This fact was more frequent in CI-T and C3-T groups. The ultra-structural analysis of the C3 group showed a higher degree of collagen fibrils derangement in the endoneurium in relation to the normal nerves. The C 1 and C3 groups presented a higher frequency myelin sheath alterations when compared to the WI and W3 groups and the axons exhibited neurofilament derangement. None alteration was detected in the basal lamina of the myelinated or unmyelinated nerve fibers. The integrity of Schwann cells structure was maintained in the Cl and WI groups, but exhibited vacuolization and cytoplasmatic edema in C3 group. The Wl- T and W3- T groups presented a higher density of the myelinated fibers and a similar tissue organization to the NF group. The CI-T and C3-T groups presented a large number of mini-fascicles and endoneural collagen. The perineurium structure was similar to the observed in NN and NF groups. The structural and ultrastructural analysis have shown that the preservation of the Schwann cells and the other elements which support the axonal regeneration was greater in the grafts that had been conserved in the Wisconsin/Belzer solution. Our observations contribute to better known the effects of conservative solutions on peripheral nerves and support the creation of a bank of nerve grafts for heterologous transplantation
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Aspectos histoquimicos e ultra-estruturais de enxertos autologos de nervos estocados em diferentes soluções conservadoras
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