Resumo: o fracionamento do veneno total de Crotalus durissus terrificus (C.d.terrificus), Crotalus duríssus collilineatus (C.d.collilíneatus) e Crotalus durissus cascavella (C.d.cascavella) em coluna Superdex G-75 mostrou a presença de quatro picos principais. O pico reconhecido como crotoxina nas três espécies crotálicas foi purificado em HPLC de fase reversa, e mostrou a presença das isoformas de crotapotinas (CA) e fosfolipase A2 (PLA2), que variam quantitativamente entre os três venenos. A eletroforese também foi compatível quanto as regiões de massa molecular esperadas para a frações (Crtx, PLA2 e CA) dos três venenos, mostrando que há alta homogeneidade molecular entre as mesmas. O extravasamento plasmático evocado pela (CA; 1j../g/sítio) e (P_ ; O,5j../g/sítio) de C.d.terrificus, C.d.collílineatus e C.d.cascavells foi avaliado na microvasculatura de pele dorsal de ratos através do acúmulo local da mistura de albumina bovina marcada com 125 e azul de Evans, previamente administrada pela via endovenosa (e.v.). A injeção intradérmica (Ld.) das CA e PLA2 dos três venenos crotálicos induziu aumento na permeabilidade microvascular de maneira significativa para as PLA2s, mas não para as Caso tratamento prévio (30 min) com o antagonista de receptores de histamina e 5-HT (ciproheptadina; 2mg/Kg) inibiu significativamente o extravasamento plasmático evocado pelas PLA2 dos três venenos testados (0,5 j../g/sítio). O antagonista seletivo de receptores NK1 de taquicininas, SR140333 (1nmol/sítio), inibiu significativamente o extravasamento plasmático evocado pelas PLA2S. Em ratos neonatos tratados com capsaicina (50mg/Kg; s.c.), o extravasamento plasmático induzido pelas três PLA2S crotálicas foi significativamente inibido. Em resumo, nossos resultados fornecem evidências que PLA2S de C.d.terrlficus, C.d.coIlilineatus e C.d.cascavella podem atuar como substâncias neurogênicas próinflamatórios, enquanto que as CAs não têm papel semelhante Ver menos

Abstract: The fractionament of the crude poison of Crotalus durissus terrificus (C.d.terrificus) , Crotalus durissus collilíneatus (C.d.coJlílíneatus) and Crotalus. durissus cascaveiJa (C.d.cascaveJ/a) in calumn Supherdex G-75 showed the presence of faur main picks. The pick recognized as crotoxina in the three species crotalics was purified in reverse phase HPLC , and showed the presence of the crotapotins (CA) and fosfolipase Az (PLAz) isoforms, that vary Quantitativamente amang the three poisans. The eletrofaresis was also compatible as the areas af molecular mass expected for the fractions (Crtx, PLA2 and CA) af the three poisans, showing that there is discharge malecular hamogeneity among them. Plasma extravasation evoked by the (CA; 1(Jg/site) and (PLA2; O,5jJg/site) af C.d.terrificus, C.d.colfilíneatus and C.d.cascavella was evaluated in the mierovasculature af rats dorsal skin through the local accumulation of the mixture of bovine albumin marked with 1125 and Evans bJue previously administered by the endovenosa road (e.v.). The intradermic injection (Ld.) of CA and PLA2 of the three erotalics poisons indueed an inerease in the mierovaseular permeability in a sígnificant way for PLA2S, but not for Caso Previous treatment (30 min) with histamine and 5HT receptor antagonist (ciproheptadina; 2mg/Kg; i.p.) inhibited the plasma extravasation signmcantJy evoked by PLA2 from the three venons tested (0,5 (Jglsíte). The takicinin NK1 receptor selective antagonist, SR140333 (1 nmol/site), inhibited the plasma extravasation significantly evoked by PLAzs. In neonatal capsaiein treated rats (50mglKg; s.e.), the plasma extravasation induced by three crotalics PLA2S was significantly inhibited. In summary, our results supply evidences that PLA2S trom C.d.terrificus, C.d.co/lilíneatus and C.d.cascaveJ/a can aet as proinflammatory neurogenics substances, while CAs don't have similar role Ver menos