Resumo: ntrodução: A nefropatia membranosa (NM) é uma das principais causas de síndrome nefrótica no mundo, caracterizada pela formação de depósitos imunes na base dos podócitos e espessamento da membrana basal glomerular (MBG). Em sua forma primária (NMP), é considerada doença autoimune desde a descrição do receptor de fosfolipase A2 (PLA2R), antígeno podocitário presente em 70% dos casos e contra o qual é formada uma imunoglobulina G (IgG), predominantemente da subclasse IgG4. Nas formas secundárias, outros antígenos costumam estar presentes. Objetivo Principal: Pesquisar a presença do antígeno PLA2R em tecido renal e o anticorpo anti-PLA2R em soro de pacientes com NM. Objetivo Secundário: Avaliar expressão de PLA2R em tecido renal e presença do anticorpo anti-PLA2R no soro de pacientes acometidos e controles e correlacionar com dados clínicos como creatinina sérica, albumina sérica e proteinúria. Materiais e Métodos: Retrospectivamente, foram avaliados dados clínicos e tecido renal para pesquisa do PLA2R por meio de imunohistoquímica (IH) em pacientes com NM, diagnosticados entre janeiro de 2006 e dezembro de 2020. Prospectivamente, foi realizada coleta de soro seriada trimestralmente durante 12 meses de subgrupo de pacientes em seguimento atual no serviço, entre janeiro de 2020 e dezembro de 2021, para pesquisa do anti-PLA2R circulante por meio da técnica de ELISA (Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay). Grupo controle incluiu pacientes com NM secundária ao lúpus eritematoso sistêmico (LES), com outras glomerulopatias proteinúricas e pacientes hígidos. Neste subgrupo, foi pesquisada reatividade de IgG4 sérica contra antígenos podocitários utilizando linhagem de podócitos CIHP1 (Conditionally immortalized human podocytes-1) por meio de IH. Resultados: Foi avaliada expressão do PLA2R por IH em tecido renal de 50 pacientes, presente em 80% dos casos com NMP. Não houve diferenças nos dados clínicos entre pacientes com PLA2R presente ou ausente. Não houve expressão do PLA2R em pacientes com NM secundária ou com outras glomerulopatias. Subgrupo de oito pacientes com NMP tiveram análise seriada do anti-PLA2R por ELISA, sendo que os títulos do anticorpo se correlacionaram negativamente com albumina sérica e positivamente com proteinúria, tanto na análise global (ambos com p < 0,0001), quanto na subanálise com indivíduos anti-PLA2R presente versus ausente (p < 0,0001 e p = 0,0003, respectivamente). Não houve diferença com relação à função renal. A pesquisa de IgG4 sérica contra antígenos podocitários teve resultados divergentes da pesquisa de IgG total pelo ELISA, com possivelmente reatividade contra outros antígenos, visto que não foi identificada expressão do PLA2R nos podócitos in vitro. Discussão e conclusão: Neste estudo, foi corroborada a elevada sensibilidade e especificidade do PLA2R na NMP e a correlação dos títulos do anticorpo com dados clínicos, como albumina sérica e proteinúria. Não foi possível estabelecer associações entre anticorpo e tratamento nesse grupo, por se tratar de pacientes tratados. Entretanto, já está bem estabelecido que a pesquisa da expressão do antígeno PLA2R em tecido renal e a quantificação de anticorpo circulante anti-PLA2R são imprescindíveis no diagnóstico, avaliação prognóstica e condução terapêutica de pacientes com NM. A pesquisa de IgG4 sérica contra antígenos podocitários não foi uma técnica útil nos pacientes com NMP Ver menos

Abstract: Introduction: Membranous nephropathy (MN) is one of the main causes of nephrotic syndrome worldwide, characterized by immune deposit formation at the base of podocytes and thickening of the glomerular basement membrane (GBM). Its primary form (PMN) is considered an autoimmune disease since the phospholipase A2 receptor (PLA2R) description, a podocyte antigen present in 70% of cases and against which an immunoglobulin G (IgG) is formed, predominantly of the IgG4 subclass. In secondary forms, other antigens are often present. Objective: Investigate the presence of the PLA2R antigen in kidney tissue and the serum anti-PLA2R antibody of patients with NM. Secondary Objective: Evaluate PLA2R expression in renal tissue and the presence of anti-PLA2R antibodies in the serum of affected patients and controls and correlate with clinical data such as serum creatinine, serum albumin and proteinuria. Materials and Methods: Retrospectively, clinical data and kidney tissue for PLA2R research using immunohistochemistry (IH) were evaluated in patients with NM, diagnosed between January 2006 and December 2020. Prospectively, serial sera collection were performed every three months for 12 months of a subgroup of patients in current follow-up at the service, between January 2020 and December 2021, to investigate circulating anti-PLA2R using the ELISA (Enzyme-Linked ImmunoSorbent Assay) technique. Control group included patients with MN secondary to systemic lupus erythematosus (SLE), with other proteinuric glomerulopathies and healthy patients. In this subgroup, serum IgG4 reactivity against podocyte antigens was investigated using the podocyte line CIHP1 (Conditionally immortalized human podocytes-1) through IH. Results: PLA2R expression was evaluated by IH in kidney tissue from 50 patients, present in 80% of cases with PMN. There were no differences in clinical data between patients with PLA2R present or absent. There was no expression of PLA2R in patients with secondary MN or other glomerulopathies. A subgroup of eight patients with PMN had serial analysis of anti-PLA2R by ELISA, and the antibody titers correlated negatively with serum albumin and positively with proteinuria, both in the global analysis (p < 0.0001) and in the subanalysis with anti-PLA2R individuals present versus absent (p < 0.0001 and p = 0.0003, respectively). There was no difference to renal function. The serum IgG4 test against podocyte antigens had divergent results from the total IgG test by ELISA, with possible reactivity directed to other antigens, since no PLA2R expression was identified in podocytes in vitro. Discussion and conclusion: In this study, the high sensitivity and specificity of PLA2R in PMN and the correlation of antibody titers with clinical data, such as serum albumin and proteinuria, were corroborated. It was not possible to make associations with treatment in this group, as they were treated patients. However, it is well established that the expression of the PLA2R antigen in renal tissue and the quantification of circulating anti-PLA2R antibodies are essential in the diagnosis, prognostic assessment, and therapeutic management of patients with MN. Serum IgG4 testing against podocyte antigens was not a useful technique for patients with PMN Ver menos