Resumo: O tabagismo é um fator de risco significativo para o desenvolvimento e agravamento da periodontite. Embora evidências demonstrem a redução dos níveis de superóxido dismutase (SOD) no fluido crevicular gengival de fumantes, os mecanismos biológicos subjacentes permanecem pouco compreendidos. Visto que as SODs regulam os níveis de espécies reativas de oxigênio (EROs) dentro e fora das células este estudo avaliou, in vitro, o impacto do condensado de fumaça de cigarro na expressão de SODs e na modulação do estresse oxidativo em fibroblastos gengivais (GF). O condensado de fumaça de cigarro (CSE) foi coletado e padronizado utilizando cromatografia líquida de alta eficiência (CLAE). A viabilidade celular foi avaliada por meio do ensaio de MTT, estabelecendo concentrações de CSE que não comprometessem a viabilidade celular. Fibroblastos gengivais foram expostos ao CSE (20 e 40 µM) e à nicotina pura (100 µM) por três dias. A expressão dos genes SOD1 (Superóxido dismutase 1), PTEN (Fosfatase Tensina, AKT (Proteína quinase B) e PI3K (fosfatidilinositol-4,5-bisfosfato 3-quinase, subunidade catalítica alfa) foi analisada por RT-qPCR, demonstrando redução significativa em comparação ao controle e à nicotina isolada. A análise da IL-6 revelou uma resposta reduzida, sugerindo um efeito pró-inflamatório hiporresponsivo em fumantes. Adicionalmente, a produção de espécies reativas de oxigênio (EROs) foi avaliada qualitativamente pela incubação com DCFDA, seguida de análise por microscopia confocal. O CSE promoveu a redução na expressão de moléculas essenciais para a homeostase redox, proliferação e manutenção celular, favorecendo um estado de estresse oxidativo elevado em modelo in vitro. Esses achados podem contribuir com elucidação dos mecanismos relacionados aos danos aos tecidos periodontais saudáveis em indivíduos fumantes, mesmo na ausência de sinais clínicos de doença periodontal Ver menos

Abstract: Smoking is a significant risk factor for the development and exacerbation of periodontitis. Although evidence shows a reduction in superoxide dismutase (SOD) levels in the gingival crevicular fluid of smokers, the underlying biological mechanisms remain poorly understood. Since SODs regulate reactive oxygen species (ROS) levels both inside and outside cells, this study aimed to assess, in vitro, the impact of cigarette smoke condensate (CSE) on SOD expression and the modulation of oxidative stress in gingival fibroblasts (GF). CSE was collected and standardized using high-performance liquid chromatography (HPLC). Cell viability was evaluated by the MTT assay, establishing CSE concentrations that did not compromise cell viability. Gingival fibroblasts were exposed to CSE (20 and 40 µM) and pure nicotine (100 µM) for three days. The expression of SOD1 (Superoxide Dismutase 1), PTEN (Phosphatase and Tensin Homolog), AKT (Protein Kinase B), and PI3K (Phosphoinositide 3-Kinase, Catalytic Subunit Alpha) genes was analyzed by RT-qPCR, revealing a significant reduction compared to the control and nicotine alone. IL-6 analysis showed a diminished response, suggesting a hyporesponsive pro-inflammatory effect in smokers. Additionally, ROS production was qualitatively assessed by incubation with DCFDA, followed by confocal microscopy analysis. CSE induced a reduction in the expression of molecules essential for redox homeostasis, cell proliferation, and maintenance, favoring a state of elevated oxidative stress in the in vitro model. These findings may contribute to the understanding of mechanisms related to damage in periodontal tissues in smokers, even in the absence of clinical signs of periodontal disease Ver menos