Resumo: A cárie é uma doença infectocontagiosa de carater multifatorial que pode acarretar danos severos a polpa dentária. Lesões profundas de cárie podem resultar em um aumento significativo na densidade dos vasos sanguíneos, inflamação pulpar e consequentemente, em uma pulpite irreversível (PI). Além disso, a dor de origem pulpar é frequentemente relatado nestes casos, o cortisol é considerado um biomarcador preciso em pesquisas para medir estas condições. Bactérias Gram-positivas são normalmente encontradas nestas situações e apresentam um componente em sua parede celular conhecido como ácido lipoteicóico – LTA. No caso das Bactérias Gram-negativas, seu principal componente celular é o lipopolissacarídeo (LPS), conhecido como uma endotoxina capaz de realizar destruição tecidual indireta através de diferentes mediadores químicos. Leveduras do gênero Candida também estão presentes no grupo de microrganismos associados à formação de biofilmes na cavidade oral. Este estudo teve como objetivo: 1) Avaliar por métodos moleculares a presença de espécies bacterianas e fúngicas, presentes na pulpite irreversivel sintomática. 2) Monitorar os níveis de LPS, LTA e cortisol. Foram coletadas 10 amostras de cárie (C1), iniciais (C2), pós preparo químico mecânico (C3) e pós medicação intracanal(C4) de pacientes com diagnóstico de PI e 10 amostras iniciais, pós preparo químico mecânico e pós medicação intracanal do grupo controle constituido de polpas normais(PN). A quantificação de ácido lipoteicóico (LTA) e endotoxinas (LPS) foi realizada respectivamente, pelos métodos do ensaio imunoenzimático (Enzyme-Linked immunosorbent Assay- ELISA) e método turbidimétrico (LAL Pyrogent 5000). Além disso, também foram analisados os níveis de cortisol através do teste de ELISA. Após a realização e processamento dos dados, estes foram tabulados e a análise estatística relizada com nível de significância de 5% (p<0,05). Os resultados, em relação ao grupo PI, mostraram que bactérias e fungos foram detectados em 100% nas coletas C1 e C2 através do Nested PCR. As espécies mais encontradas nas coletas de cárie foram, Candida glabrata, Porphyromonas gingivalis, Prevotella nigrescens, Candida tropicalis e Candida dubliniensis. Nas coletas iniciais (C2), as espécies mais prevalentes foram Enterococcus faecalis, Prevotella nigrescens, Candida tropicalis e Candida dubliniensis. Associações estatisticamente significantes entre bactérias específicas em conjunto no interior do canal radicular foram encontradas (p<0,05). Níveis de cortisol nas amostras iniciais foram superiores (2,96±1,18 µg/dL) quando comparado entre preparo químico-mecânico e medicação intracanal que não reveleram diferença estatística entre os grupos. Em relação aos níveis de LPS e LTA,observou-se diferença significativa (p<0.05) entre C2 e C3. Concluiu-se dentes com PI apresentam microbiota diversificado com redução nos níveis de LPS e LTA pós-PQM. No caso de dentes com Polpa Vital Normal (PN) não foi identificado bactérias e fungos específicos, porém detectou-se níveis inferiores de LPS, LTA e cortisol quando comparado com a pulpite irreversível Ver menos

Abstract: Caries is a multifactorial infectious disease that can cause severe damage to the dental pulp. Deep carious lesions can result in a significant increase in the density of blood vessels, pulpal inflammation and, consequently, irreversible pulpitis. In addition, pulpal pain is often reported in these cases, cortisol is considered an accurate biomarker in research to measure these conditions. Gram-positive bacteria are normally found in these situations and have a component in their cell wall known as lipoteichoic acid – LTA. The Gram-negative bacteria have the main cellular component denominated lipopolysaccharide (LPS), known as an endotoxin capable of indirect tissue destruction through different chemical mediators. Yeasts of the genus Candida are also present in the group of microorganisms associated with the formation of biofilms in the oral cavity. This project aimed to 1) Analyze and quantify the different microbial, bacterial and fungal types present in symptomatic irreversible pulpitis through molecular methods; 2) Monitor LPS, LTA and cortisol levels. 10 caries samples were collected (C1), initial (C2), after mechanical chemical preparation(C3) and after intracanal medication (C4) from patients diagnosed with irreversible pulpitis (IP) and 10 initial samples, after mechanical chemical preparation and after intracanal medication from the control group consisting of normal pulps (NP). The quantification of lipoteichoic acid (LTA) and endotoxins (LPS) was performed, respectively, by immunoenzymatic assay methods (Enzyme-Linked immunosorbent Assay-ELISA) and the turbidimetric method (LAL Pyrogent 5000). In addition, cortisol levels were also analyzed using the test of ELISA. After the realization and processing of the data, these were tabulated, and the statistical analysis performed. The significance level was set at 5% (P < 0.05). The results, in relation to the PI group, showed that bacteria and fungi were detected in 100% of the C1 and C2 collections through Nested PCR. The most common species found in caries samples were Candida glabrata, Porphyromonas gingivalis, Prevotella nigrescens, Candida tropicalis and Candida dubliniensis. In the initial collections (C2), the most prevalent species were Enterococcus faecalis, Prevotella nigrescens, Candida tropicalis and Candida dubliniensis. Statistically significant associations between specific bacteria together within the root canal were found (p<0.05). Cortisol levels in the initial samples were higher (2.96±1.18 µg/dL) when compared between chemical-mechanical preparation and intracanal medication, which did not reveal statistical difference between groups. Regarding LPS and LTA levels, there was a significant difference (p<0.05) between C2 and C3. It was concluded that teeth with PI have a diversified microbiota with a reduction in post-PQM LPS and LTA levels. In teeth with Normal Vital Pulp (NP), specific bacteria and fungi were not identified, but lower levels of LPS, LTA and cortisol were detected when compared to irreversible pulpitis Ver menos