Atividade do veneno de Lachesis muta muta sobre a resposta imune humoral a antigenos não relacionados
Marco Antonio Stephano
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP St43a
Campinas, SP : [s.n.], 2000.
92 p. : il.
Orientador : Osvaldo Augusto Sant'Anna
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Médicas
Resumo: Este trabalho objetivou identificar e demonstrar a razão dos baixos títulos neutralizantes da atividade letal, do soro antiveneno de Lachesis muta, produzido pelo Instituto Butantan. O veneno de Lachesis muta é responsável por 400 acidentes anuais no Brasil e o único tratamento,...
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Resumo: Este trabalho objetivou identificar e demonstrar a razão dos baixos títulos neutralizantes da atividade letal, do soro antiveneno de Lachesis muta, produzido pelo Instituto Butantan. O veneno de Lachesis muta é responsável por 400 acidentes anuais no Brasil e o único tratamento, comprovadamente eficaz, é a soroterapia com antiveneno específico. Os baixos títulos de anticorpos encontrados nos plasmas de equídeos levam a uma descontinuidade de produção ou a um produto com alta concentração de proteína. Estudaram-se também as possibilidades dos venenos de Bothrops jararaca e Crotalus durissus terrificus possuírem o mesmo efeito supressor. Na tentativa de elucidar a possível atividade imunossupressora do veneno de Lachesis muta, foram utilizados como modelo experimental, camundongos selecionados para boa resposta imune humoral (linhagens HQP) e um antígeno não relacionado, no caso o erítrócito de carneiro (EC). O teste de hemoaglutinação foi escolhido para se comparar o efeito do veneno de Lachesis muta na resposta imune a antígenos não relacionados. Grupos de animais receberam veneno de Lachesis muta 24h e 72h antes e concomitante ao EC. Após os primeiros ensaios, em que se verificou a presença de um fator que inibia a produção de anticorpos a um antígeno não relacionado e que este era dose-dependente, o veneno de Lachesis muta foi fracionado por cromatografia de gel filtração em Superdex® 75. Seis frações foram obtidas, porém as frações 4 e 5 apresentaram atividade imunossupressiva. Os venenos obtidos sem as frações 4 e 5 foram utilizados na imunização de equídeos e o título destes animais foi pelo menos, cinco vezes superior ao título obtido por animais imunizados com veneno total. Os resultados obtidos levam-nos às seguintes conclusões: o veneno de Lachesis muta muta apresenta um efeito imunossupressor parcial; pelo menos duas frações distintas apresentam esta atividade; a atividade imunossupressora é dose-dependente; as frações imunossupressoras quando removidas do veneno, faz com que este aumente em cinco vezes os títulos neutralizantes da atividade letal no plasma eqüino
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Abstract: In order to study the effect of Lachesis muta venom on the antibody response to unrelated antigens we first made an experimental analysis on mice genetically selected for high antibodies" production (HGP lines), to determine the effect of Lachesis muta venom on the anti-sheep erythrocytes...
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Abstract: In order to study the effect of Lachesis muta venom on the antibody response to unrelated antigens we first made an experimental analysis on mice genetically selected for high antibodies" production (HGP lines), to determine the effect of Lachesis muta venom on the anti-sheep erythrocytes (SE) response. Groups of mice received lOOug of venom in 0,5ml by intraperitoneal (ip) route 72, 24 hs before or simultaneously with 5 X 108 SE/0,5ml ip. In a second test, we repeated the same experiment as described above with B. jararaca and C. d. terrificus venoms using 18ug/0,5ml and 0,6ug/0,5ml respectively, in order to observe wether the inhibitory effect was present in venoms of other species. To elucidate if the depletory effect was present only in a particular venom fraction, around 120mg of Lachesis muta muta venom was applied to a Superdex® 75 column. Six fractions were studied for their biological activity and biochemical aspects (polyacrilamide gel electrophoresis). The results showed that in relation to the control groups (SE only) the total Lachesis muta venom promoted a clear, significant (P < 0.001) and persistent decrease in the anti-SE antibody response, mainly in the group that received venom 72hs before. The venoms of B. jararaca and C. d. terrificus did not show any inhibitory effect. After the chromatographic separation fraction 4 (molecular mass between 24 and 30 kDa) and 5 (molecular mass between 10 and 14 kDa) showed a significant supressive effect (P < 0.001 and P < 0.01 respectively). These data showed an inhibitory effect of Lachesis muta venom on an unrelated antigen. The activity is dose dependent and is present only in this species of Crotalidae family. The experiment with select mice has got subject to be applied in antivenom production. When horses were immunized with Lachesis muta venom without supressive frations, the sera were three times more effetive than the same sera from the horses which received total Lachesis muta venom
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