Marcadores de estresse oxidativo induzido pelo exercicio fisico e tecnologia para sua quantificação
Armindo Antonio Alves
TESE
Português
(Broch.)
T/UNICAMP AL87m
Campinas, SP : [s.n.], 2002.
88p. : il.
Orientador: Denise Vaz de Macedo
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: O estresse oxidativo induzido pelo exercício físico, dependendo do nível atingido, é um fator importante tanto nos processos que levam à melhora da performance quanto nos que induzem fadiga ou lesão muscular. O nosso principal objetivo foi responder se as respostas induzidas por diferentes...
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Resumo: O estresse oxidativo induzido pelo exercício físico, dependendo do nível atingido, é um fator importante tanto nos processos que levam à melhora da performance quanto nos que induzem fadiga ou lesão muscular. O nosso principal objetivo foi responder se as respostas induzidas por diferentes protocolos de treinamento podem ser quantificadas através de marcadores de estresse e desta forma serem aplicadas para o diagnóstico de "overreaching". Para isso, analisamos marcadores sanguíneos e musculares em diferentes situações de exercício físico. Primeiramente mostramos que a concentração de TBARS na urina e a concentração de proteínas carboniladas (PC) e grupamentos sulfidrila no plasma refletem as diferenças na adaptação induzida por dois tipos de treinamento distintos, contínuo e intermitente. Em seguida, mostramos que após um exercício exaustivo a cinética dos biomarcadores de ataque no músculo apresenta um aumento, com pico 3 horas após o exercício, e que se reflete no sangue 6 horas após o estímulo. Esse estresse é acompanhado pela queda na atividade do sistema antioxidante muscular. O pico de concentração de TBARS e PC no músculo coincide com o pico de atividade da creatina quinase no plasma. Mostramos ainda que há uma correlação positiva entre o pico de concentração de TBARS no músculo com o do sangue e de ambas com o pico da CK plasmática, não ocorrendo o mesmo com a de PC. Esses dados indicam que a coleta dos biomarcadores no tempo certo permitem a utilização de amostras de sangue para o acompanhamento do estresse oxidativo induzido pelos diferentes tipos de exercício, de forma que o treinamento induza o aumento desejado da performance, sem no entanto, provocar danos musculares. Outro ponto importante refere-se à metodologia adequada para determinação desses marcadores. Assim, desenvolvemos um sensor amperométrico para a análise da atividade da enzima glutationa redutase para ser utilizado em campo. Este apresentou uma boa linearidade da resposta em função da atividade entre 0-0,40 UI/mL, usando-se 3_L de hemolisado de hemácias, que pode ser obtido a partir de uma gota de sangue
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Abstract: Physical exerci se induced oxidative stress is widely documented in literature. However, training is essential to improve the performance leading to an adaptative response, although it can lead also to oxidative damage of cellular strutures and ultimately to tissue injury. This points the...
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Abstract: Physical exerci se induced oxidative stress is widely documented in literature. However, training is essential to improve the performance leading to an adaptative response, although it can lead also to oxidative damage of cellular strutures and ultimately to tissue injury. This points the importance of choosing the best suitable training programo Our aim was to answer if the induced response obtained employing different training protocols could be quantified through the determination of oxidative stress biomarkers and used to overreaching diagnosis. Our approach was to analyse blood and muscle biomarkers in different exerci se situations. First we showed that the variation of TBAR5 concentration in urine and the concentration of plasma carbonyl proteins and sulfhydryl groups reflected the different adaptations induced by two types of training protocols: continuous and intermittent training. Than we showed that after an exhaustive exercise the biomarkers of oxidative attack reached maximum values at 3 hours after the exercise, resulting in the blood maximum values 6 hours after the stimulus. This stress was followed by the decrease of the muscular enzymatic antioxidant system. The muscle TBAR5 and carbonyl proteins peak coincided with the peak concentration of plasma activity of creatine kinase. There was a positive correlation when we compare the concentration of TBARS in both muscle and blood, and both with plasma creatine kinase activity. There was no such correlation with the carbonyl protein concentrations. Our data indicated that the correct time of sampling is an important factor to allow the use of blood samples to follow the different exercise-induced stress in order to prevent overreaching. Another important point is how to develop a suitable method for determination of these biomarkers. 50, we built an amperometric sensor for the glutathione reductase activity to be used in the ground. This sensor has the accuracy for 0-0.4 IUjmL using 3J.1L of erytrocyte haemolisate, obtained from a blood dro
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