Resumo: A transecção de um nervo periférico em ratos recém nascidos leva à extensa morte dos neurônios axotomizados. Neste estudo, demonstramos que a transecção do nervo ciático em ratos neonatos induz a TUNEL (terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labelling) marcação de motoneurônios e de neurônios sensitivos dos gânglios dorsais, indicando que mecanismos apoptóticos estão envolvidos. Tais resultados foram comprovados pelas observações à microscopia eletrônica. Interessantemente, observamos também um grande aumento da TUNEL marcação nos interneurônios localizados nas lâminas mais profundas da coluna dorsal. Esta localização sugere que para a sobrevivência dos interneurônios, tanto a integridade das aferências sensitivas como dos motoneurônios, suas prováveis células alvo, é essencial. No intuito de melhor compreender a importância relativa da perda do alvo (motoneurônios) e da aferência (neurônios sensitivos) sobre a indução da apoptose em interneurônios, foram comparados os padrões temporais e espaciais do aparecimento das células apoptóticas na medula e nos gânglios espinhais após a transecção do nervo ciático em ratos recém nascidos (P2). Os padrões temporais da TUNEL marcação dos motoneurônios e interneurônios induzidos pela lesão foram semelhantes (pico entre 8-48 horas após a lesão), enquanto que a marcação dos neurônios sensitivos ocorreu mais tardiamente (24-72 horas). Por outro lado, sabe-se que a morte dos motoneurônios e neurônios sensitivos, resultante da axotomia, pode dever-se à ausência de fatores neurotróficos devido à perda do contato com as células alvo. Assim, estudamos também, os efeitos do tratamento do coto proximal do nervo lesado com CNTF e NGF, utilizados para impedir a morte dos motoneurônios e neurônios sensitivos respectivamente. Tanto o NGF quanto o CNTF promoveram uma diminuição na TlJNEL marcação dos interneurônios. Contudo, o CNTF resgatou preferencialmente interneurônios nas lâminas mais profundas das colunas dorsais e nas ventrais, enquanto que o NGF foi mais eficaz nas lâminas superficiais. Os resultados obtidos dão suporte à hipótese de que os interneurônios medulares, no neonato, são dependentes tanto do alvo quanto da aferência para sua sobrevivência Ver menos

Abstract: Transection of a peripheral nerve in neonatal rats induces an extensive death of axotomized neurons. We demonstrate here that spinal motoneurons and sensory dorsal root ganglia neurons become TUNEL-labeled (tenninal deoxynuc1eotidyl transferase dUTP nick end labelling) afier sciatic nerve transection in neonatal rats, thus indicating that apoptotic mechanisms are involved in the death processo Interestingly, there is also a profound increase of TUNEL-labeled intemeurons in the deep dorsal hom. This location suggests that an intact afferent input andJor contact with target organs are essential for intemeuronal survival. Death of motoneurons and sensory neurons could be a result of the injury per se and/or the deprivation of neurotrophic substances, secondary to the loss of contact with target cells. In order to defrne the relative importance of the loss of a potential target (motoneuron) and a potential afferent input (dorsal root ganglion cell) for the induction of apoptosis in intemeurons in this situation, we have compared the distributions and time courses for TUNEL labeling in the L5 segment ofthe spinal cord and the L5 dorsal root ganglion afier sciatic nerve transection in the neonatal (P2) rat. ln additional experiments were studied the effects on TUNEL labeling of intemeurons afier treatment of the cut sciatic nerve with either ciliary neurotrophic factor (CNTF), in order to rescue motoneurons, or nerve growth factor (NGF) to rescue dorsal root ganglion cells. The time courses of the TUNEL labeling in motoneurons and intemeurons induced by the lesion show large similarities (peak at 8-48h postoperatively), while the labeling in dorsal root ganglion cells occurs later (24-72h). Both CNTF and NGF decrease the number of TUNEL labeled intemeurons, but there is a regional difference, in that CNTF preferentially saves intemeurons in deep dorsal and ventral parts of the spinal cord, while rescuing effects of NGF are mainly seen in the superficial dorsal hom. The results are interpreted as signs of a trophic dependence on both the target and the afferent input for the survival of intemeurons neonatally Ver menos