Atividade antifúngica de óleos essenciais frente a fungos dematiáceos [recurso eletrônico]
Milena Binatti Ferreira
DISSERTAÇÃO
Português
T/UNICAMP F413a
[Antifungal activity of essential oils against dematiaceous fungi]
Campinas, SP : [s.n.], 2023.
1 recurso online (84p.) : il., digital, arquivo PDF.
Orientador: Derlene Attili de Angelis
Dissertação (mestrado) - Universidade Estadual de Campinas, Faculdade de Ciências Farmacêuticas
Resumo: Fungos dematiáceos são encontrados em todos os ambientes desempenhando diversas atividades, inclusive como oportunistas e patógenos humano e animal, papel esse favorecido pela presença de melanina na parede celular, relacionada com a capacidade de provocar micoses tópicas ou sistêmicas....
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Resumo: Fungos dematiáceos são encontrados em todos os ambientes desempenhando diversas atividades, inclusive como oportunistas e patógenos humano e animal, papel esse favorecido pela presença de melanina na parede celular, relacionada com a capacidade de provocar micoses tópicas ou sistêmicas. Antifúngicos sintéticos são utilizados como terapêuticos, porém com as desvantagens de apresentar efeitos colaterais e provocar resistência fúngica em função dos tratamentos de longo prazo. Assim, a indústria farmacêutica tem buscado novos princípios ativos na intenção de controlar as doenças causadas por fungos. Considera-se o uso de compostos como os óleos essenciais (OEs) uma alternativa natural importante, em função da atividade farmacológica que apresentam. Neste contexto, o objetivo principal do presente trabalho foi avaliar a atividade antifúngica de 8 OEs frente a isolados de fungos dematiáceos ambientais e clínicos, e determinar a concentração inibitória mínima (CIM) e a concentração fungicida mínima (CFM) dos mesmos. Para tal, foi empregado o método de diluição em meio de cultura sólido com 5 diferentes concentrações dos óleos (0,25; 0,5; 0,75; 1,0 e 1,25mg/mL) acrescidos de 2,5% DMSO e 0,5% Tween 80. A avaliação da CIM ocorreu ao final do décimo dia de incubação, quando foi mensurado o crescimento radial fúngico, e a CFM durante os 30 dias subsequentes. Além disso, análises qualitativas e quantitativas da composição química dos OEs foram realizadas por cromatografia gasosa acoplada a espectrômetro de massas (CG-EM). A identificação molecular dos isolados utilizados na CIM ocorreu por meio do sequenciamento da região ITS do DNA genômico e análise de distância filogenética. Os fungos foram submetidos ao teste de tolerância a diferentes temperaturas (28; 30; 33; 37; 40º C) por um período de incubação de 21 dias. Os resultados obtidos da CIM confirmaram que os OEs de Cymbopogon citratus e C. martinii apresentaram a maior atividade inibitória na concentração de 0,75 mg/mL para todos os isolados testados. Para os isolados clínicos, o monoterpeno Citral apresentou a CIM de 0,5mg/mL para Fonsecaea sp. A CFM foi observada na concentração de 1,0 mg/mL para o isolado Phialophora sp. Para os isolados ambientais, as melhores CFM foram obtidas com os OEs de C. citratus e Syzygium aromaticum, que controlaram 46% e 40% do crescimento das culturas fúngicas, respectivamente. Foi inesperada a ausência de inibição dos óleos de Ocimum basilicum e Melaleuca alternifolia, principalmente dessa última cujo efeito tem sido relatado em diversas situações. Contudo, a análise química revelou que o óleo comercial de M. alternifolia utilizado nesse estudo apresentou baixas taxas do composto tido como majoritário (terpinen-4-ol), o que pode ter reduzido a qualidade e eficiência do mesmo. Os gêneros de fungos identificados foram Cladosporium, Cladophialophora, Curvularia, Exophiala e Penidiellopsis. O crescimento ótimo dos isolados ocorreu na faixa de 28 a 30°C, com exceção das linhagens LMA 484 (Curvularia sp.) e LMA 836 (Exophiala bergeri) que cresceram a 37°C. Neste trabalho podemos concluir que para os isolados fúngicos dematiáceos ambientais, OEs C. citratus e C. martinii possuem atividade inibitória e C. citratus e S. aromaticum apresentam ação fungicida. Para os isolados fúngicos dematiáceos clínicos, o monoterpeno Citral apresentou atividade inibitória e fungicida. Os OEs são promissores para o desenvolvimento de novos fármacos, como evidenciado nesse trabalho, e por serem de origem natural contribuem de forma saudável para o bem-estar, contribuindo para melhorar a qualidade de vida da nossa sociedade
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Abstract: Dematiaceous fungi are ubiquitous to all environments, and responsible for various functions, including as opportunistic and pathogenic agents in humans and animals, favored by the presence of melanin in the cell wall, which is related to the ability to cause topical or systemic mycoses....
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Abstract: Dematiaceous fungi are ubiquitous to all environments, and responsible for various functions, including as opportunistic and pathogenic agents in humans and animals, favored by the presence of melanin in the cell wall, which is related to the ability to cause topical or systemic mycoses. Synthetic antifungals are used for treatment of those mycosis, but they come with disadvantages of side effects and fungal resistance due to long-term treatments. Thus, the pharmaceutical industry has been soughing for new active principles to control fungal-caused diseases. The use of essential oils (EOs) compounds is considered an important natural alternative due to their pharmacological activity. In this context, the main objective of this study was to evaluate the antifungal activity of 8 EOs against isolates of environmental and clinical dematiaceous fungi and to determine their minimum inhibitory concentration (MIC) and minimum fungicidal concentration (MFC). For this purpose, the solid culture medium dilution method was employed with 5 different concentrations of oils (0.25; 0.5; 0.75; 1.0 and 1.25 mg/mL) added with 2.5% DMSO and 0.5% Tween 80. MIC tests were performed at the end of the tenth day of incubation, fungal radial growth was also measured, and MFC was determined during the subsequent 30 days. Additionally, qualitative and quantitative analyses of the chemical composition of EOs were carried out by gas chromatography coupled with mass spectrometry (GC-MS). Molecular identification of the isolates used in the MIC tests was achieved through sequencing of the ITS region of genomic DNA and phylogenetic distance analysis. The fungi were subjected to tolerance testing at different temperatures (28; 30; 33; 37; 40°C) for a 21-day incubation period. The MIC results obtained confirmed that the EOs from Cymbopogon citratus and C. martinii exhibited the highest inhibitory activity at a concentration of 0.75 mg/mL for all tested isolates. For clinical isolates, the monoterpene Citral presented an MIC of 0.5 mg/mL for Fonsecaea sp. MFC was detected at a concentration of 1.0 mg/mL for the Phialophora sp. isolate. For environmental isolates, the best MFCs were obtained with the EOs from C. citratus and Syzygium aromaticum, which controlled 46% and 40% of fungal culture growth, respectively. The absence of inhibition by the oils of Ocimum basilicum and Melaleuca alternifolia was unexpected, especially the latter, whose effect has been reported in various situations. However, chemical analysis revealed that the commercial M. alternifolia oil used in this study had low levels of the compound considered as the major component (terpinen-4-ol), which may have reduced its quality and efficiency. The identified fungal genera were Cladosporium, Cladophialophora, Curvularia, Exophiala, and Penidiellopsis. Optimal growth of the isolates occurred in the range of 28 to 30°C, except for the LMA 484 (Curvularia sp.) and LMA 836 (Exophiala bergeri) strains, which grew at 37°C. In this study, we concluded that for environmental dematiaceous fungi, EOs from C. citratus and C. martinii have inhibitory activity, and C. citratus and S. aromaticum exhibit fungicidal action. For clinical dematiaceous fungal isolates, the monoterpene Citral showed inhibitory and fungicidal activity. EOs are promising for the development of new drugs, as seen from our results, and as they are of natural origin, they contribute to improve human healthy way to well-being, ensuring quality of our lives
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Angelis, Derlene Attili de, 1963-
Orientador
Schreiber, Angélica Zaninelli, 1965-
Avaliador
Atividade antifúngica de óleos essenciais frente a fungos dematiáceos [recurso eletrônico]
Milena Binatti Ferreira
Atividade antifúngica de óleos essenciais frente a fungos dematiáceos [recurso eletrônico]
Milena Binatti Ferreira