Caracterização molecular de virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) isolado no Brasil
Jacqueline Campalans-Barnier
TESE
Português
(Broch.)
T/UNICAMP C15c
Campinas, SP : [s.n.], 2002.
86f. : il.
Orientadores: Clarice Weis Arns, Sandra Cecilia Botelho Costa
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Resumo: O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa infecção aguda do trato respiratório em bovinos e está amplamente disseminado no mundo inteiro, provocando grandes perdas econômicas aos produtores. O presente projeto visou realizar a caracterização do vírus respiratório sincicial bovino...
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Resumo: O vírus respiratório sincicial bovino (BRSV) causa infecção aguda do trato respiratório em bovinos e está amplamente disseminado no mundo inteiro, provocando grandes perdas econômicas aos produtores. O presente projeto visou realizar a caracterização do vírus respiratório sincicial bovino (BRSV), denominado BRSV-25-BR, isolado de bezerro de dois meses de idade, proveniente de rebanho com sintomas de doença respiratória do Estado do Rio Grande do Sul, comparando o mesmo com isolados de BRSV de outros países. O passo inicial foi adaptar os diferentes isolados virais em sistema celular e, para tanto, foram utilizados cultivos de células CER ("Chicken Embryo Related¿). A análise morfológica do isolado brasileiro foi realizada através de microscopia eletrônica por contrastação negativa e o resultado dessa análise indicou que o isolado estudado, BRSV-25-BR, é um vírion arredondado, pleomórfico, de tamanho aproximado de 100 a 300 nm, com numerosas espículas espalhadas na superfície. Foi realizada uma comparação do genoma dos isolados virais utilizando a técnica de RT-PCR dupla. Foram utilizados os iniciadores B1, B2A, B3 e B4A para a proteína F que resultou na amplificação do fragmento no tamanho esperado, 481 pb. A análise desta seqüência revelou 97% de identidade de nucleotídeos das seqüências da proteína F do isolado BRSV-25-BR com as estirpes de BRSV armazenadas no GeneBank. A RT-PCR dupla utilizando os iniciadores B5A, B6A, B7A e B8 para a proteína G, amplificaram um fragmento do genoma viral do tamanho esperado, 371 pb. A porcentagem de identidade entre a seqüência do BRSV-25-BR e o fragmento equivalente das estirpes armazenadas no GeneBank encontrada foram entre 92 e 95%. A seqüência dos aminoácidos derivados da proteína G do isolado brasileiro comparado com as seqüências dos isolados registrados no GeneBank sugere sua associação ao subgrupo B. A informação obtida nesta pesquisa a partir da seqüência da proteína G permite afirmar que o isolado do Brasil é uma estirpe de BRSV diferente daquelas atualmente circulantes nas demais partes do mundo. Esta informação contribui para uma maior compreensão da epidemiologia e para o desenvolvimento de vacinas adequadas para o nosso meio
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Abstract: The bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes acute infection in the respiratory tract of cattle and is wide spread in the world, causing significant economic losses. The objective of this project was to characterize the BRSV, named BRSV-25-BR, isolated from a 2 months calve from...
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Abstract: The bovine respiratory syncytial virus (BRSV) causes acute infection in the respiratory tract of cattle and is wide spread in the world, causing significant economic losses. The objective of this project was to characterize the BRSV, named BRSV-25-BR, isolated from a 2 months calve from Rio Grande do Sul state cattle, which presented respiratory disease symptoms. This sample was compared against BRSV strain isolates from other countries. The initial step was to adapt the viral samples in cellular culture. To achieve this purpose, a CER (Chicken Embryo Related) cell culture was used. The morphologic analysis was done through electronic microscopy using a negative stain. A genomic comparison to the viral isolates was carried out. The outcomes of the analyses indicate that the analyzed sample, named BRSV-25-BR, is an rounded, pleomorphic virion, between 100-300 nm in size and numerous spikes over the surface. The amplification of the expected size fragment, which was 481 pb, was observed through a nested RT-PCR technique, using the B1, B2A, B3 and B4A primers for the F protein. The analyses of this sequence of nucleotides revealed 97% identity between the F protein sequence of the isolated BRSV-25-BR and the strains of BRSV equivalent sequences stored in the GeneBank. The amplification of the viral genome on an expected size fragment (371 pb) was achieved using the nested RT-PCR, in which the B5A, B6A, B7A and B8 primers for the G protein were used. The identity percentage between the BRSV-25-BR sequence and the compensative fragment of the GeneBank stored strains was smaller, ranging between 92% and 95%. A probable association to the B subgroup is suggested from the deduzed amminoacid sequence of the G protein of the Brazilian sample compared to the sample sequences registered in the GeneBank. The information gathered from this research project allows to affirm that the isolated Brazilian sample belongs to a kind of BRSV different from those present in the world and contribute with a values to epidemiologic studies
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Arns, Clarice Weis, 1956-
Orientador
Costa, Sandra Cecília Botelho, 1951-
Coorientador
Jerez, Antonio
Avaliador
Pituco, Edwirges Maristela
Avaliador
Gatti, Maria Silvia Viccari, 1954-
Avaliador
Caracterização molecular de virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) isolado no Brasil
Jacqueline Campalans-Barnier
Caracterização molecular de virus respiratorio sincicial bovino (BRSV) isolado no Brasil
Jacqueline Campalans-Barnier
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