Distribuição da oxido nitrico sintase neuronal na junção neuromuscular de camundongos distroficos da linhagem mdx
Elaine Cristina Leite Pereira
DISSERTAÇÃO
Português
(Broch.)
T/UNICAMP P414d
Campinas, SP : [s.n.], 2000.
70f. : il.
Orientador: Maria Julia Marques
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Instituto de Biologia
Resumo: O objetivo do presente trabalho foi estudar a distribuição da óxido nítrico sintase na junção neuromuscular (JNM) de camundongos normais e da linhagem mdx usando um anticorpo específico contra a enzima óxido nítrico sintase neuronal (anti-nNOS) e verificar possíveis alterações na expressão...
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Resumo: O objetivo do presente trabalho foi estudar a distribuição da óxido nítrico sintase na junção neuromuscular (JNM) de camundongos normais e da linhagem mdx usando um anticorpo específico contra a enzima óxido nítrico sintase neuronal (anti-nNOS) e verificar possíveis alterações na expressão desta enzima nos músculos dos camundongos distróficos da linhagem mdx. Os músculos estemomastóide de camundongos adultos das linhagens mdx e C57BL/IO foram marcados com rodamina-a-bungarotoxina para observação dos receptores de acetilcolina (AChRs) e com anticorpo primário monoclonal anti-nNOS para localização da nNOS. A microscopia confocal de tluorescência demostrou que a nNOS estava localizada no sarcolema dos músculos esqueléticos de camundongos normais e mdx. Na JNM a nNOS foi detectada na região pré-sináptica, cobrindo os braços dos AChRs. Nos animais mdx, a expressão da nNOS estava reduzida no sarcolema e na região pré-sináptica. Em músculos controles desnervados, a nNOS continuou presente na região pré-sináptica e no sarcolema. Não foram observadas alteraçães qualitativas na expressão da enzima nos músculos desnervados. Esses resultados mostram que a nNOS está presente na região pré sináptica da JNM, provavelmente nas células de Schwann terminais e que a expressão da nNOS na JNM dos animais mdx está diminuída. A associação entre a nNOS e componentes juncionais, tais como as células de Schwann terminais, pode abrir novas perspectivas nos estudos da biologia dos músculos distróficos
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Abstract: The airn of the present investigation was to study the distribution of nitric oxide synthase at the neuromuscular junction (NMJ) of mdx and normais animaIs by using a specific antibody against the neuronal isoform of nitric oxide synthase (nNOS) and verify whether nNOS expression was...
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Abstract: The airn of the present investigation was to study the distribution of nitric oxide synthase at the neuromuscular junction (NMJ) of mdx and normais animaIs by using a specific antibody against the neuronal isoform of nitric oxide synthase (nNOS) and verify whether nNOS expression was altered in dystrophic skeletaI muscle of mdx mice. Stemomastoid muscles of adult mdx and C57BL/IO mice were labened with rhodamin-a.-bungarotoxin for acetylcholine receptors (AChRs) detection and with anti-nNOS for nNOS observation. Fluorescence confocal microscopy demonstrated that nNOS immunoreactivity was mainly localized at the sarcolemma of normal and dystrophin-deficient skeletal muscles ftom mdx mice. At the NMJ, immunostaining was detected at the pre-synaptic region covering AChRs. In mdx animaIs, nNOS expression was greatly reduced in both sarcolemma and the pre-synaptic region. In controls denervated muscles, nNOS immunostaining was still present at the pre-synaptic region and at the sarcolemma. No qualitative changes in nNOS expression were observed in denervated muscles. These results show that nNOS is expressed at the pre-synaptic region of the NMJ, probably by terminal Schwann cens and that in muscles of mdx animaIs the junctional nNOS expression is also reduced. The association between nNOS and neuromuscular junction components, such as terminal Schwann cens, may open new perspectives to the better understanding of the biology of dystrophic muscles
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Distribuição da oxido nitrico sintase neuronal na junção neuromuscular de camundongos distroficos da linhagem mdx
Elaine Cristina Leite Pereira
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