Resumo: Desde os anos 90, o câncer de mama é a neoplasia sólida mais frequente entre as mulheres no mundo todo, sendo a segunda causa de morte mais comum por câncer, neste grupo. A doxorrubicina (DOX) é um antibiótico antineoplásico do grupo das antraciclinas amplamente utilizada no tratamento do câncer de mama e com significativa atividade contra tumores refratários a outros fármacos. Outra terapêutica que tem sido explorada em oncologia é a terapia fotodinâmica (TFD), na qual uma reação fotoquímica causa destruição seletiva de um tecido, após irradiação de um agente fotossensibilizador. Os carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) são nanopartículas constituídas por uma mistura de lipídios (sólido e líquido) e estabilizadas por um tensoativo. CLN são eficientes para encapsular moléculas pouco solúveis em água, como a DOX e fotossensibilizadores como a ftalocianina de cloro-alumínio (FtClAl). A presente pesquisa teve como objetivo o desenvolvimento de formulação otimizada de carreadores lipídicos nanoestruturados contendo o quimioterápico DOX e o fotossensibilizador FtClAl, visando tratamento do câncer de mama. Formulações foram preparadas por planejamento experimental para escolha daquela otimizada (CLNDOX/FtClAl) e seus controles: (CLNDOX, CLNFtClAl, CLNCTL) que foram caracterizadas quanto ao tamanho, índices de polidispersão (PDI e Span), potencial Zeta (PZ) número de nanopartículas em suspensão, pH, por espectroscopia no infravermelho e criomicroscopia eletrônica. A formulação otimizada apresentou população monodispersa (PDI de 0,16 ± 0,03 e Span de 0,55) de partículas com diâmetro médio de 160,8 ± 1,9 nm, PZ de -27,0 ± 0,9 mV, concentração de 5,30 ± 0,01 x 1013/mL e pH médio de 5,30 ± 0,01, morfologia esférica e estabilidade de prateleira de 12 meses, quando armazenada sob refrigeração (2-8ºC) ou temperatura ambiente (25ºC). Posteriormente, foi realizado o estudo in vitro para avaliação da citotoxicidade das nanoformulações, em duas linhagens de adenocarcinoma mamário: murino (4T1) e humano (MCF-7), além de fibroblastos murinos normais (NIH/3T3), pelo método de MTT e análise morfológica das células pós-tratamento, por microscopia de fluorescência e contraste de fase. Nestes testes também foi avaliada a potência do LED de 660 nm (9 e 18 J/cm²) usado para aplicação da TFD. Os resultados dos ensaios de viabilidade celular mostraram que CLNFtClAl foi tóxica para ambas as linhagens de câncer de mama testadas, efeito exacerbado após irradiação. Neste trabalho foi desenvolvida uma formulação de base nanotecnológica, contendo um quimioterápico e um fotossensibilizador, que se mostrou estável e eficiente, com grande potencial para o tratamento do câncer de mama Ver menos

Abstract: Since the 1990s, breast cancer has been the most frequent solid neoplasm among women, worldwide, being the second most common cause of death from cancer in this group. Doxorubicin (DOX) is an antineoplastic antibiotic from the anthracycline group widely used in the treatment of breast cancer and with significant activity against tumors refractory to other drugs. Photodynamic therapy (PDT) is another treatment explored in oncology, in which a photochemical reaction causes selective destruction of a tissue, after irradiation of a photosensitizing agent. Nanostructured lipid carriers (NLC) are nanoparticles made up of a mixture of lipids (solid and liquid) and stabilized by a surfactant. These nanoparticles are efficient carriers for molecules that are poorly soluble in water, such as DOX and photosensitizer chloro-aluminum phthalocyanine (PcAlCl). The present research aimed to develop an optimized formulation of nanostructured lipid carriers containing the antineoplastic DOX and the photosensitizer PcAlCl, aiming the treatment of breast cancer. Formulations were prepared by experimental design and the optimized one (NLCDOX/PcAlCl) and its control (NLCDOX, NLCFtClAl, NLCCTL) were characterized regarding size, polydispersity indexes (PDI, Span), Zeta potential (ZP), number of nanoparticles in suspension, pH, by infrared spectroscopy and electron cryomicroscopy. The optimized formulation showed a monodisperse population (PDI = 0.164 ± 0.03; Span index = 0.554) of particles with an average diameter of 160.8 ± 1.9 nm, ZP = -27.0 ± 0.9 mV, 5.30 ± 0.01 x 1013 nanoparticles/mL and a pH of 5.30 ± 0.01. The NLC showed a spherical morphology, and 12 months shelf-stability, under refrigeration (2-8ºC) or at room temperature (25ºC). Subsequently, an in vitro study to evaluate the cytotoxicity of the nanoparticles was carried with two mammary adenocarcinoma lineages, from mice (4T1), and human (MCF-7) as well as in normal murine fibroblasts (NIH/3T3), by the MTT test and (fluorescence microscopy and phase-contrast) morphological analyses of post-treatment cells. In these tests, the power (9 and 18 J/cm2) of the 660 nm LED used for PDT application was also evaluated. Cell viability assays showed that CLNPcAlCl was toxic against the two cancer cell lines tested, and even more after irradiation. This work reports the development of a stable nanotechnological formulation that, carrying a chemotherapeutic agent and a photosensitizer, was found efficient and with a potential for the in vivo treatment of breast cancer Ver menos