Resumo: Os derivados da Cannabis têm uma história de mais de 5.000 anos de consumo para fins medicinais, recreativos e espirituais em todo o mundo. Atualmente, distinguir entre diferentes padrões de utilização de canabinoides requer o uso de métodos analíticos específicos e sensíveis. A análise quantitativa destes compostos em fluido oral está emergindo como um campo de interesse crescente em toxicologia analítica. O fluido oral ganhou reconhecimento na última década como uma matriz biológica alternativa para detecção de drogas em ambientes forenses e clínicos. Sua coleta de amostras é simples, não invasiva e de fácil observação, além de oferecer resistência a adulterações. Esta matriz elimina a necessidade de instalações de recolha especializadas ou de coletores do mesmo sexo. Este trabalho tem o potencial de melhorar significativamente a avaliação clínica e forense, oferecendo uma ferramenta robusta para detectar e monitorar o consumo de canabinoides. O objetivo desta pesquisa foi desenvolver e validar um método analítico para detecção e quantificação de canabidiol (CBD), ?9-tetrahidrocanabinol (THC), e seus respectivos produtos de biotransformação 7-hidroxicanabidiol (7-OH-CBD), 7-carboxi-canabidiol (7-COOH-CBD), 11-hidroxi-?9- tetrahidrocanabinol (11-OH-THC), 11-nor-9-carboxi-?9-tetrahidrocanabinol (THC-COOH) e canabinol (CBN) em fluido oral usando cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas sequencial (LC-MS/MS). A extração da amostra foi realizada de uma solução de 500 ?L de tampão de eluição de fluido oral-Quantisal® fortificado com 50 ?L da solução de trabalho contendo o padrão interno (CBD-d3 e THC-d3 a 500 ng/mL), juntamente com 500 ?L de solução saturada de tetraborato de sódio e 2 mL de éter metil terc-butílico. As amostras foram agitadas em vórtice por 30 s e depois centrifugadas a 4500 rpm por 5 min. Posteriormente, 1700 µL do extrato foram transferidos para frascos e submetidos à secagem em TurboVap por aproximadamente 15 minutos. A ressuspensão foi realizada utilizando 100 µL de acetonitrila. A separação cromatográfica ocorreu em coluna bifenil Raptor® (100 × 2,1 mm, 2,7 ?m). O método apresentou linearidade na faixa de concentração de 0,5 a 200 ng/mL para todos os analitos, exceto para o CBN, que apresentou 0,5 a 100 ng/mL. A curva de calibração demonstrou linearidade robusta, com o coeficiente de variação para cada concentração não ultrapassando 10%. Os limites de detecção foram estabelecidos em 0,5 ng/mL para todos os analitos, valor sensível para detecção em amostras autênticas de fluido oral. Esta abordagem tem um potencial significativo para aplicações mais amplas em ciência analítica, apresentando notável eficiência em termos de baixo volume de amostra e limites de detecção Ver menos

Abstract: Cannabis derivatives have a history of more than 5,000 years of consumption for medicinal, recreational and spiritual purposes around the world. Currently, distinguishing between different patterns of cannabinoid utilization requires the use of specific and sensitive analytical methods. Quantitative analysis of these compounds in oral fluid is emerging as a growing field of interest in analytical toxicology. Oral fluid has gained recognition over the past decade as an alternative biological matrix for drug detection in forensic and clinical settings. Sample collection is simple, non-invasive and easy to observe, in addition to offering resistance to tampering. This matrix eliminates the need for specialized collection facilities or same-sex collectors. This work has the potential to significantly improve clinical and forensic assessment by offering a robust tool to detect and monitor cannabinoid consumption. The objective of this research was to develop and validate an analytical method for detection and quantification of cannabidiol (CBD), ?9-tetrahydrocannabinol (THC), and their respective biotransformation products 7-hydroxycannabidiol (7-OH-CBD), 7-carboxy-cannabidiol (7-COOH-CBD), 11-hydroxy-?9-tetrahydrocannabinol (11-OH-THC), 11-nor-9-carboxy-?9-tetrahydrocannabinol (THC-COOH) and cannabinol (CBN) in oral fluid using liquid chromatography coupled to sequential mass spectrometry (LC-MS/MS). Sample extraction was performed from a solution of 500 ?L of oral fluid elution buffer-Quantisal TM fortified with 50 ?L of the working solution containing the internal standard (CBD-d3 and THC-d3 at 500 ng/mL), together with 500 ?L of saturated sodium tetraborate solution and 2 mL of methyl tert-butyl ether. Samples were vortexed for 30 s and then centrifuged at 4500 rpm for 5 min. Subsequently, 1700 µL of the extract was transferred to vials and dried in a TurboVap for approximately 15 minutes. Resuspension was performed using 100 µL of acetonitrile. Chromatographic separation occurred on a RaptorTM biphenyl column (100 × 2.1 mm, 2.7 ?m). The method showed linearity in the concentration range of 0.5 to 200 ng/mL for all analytes, except for CBN, which showed 0.5 to 100 ng/mL. The calibration curve demonstrated robust linearity, with the coefficient of variation for each concentration not exceeding 10%. Detection limits were set at 0.5 ng/mL for all analytes, a sensitive value for detection in authentic oral fluid samples. This approach has significant potential for broader applications in analytical science, featuring remarkable efficiency in terms of low sample volume and detection limits Ver menos