Resumo: O presente estudo teve por objetivo a análise molecular de 28 pacientes não relacionados, atendidos no Hemocentro-UNICAMP, portadores de Esferocitose Hereditária (EsH) diagnosticada a partir de dados clínicos, esfregaço de sangue periférico e curva de fragilidade osmótica. Na maioria destes casos, a quantificação das proteínas de membrana das hemácias através da densitometria de gel de políacrilamida-SDS corado pelo azul de Coomassie, detectou deficiência de espectrina e/ou anquirina. O rastreamento de mutações foi feito através de SSCP e confirmadas por sequenciamento. Duas novas mutações foram encontradas em nossa população, ambas tratando-se de substituição de um nucleotídeo com alteração do aminoácido. A primeira no exon 9 (His -> Arg, CAC->CGC) e a segunda no exon 28 (lle->Thr ATC->ACC), totalizando uma frequência de 7.2% de mutações no gene da anquirina na população com Esferocitose Hereditária estudada. Foram também encontrados dois novos polimorfismos: no exon 6 (codon 197, CCG ->CCA) e no exon 29 (codon 1162, AGT -> AGC), além de outros polimorfismos já descritos, no exon 4 (codon 105, AAT->AAC), no exon 16 (codon 594, TCC -> TC A), e no exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Foi ainda realizada a análise da expressão de RNAm do gene da anquirina através de SSCP. Um paciente apresentou defeito na transcrição de um dos alelos, conforme evidenciado pela análise da repetição de nucleotídeos AC na região 3' não transcrita. Assim nossos dados indicam que, diferente da literatura, mutações no gene da anquirina podem não ser frequente em todas as populações Ver menos

Abstract: In this study, we carried out the molecular analysis of 28 unrelated patients seen at the Hemocentro-UNICAMP with Hereditary Spherocytosis diagnosed by clinical data, peripheral blood smear and osmotic fragility test. Spectrin and/or ankyrin deficiency was detected in these patients, by densitometry of SDS-PAGE stained by Coomassie blue. By SSCP and DNA sequencing, two novel mutations were identified: In exon 9 (His ->Arg, CAC->CGC) and in exon 28 (lle-*Thr ATC->ACC) totalizing a frequency of 7,2% of ankyrin mutations in the Hereditary Spherocytosis population studied. Two novel polymorphisms were also observed: in exon 6 (codon 197,CCG ->CCA) and in exon 29 (codon 1162, AGT -" AGC), besides other polymorphisms already described in exon 4 (codon 105, AAT -> AAC), exon 16 (codon 594, TCC -> TCA), and exon 18 (codon 691, GGT -> GGC). Expression of ankyrin mRNA by SSCP-PCR of the AC repeat at the 3'ut region showed, in one patient, a defect in the transcription of one allele. Then, our data indicated that ankyrin defects might be not frequent in all populations Ver menos