Resumo: Em humanos, os sintomas e sinais clínicos observados nos casos graves de envenenamento pela aranha Phoneutria nigriventer incluem: taquicardia, arritmias, choque neurogênico, priapismo, edema pulmonar agudo e convulsões. Várias frações do veneno já foram isoladas e caracterizadas, sendo a maioria delas de ação neurotóxica, além do conteúdo de histamina e serotonina também observados. É conhecido que o veneno possui efeito na ativação do sistema de calicreÚlas com formação de cininas, além de provocar retardo no fechamento dos canais de sódio, importantes na eletrogênese neuronal. Com base nos efeitos do envenenamento e fundamentados no conhecimento das propriedades biológicas da peçonha de Phoneutria nigriventer, nossa proposta foi verificar a capacidade do veneno em provocar alterações na permeabilidade da barreira hematoencefálica (BHE) de ratos. Após a injeção intravenosa de O,85mg/kg de veneno bruto, a neurotoxicidade foi investigada no SNC através de métodos imunohistoquímicos e ultraestruturais pelo emprego do traçador extracelular nitrato de lantânio. Para averiguar do envolvimento do óxido nítrico, como possível coadjuvante no processo de quebra da BHE, utilizamos as técnicas de westem blot e cromatografia de troca iônica em homogenados de cérebro. Os resultados rcomprovaram que o veneno quando injetado sistemicamente é capaz de quebrar a BHE, particularmente na região do hipocampo. O aumento da permeabilidade foi inicialmente observado em arteríolas e vênulas pós-capilares, no período de 18 horas a 5 dias após inoculação. Esse aumento pareceu ocorrer tanto pela via transendotelial, através do transporte vesicular aumentado, quanto pela via paracelular, por entre as junções interendoteliais. Concomitantemente, foram observadas alterações morfológicas no tecido cerebral circunjacente, caracterizadas pelo edema vasogênico acompanhado por pés astrocitários perivasculares edematosos. Nove dias após a inoculação da solução de veneno, foi observado o acometimento dos capilares que compõem a BHE. A quebra da BHE neste segmento vascular foi caracterizada somente pelo aumento do transporte transcelular pinocitótico. As análises bioquímicas e farmacológicas determinaram o provável envolvimento do óxido nítrico (isoforma endotelial da óxido nítrico sintase) como mediador da quebra na barreira aos 9 dias Ver menos

Abstract: Symptoms of envenomation by the spider Phoneutria nigriventer in humans include: priapism, neurogenic shock, tachycardia, arrhythmias, acute lung oedema and convulsions. SeveraI polypeptide fractions of the venom were isolated and characterized, the majority of which are neurotoxic. Histamine and serotonin are aIso constituents. The venom activates the kallikrein-kininogen-kinin system and delays sodium channel inactivation. The aim of the present study was to investigate the capacity of the venom in promoting blood-brain barrier (BBB) breakdown in adult rats. After endovenous injection of 0.85 mg/kg of the whole venom, CNS lesions were evaIuated by conventionaI light microscopy imunohistochemistry and ultrastructuraI methods using the extracellular tracer lanthanum nitrate. In order to determine a possible coadjuvant role of nitric oxide in the breakdown of BBB, westem blot and ion exchange chromatography of brain homogenates were done. The results showed that the venom of Phoneutria nigriventer injected systemicaIIy is able to induce the breakdown of the BBB, particularly in the hippocampus. The increase of venom-induced permeability was first detected in arterioles and postcapillary venules 18 h to 5 days after inoculation. The increased permeation of the extracellular tracer across arterioles and venules appeared to occur both by transendotheliaI and intercellular routes, i.e. by pinocytic transport and through interendotheliaI junctions. ConcomittantIy, the surrounding tissue showed vasogenic oedema and swollen astrocytic processes. Nine days after venom injection, capillaries were aIso affected. BBB breakdown at capillary leveI was characterized by increased pinocytotic transporto ImmunohistochemicaI, biochemical and pharmacologicaI assays corroborated the venom ultrastructuraI effects in the BBB, by showing increased GF AP and eNOS, and unchanged iNOS activities, respectively. The results suggest that Phoneutria nigriventer venom increases the blood-brain barrier permeability possibly by a nitric oxide-mediated mechanism through increased endotheliaI nitric oxide synthase isoform activity at 9 days postinjection Ver menos