Isquemia e reperfusão hepatica total em condições de normalidade e sob estado de choque hemorragico controlado : efeitos no sequestro de neutrofilos no ileo terminal e colon sigmoide do rato
Mauro Jose Pantoja Fontelles
TESE
Português
(Broch.)
T/UNICAMP F737i
Campinas, SP : [s.n.], 2001.
145p. : il.
Orientador: Mario Mantovani
Tese (doutorado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciencias Medicas
Resumo: o trauma é uma das principais causas de morte na população, ocupando o terceiro lugar se consideradas todas as idades e, o primeiro, na faixa etária até os 44 anos de vida. Dentre estas causas, o fígado constitui um dos principais órgãos atingidos no trauma abdominal e lesões hepáticas...
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Resumo: o trauma é uma das principais causas de morte na população, ocupando o terceiro lugar se consideradas todas as idades e, o primeiro, na faixa etária até os 44 anos de vida. Dentre estas causas, o fígado constitui um dos principais órgãos atingidos no trauma abdominal e lesões hepáticas graves podem, pelo choque hemorrágico, evoluir para um estado de resposta inflamatória
generalizada e resultar na insuficiência de múltiplos órgãos e sistemas. Nestes casos, o princípio do tratamento cirúrgico é sustar o sangramento pela oclusão temporária do ligamento hepatoduodenal, manobra descrita por Pringle em 1908 que, embora prática e eficaz, provoca isquemia total do fígado, podendo levar a alterações importantes na estrutura anatômica do órgão, piorando a fase de
reperfusão pela liberação de substâncias desencadeantes da resposta inflamatória e migração de neutrófilos para os tecidos à distância. Assim, o objetivo deste trabalho experimental foi estudar os efeitos da isquemia e reperfusão hepática total, em condições de normalidade e sob estado de choque hemorrágico controlado, no acúmulo de neutrófilos no intestino do rato. Um total de 32 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar, foram randomizados em 4 grupos de oito animais cada: 1) Grupo Sham (anestesia +
laparotomia + observação por 60 min.); 2) Grupo Choque (anestesia + choque hemorrágico 20 min + reposição volêmica + reperfusão 60 min); Grupo Pringle (anestesia + isquemia hepática 15 mino + reperfusão 60 min.); Grupo Total (anestesia + choque hemorrágico 20 mino + reposição volêmica + isquemia hepática 15 mino + reperfusão60 min.). O estado de choque hemorrágico controlado foi obtido pela sangria, a intervalos regulares, de volumes equivalentes a 5% da volemia estimada até a obtenção da pressão arterial média igual a 40mmHg e, mantido por 20 minutos. A reposição volêmica foi efetuada com solução de Ringer lactato e sangue total (3: 1). A isquemia hepática total foi obtida pelo pinçamento do ligamento hepatoduodenal durante 15 minutos, seguida por reperfusão de 60 minutos. Das mostras sangüíneas, o lactato sérico e a reserva de base caracterizaram o estado de choque com baixa perfusão tecidual, sendo, então, os animais sacrificados por exsanguinação. Segmentos do íleo terminal e cólon sigmóide foram submetidos a
estudo histopatológico para a contagem de neutrófilos. Análises estatísticas foram processadas para caracterização do nível de
significância que foi estabelecido em 5%(p <; 0.005). Os resultados obtidos mostraram que a isquemia hepática total, seguida
de reperfusão, não induziu a um afluxo de neutrófilos para o intestino nos animais do grupo Pringle e Total e que, o estado de choque hemorrágico, diferentemente da manobra de Pringle, foi o principal fator indutor do acúmulo de neutrófilos no íleo terminal e cólon sigmóide, pois, no grupo submetido unicamente a este tipo de agressão, grupo Choque, as contagens apresentaram valores mais elevados e diferiram significativamente dos demais grupos estudados. Durante o experimento morreram três animais (9,3%), dois no grupo Choque e um no grupo Pringle Ver menos
generalizada e resultar na insuficiência de múltiplos órgãos e sistemas. Nestes casos, o princípio do tratamento cirúrgico é sustar o sangramento pela oclusão temporária do ligamento hepatoduodenal, manobra descrita por Pringle em 1908 que, embora prática e eficaz, provoca isquemia total do fígado, podendo levar a alterações importantes na estrutura anatômica do órgão, piorando a fase de
reperfusão pela liberação de substâncias desencadeantes da resposta inflamatória e migração de neutrófilos para os tecidos à distância. Assim, o objetivo deste trabalho experimental foi estudar os efeitos da isquemia e reperfusão hepática total, em condições de normalidade e sob estado de choque hemorrágico controlado, no acúmulo de neutrófilos no intestino do rato. Um total de 32 ratos machos, adultos, da linhagem Wistar, foram randomizados em 4 grupos de oito animais cada: 1) Grupo Sham (anestesia +
laparotomia + observação por 60 min.); 2) Grupo Choque (anestesia + choque hemorrágico 20 min + reposição volêmica + reperfusão 60 min); Grupo Pringle (anestesia + isquemia hepática 15 mino + reperfusão 60 min.); Grupo Total (anestesia + choque hemorrágico 20 mino + reposição volêmica + isquemia hepática 15 mino + reperfusão60 min.). O estado de choque hemorrágico controlado foi obtido pela sangria, a intervalos regulares, de volumes equivalentes a 5% da volemia estimada até a obtenção da pressão arterial média igual a 40mmHg e, mantido por 20 minutos. A reposição volêmica foi efetuada com solução de Ringer lactato e sangue total (3: 1). A isquemia hepática total foi obtida pelo pinçamento do ligamento hepatoduodenal durante 15 minutos, seguida por reperfusão de 60 minutos. Das mostras sangüíneas, o lactato sérico e a reserva de base caracterizaram o estado de choque com baixa perfusão tecidual, sendo, então, os animais sacrificados por exsanguinação. Segmentos do íleo terminal e cólon sigmóide foram submetidos a
estudo histopatológico para a contagem de neutrófilos. Análises estatísticas foram processadas para caracterização do nível de
significância que foi estabelecido em 5%(p <; 0.005). Os resultados obtidos mostraram que a isquemia hepática total, seguida
de reperfusão, não induziu a um afluxo de neutrófilos para o intestino nos animais do grupo Pringle e Total e que, o estado de choque hemorrágico, diferentemente da manobra de Pringle, foi o principal fator indutor do acúmulo de neutrófilos no íleo terminal e cólon sigmóide, pois, no grupo submetido unicamente a este tipo de agressão, grupo Choque, as contagens apresentaram valores mais elevados e diferiram significativamente dos demais grupos estudados. Durante o experimento morreram três animais (9,3%), dois no grupo Choque e um no grupo Pringle Ver menos
Abstract: The trauma is one of the main causes of death on the population, ranking the third place if considered all ages and the first up to the age of 44. Among these causes, the liver represents the most frequently hit organ in abdominal trauma.This way, the patients victims of severe hepatic...
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Abstract: The trauma is one of the main causes of death on the population, ranking the third place if considered all ages and the first up to the age of 44. Among these causes, the liver represents the most frequently hit organ in abdominal trauma.This way, the patients victims of severe hepatic injuries, due to hemorrhagic shock, can evolve to a systemic inflammatory response syndrome
resultingin multiple organs and systems insufficiency. In these cases,the surgical treatment principie is to stop the bleeding by temporary portal triad occlusion, maneuver described by Pringle in 1908. Although practical and effective, this procedure provokes total ischemia of the tiver and may lead to important alterations on the anatomic structure of the organ, worsening the reperfusion phase by releasing substances that trigger the inflammatory response and migration of neutrophils to the distant tissues. This way, the objective of this experimental work was to study the effects of total hepatic ischemia and reperfusion, under normal conditions and under controlled hemorrhagic shock state, on the accumulation of neutrophils in the gut of rat. A total of 32 adult male Wistar rats, were divided into four groups of eight animaiseach. 1) Shamgroup (anesthesia+ laparotomy+ observationf or 60 min.); 2) Shock group (anesthesia+ hemorrhagicshock for 20 min.+ volemic resuscitation + reperfusion for 60 min.); Pringle group (anesthesia + hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.); 4) Total group (anesthesia + hemorrhagic shock for 20 min.+ volemic resuscitation+ hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.). The controlled hemorrhagic shock state was obtained by bleeding, on regular intervals, to equivalent volumes of 5% of the estimated blood volume until a mean arterial pressure of 40 mmHg was obtained, and maintained for 20 minutes. The volemic resuscitation done with lactated Ringer's solution and total blood (3: 1).
The total hepatic ischemia was obtained by portal triad clamping during 15 minutes followed by reperfusion for 60 minutes. Samples of blood were collected in ali of the phases and the dosages of serum Jactatelevels and base excess were used to characterize the state of shock with low tissue perfusion. The animais were sacrificed by bleeding to death. Segments of the distal ileum and sigmoid colon
were submitted to histologic studies for neutrophils counting. Statistical analysis was performedwith analysis of variance (ANOVA),
test of Student-Newman-Keulsand Chi-square. A value of p < 0.05 was considered to be significant. The results obtained show that the total hepatic ischemia for 15 minutes, followed by reperfusion for 60 minutes, did not prompt to a neutrophils influx to the
gut on the animais of groups Pringle and Total. Also, it demonstrated that, the state of hemorrhagic shock, differently from the Pringle maneuver, was the main inductor factor of neutrophils accumulation on the distal ileum and sigmoid colon, for the group submitted, exclusively, to this type of aggression (Shock group), the counting showed higher values, and differed significantly from the other studied groups. During the experiment three animais died (9,3%), being two on the Shock group,and one on the Pringle grou Ver menos
resultingin multiple organs and systems insufficiency. In these cases,the surgical treatment principie is to stop the bleeding by temporary portal triad occlusion, maneuver described by Pringle in 1908. Although practical and effective, this procedure provokes total ischemia of the tiver and may lead to important alterations on the anatomic structure of the organ, worsening the reperfusion phase by releasing substances that trigger the inflammatory response and migration of neutrophils to the distant tissues. This way, the objective of this experimental work was to study the effects of total hepatic ischemia and reperfusion, under normal conditions and under controlled hemorrhagic shock state, on the accumulation of neutrophils in the gut of rat. A total of 32 adult male Wistar rats, were divided into four groups of eight animaiseach. 1) Shamgroup (anesthesia+ laparotomy+ observationf or 60 min.); 2) Shock group (anesthesia+ hemorrhagicshock for 20 min.+ volemic resuscitation + reperfusion for 60 min.); Pringle group (anesthesia + hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.); 4) Total group (anesthesia + hemorrhagic shock for 20 min.+ volemic resuscitation+ hepatic ischemia for 15 min.+ reperfusion for 60 min.). The controlled hemorrhagic shock state was obtained by bleeding, on regular intervals, to equivalent volumes of 5% of the estimated blood volume until a mean arterial pressure of 40 mmHg was obtained, and maintained for 20 minutes. The volemic resuscitation done with lactated Ringer's solution and total blood (3: 1).
The total hepatic ischemia was obtained by portal triad clamping during 15 minutes followed by reperfusion for 60 minutes. Samples of blood were collected in ali of the phases and the dosages of serum Jactatelevels and base excess were used to characterize the state of shock with low tissue perfusion. The animais were sacrificed by bleeding to death. Segments of the distal ileum and sigmoid colon
were submitted to histologic studies for neutrophils counting. Statistical analysis was performedwith analysis of variance (ANOVA),
test of Student-Newman-Keulsand Chi-square. A value of p < 0.05 was considered to be significant. The results obtained show that the total hepatic ischemia for 15 minutes, followed by reperfusion for 60 minutes, did not prompt to a neutrophils influx to the
gut on the animais of groups Pringle and Total. Also, it demonstrated that, the state of hemorrhagic shock, differently from the Pringle maneuver, was the main inductor factor of neutrophils accumulation on the distal ileum and sigmoid colon, for the group submitted, exclusively, to this type of aggression (Shock group), the counting showed higher values, and differed significantly from the other studied groups. During the experiment three animais died (9,3%), being two on the Shock group,and one on the Pringle grou Ver menos
Isquemia e reperfusão hepatica total em condições de normalidade e sob estado de choque hemorragico controlado : efeitos no sequestro de neutrofilos no ileo terminal e colon sigmoide do rato
Mauro Jose Pantoja Fontelles
Isquemia e reperfusão hepatica total em condições de normalidade e sob estado de choque hemorragico controlado : efeitos no sequestro de neutrofilos no ileo terminal e colon sigmoide do rato
Mauro Jose Pantoja Fontelles
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