Perfil eletroforetico de proteinas intracelulares de Candida albicans isoladas da cavidade bucal e outros sitios anatomicos de humanos
Cristina Crespo Rodrigues
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP R618p
Piracicaba, SP : [s.n.], 2001.
79 p. : il.
Orientador: Jose Francisco Hofling
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Odontologia de Piracicaba
Resumo: Amostras de Cândida álbicans isoladas da cavidade oral e de diferentes sítios anatômicos de humanos, foram estudadas. O propósito da presente pesquisa foi analisar os graus de similaridade entre esses isolados, através da técnica de eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida,...
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Resumo: Amostras de Cândida álbicans isoladas da cavidade oral e de diferentes sítios anatômicos de humanos, foram estudadas. O propósito da presente pesquisa foi analisar os graus de similaridade entre esses isolados, através da técnica de eletroforese de proteínas totais em gel de poliacrilamida, em sistema descontínuo (SDS-PAGE). As amostras foram inoculadas em 50 mL de meio de cultura YPD. Decorrido o tempo de inoculação, as amostras foram centrifugadas a 3000 x g, por 5 minutos e os sedimentos obtidos foram ressuspensos em água destilada gelada, lavados e fracionados em alíquotas de 0,5 mL, os quais foram submetidos ao processo de extração de proteínas por nitrogênio líquido. Os extratos celulares foram submetidos à técnica de SDS-PAGE e após a corrida eletroforética os géis foram revelados e as bandas proteicas foram submetidas a análise computacional no pacote estatístico NTSYS-pc 1.70 empregando-se o programa QUALITATTVE e o coeficiente de similaridade &M(Simple Matching Coefficient). Essas matrizes de similaridade foram tratadas pelo algoritmo UPGMA, a qual gerou os dendrogramas que possibilitaram as análises dos graus de similaridade existentes entre os isolados de C. albicans. A análise dos perfis eletroforéticos de extratos proteicos de isolados de C. albicans da cavidade bucal e outros sítios anatômicos de humanos, originou diversos dendrogramas, o qual permitiu o agrupamento dos isolados em grupos representativos da espécie. As amostras de C. albicans, de um mesmo sítio anatômico, quando comparadas, apresentaram valores de similaridade acima de 80% (Ssm = 0,800), os quais suportam o agrupamento dentro de uma mesma espécie. As amostras de C. albicans em conjunto, envolvendo a linhagem-tipo CBS-562, juntamente com as 14 amostras analisadas (uma de cada sítio anatômico) escolhidas aleatoriamente, apresentaram um alto grau de coeficiente de similaridade, quando comparadas. A composição dos "clusters" presentes nos dendrogramas resultantes da análise dos perfis proteicos das diversas amostras analisadas, independeram dos fatores estudados, como sítios anatômicos e indivíduos
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Abstract: Samples of Candida albicans isolated from the human oral cavities and other anatomic sites, were studied. The purpose of the present research was to study the degree of similarity among these isolates through the whole-cell polyacrylamide gel electrophoresis technique (SDS-PAGE). The...
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Abstract: Samples of Candida albicans isolated from the human oral cavities and other anatomic sites, were studied. The purpose of the present research was to study the degree of similarity among these isolates through the whole-cell polyacrylamide gel electrophoresis technique (SDS-PAGE). The samples were inoculated in YPD culture medium, and after the incubation, they were centrifuged at 3,000 x g for 5 minutes, with the sediments were washed in cold distilled water and whole-cell proteins were extracted in liquid nitrogen. The cell extracts were submitted to SDS-PAGE technique and after the electrophoresis, the gels were revealed and the protein bands were submitted to computacional analysis on the NTSYS-pc 1.70 version statistical package applying the coefficient similarity SM (Simple Matching Coefficient). Those similarity matrices were treated by the UPGMA algorithm, allowing the analyses of similarity levels among C. albicans isolates by dendrograms. The eiectrophoretic analysis of the C. albicans proteins extracts isolated from oral cavities and others human anatomies sites, allowed the construction of dendrograms including clustering of isolates in representatives groups of species. Samples of C. albicans species of the same anatomic site showed similarity values up 80% (SSm = 0,800) supporting the species grouping. Whole sample of these organisms (all anatomic sites) selected randomly including the type-strain CBS-562 showed high similarity. The clusters composition expressed by the dendrograms of all the sample were not dependent of factor as: anatomic sites and studied persons
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Cristina Crespo Rodrigues
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